Badania laboratoryjne

Badanie płynu przesiękowego i wysiękowego

Gromadzenie się płynu w jamie otrzewnowe, opłucnowej i przestrzeniach tkankowych jest zawsze

objawem chorobowym

Rozróżnianie przesięku i wysieku próbą Rivalty – próba ma na celu różnicować płyny na zasadzie

koagulacji białka pod wpływem kwasu octowego. Zawartość białka w płynie wysiękowym jest

wyraźnie większa niż w przesiekowym



Wykonanie: do 100ml wody destylowanej dodać 2 krople kwasu octowego lodowatego.

Następnie wkraplać pojedyncze krople badanego płynu i obserwować wygląd opadających

kropli



Ocena wyniku: widoczne przejrzyste smugi, bez zmętnienia lub z lekka opalescencja kropli

wskazuje na płyn przesiekowy. Wyraźne zmętnienie wpuszczonej kropli wskazuje na wysięk

Badanie właściwości fizycznych – określa się je oglądając świeży płyn w szklanym naczyniu



Określenie barwy: bezbarwny, jasnożółty, żółty, brunatny, czerwony, krwisty



Określenie przejrzystości i konsystencji: przejrzysty, słabo metny, włóknikowy, posokowaty,

ropny, szybko krzepnący



Określenie woni: bezwonny, gnilny, amoniakalny, moczu



Gęstość: 1,018 – przesięk, powyżej 1,018 - wysięk

Badania laboratoryjne

Badanie płynu przesiękowego i wysiękowego

Ocena wyników:



Płyn przesiękowy – gromadzi się bez odczynu zapalnego, na wskutek zastoju

żylnego i zwiekszonej przepuszczalności naczyń. Towarzyszy niewydolności serca,
marskości wątroby, nerek lub nowotworom wątroby. Płyn przesiekowy u psów i kotów
może być czasami mętny, barwy mlecznej, na wskutek domieszki chłonki lub

kropelek tłuszczu



Płyn wysiekowy – gromadzi się w wyniku odczynu zapalnego, jako efekt urazu,
zakażenia bakteryjnego, choroby nowotworowej o charakterze złosliwym. Płyn o
barwie krwistej i woni gnilnej świadczy o obecności nowotworu w stadium rozpadu

próba Rivalty

barwa

przejrzystość

woń

ciężąr

przesiek

ujemne

przejrzysty

bezwonny

Do 1,018

wysiek

dodatnia

żółty, krwisty

gnilny

Ponad 1,018

rodzaj

badania

zawartość

białka

elementy

osadu

bezbarwny,

jasnożółty

0,5 –

3g/100ml

pojedyncze

komórki

nabłonka

mętny,

posokowaty,

ropny,

włóknikowy

ponad

3g/100ml

liczne

granulocytu,

erytrocyty,

komórki

nabłonka

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie zawartości hemoglobiny – metoda cyjanmethemoglobinowa wg Drabkina



Pod wpływem odczynnika Drabkina hemoglobina i jej pohodne ulegają

przekształceniu w cyjanmethemoglobine, której gestość optyczna mierzy się
fotoelektrycznie



Zestaw:

−

Kolorymetr

−

Odczynnik Drabkina

−

Probówki zwykłe w statywie

−

Pipeta 5 ml, pipeta Sahliego 0,02 ml



Wykonanie: do 5 ml odczynnika Drabkina wlać 0,02 ml badanej krwi i odstawić na 5

min. następnie odczytać wynik za pomocą fotokolorymetru przy długości fali 540 nm.
Następnie wyliczamy z wzoru Hb w g/100ml=E próby/E wzorca*współczynnik



Ocena wyników: spadek ilości hemoglobiny najczęściej w stanach niedokrwistości,
wzrost najczęściej w stanach odwodnienia, co wiąże się z zagęszczeniem krwi

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie liczby hematokrytowej – jest to wyrażony w procentach stosunek

objetoścowy składników upostaciowanych krwi do osocza w okreslonych warunkach
wirowania



Zestaw:

