ĆWICZENIE 5

Oznaczanie liczby drobnoustrojów.

Zadanie 1. Praca w parach.

Oznaczanie liczby drobnoustrojów metodą rozcieńczeń,

Wykorzystujemy hodowlę płynną danego szczepu.

1. Wykonać sterylnie szereg rozcieńczeń płynnej hodowli wyjściowej szczepu w płynie fizjologicznym. Rozcieńczenia: 10^-1 do 10^-6.

2.Wykonać sterylnie po jednym posiewie dywanowym z rozcieńczeń 10^-5, 10^-6.

Płytki inkubować 7 dni w odpowiedniej temperaturze. Następnie odczytać liczbę wyrosłych kolonii bakterii i określić ilość mikroorganizmów w 1 ml hodowli nierozcieńczonej.

Zadanie 2. Praca w parach

Oznaczanie liczby drobnoustrojów metodą turbidymetryczną.

W ćwiczeniu tym należy wykorzystać, dołączoną do instrukcji, krzywą wzorcową zależności gęstości optycznej roztworu od logarytmu dziesiętnego liczby bakterii Escherichia coli w 1ml hodowli.

Wykorzystujemy hodowlę płynną szczepu Escherichia coli.

1. Wykonać sterylnie szereg rozcieńczeń hodowli wyjściowej (rozcieńczenia 5-krotne, 8-krotne, 10-krotne, 20-ktotne 100- krotne).

2. Dla każdego z rozcieńczeń hodowli szczepu Escherichia coli wykonać pomiar ekstynkcji przy długości fali 550nm .

Korzystając z krzywej wzorcowej odczytać liczbę bakterii w analizowanych rozcieńczeniach a następnie obliczyć liczbę bakterii w 1 ml hodowli nierozcieńczonej.

Porównać otrzymane wyniki obu metod.

---