−

Mikrohematokryt (wirówka z tarczą i czytnik)

−

Kapilary heparynizowane



Wykonanie: kapilarę należy przytknąć do kropli krwi, po wypełnieniu do ¾ długości,
zatapiamy wolny koniec w płomieniu palnika, następnie umieszczamy kapilary na

tarczy wirówki, zatopionym końcem na zewnątrzy i wirujemy przez 5 min przy 6000
obr./min. Następnie kapilarę wkładamy do czytnika, ustawionego na podziałce 100.
dolna granica słupka krwinek przy zatopionym końcu kapilary musi równać się z

zaznaczona na listewce dolna kreską. Ruchome ramie czytnika ustawiamy tak, zby
jej środkowa kreska przcinała się z górnym końcem słupa osocza. Następnie nie
poruszając linijki, przesuwamy listewkę z kapilara w lewo do momentu przecięcia się

kreski na linijce z górnym końcem słupa krwinek



Ocena wyników: spadek najczęściej w niedokrwisrtościach, spadek ilości krwinek
czerwonych lub uwodnienie krwi, wzrost – stany odwodnienia organizmu

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie liczby krwinek metodą komorową



Zestaw

−

Mikroskop

−

Komora Thoma, Burknera lub Thoma – Neu

−

Mieszalnik do krwinek czerwonych (z czerwoną perełką)

−

Płyn Hayema



Wykonanie: badaną krew pobrać do mieszalnika do podziałki 0,5, obetrzeć watą
koniec mieszalnik, wciągnąć płyn Hayema do podziałki 101. wymieszać przez
obracanie. Otrzymujemy krew rozcieńczoną w stosunku 1:200. następnie

przygotowujemy komre do obliczeń: siatkę hemocytometru nakrywamy szkiełkiem
nakrywkowym , nasuwając ją lekko na zwilzone słupy komory, az do uzyskania
prązków tęczowych. Tak przygotowaną komorę ustawiamy na stoliku i odszukujemy

pod małym powiekszeniem siatkę. Rozcieńczoną krew znowu mieszamy przez 1 min,
pierwsze 2 – 3 krople upuszczamy na watę i dopiero 4 krople umieszczamy na brzeg
komory, tak aby zawartośc dostała się pod szkiełko. Po ustaniu ruchu krwinek

liczymy ich ilość w 5 dużych kwadratach czyli 80 małych (komora Thoma). Ażeby
otrzymać ilość krwinek w 1 mm3 obliczoną ilośc krwinek mnożymy przez 10000

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie liczby krwinek białych metodą komorową



Zestaw:

−

Mikroskop

−

Mieszalnik do krwinek białych (z białą perełką)

−

Komora Thoma

−

Płyn Turcka



Wykonanie: do mieszalnika nabieramy krwi do podziałki 0,5, następnie wycieramy
wata o nabieramy rozcieńczalnika Tuckera do podziałki 11. otrzymujemy krew
rozcieńczoną w stosunku 1:20. przygotowujemy komore jak przy badaniu krwinek

czerwonych. Następnie mieszamy ponownie krew, spuszczamy 1 – 2 krople i trzecią
wprowadzamy do komory. Po ustaniu ruchu krwinek obliczamy we wszystkich
kwadratach siatki liczbe krwinek. Ażeby otrzymać ilość krwinek w 1mm3 mnozymy

przez 200

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie obrazu białokrwinkowego (leukogram)



Zestaw:

−

Mikroskop z obiektywem imersyjnym

−

Szkiełka podstawowe

−

Cylinder miarowy 100 ml

−

Kuweta z mostkiem do barwienia

−

Alkohol metylowy

−

Barwnik Giemsy i May – Grunwalda



Wykonanie: na szkiełko podstawowe należy pobrać małą krople krwi, następnie drugim

szkiekiem o gładkim brzegu dotknąć krew tak aby rozpłyneła się wzdłuż krawędzi i niezbyt

szybkim ruchem ciągłym rozprowadzić krew na cała długość szkiełka podstawowego. Rozmaz

powinien być węższy od szerokości szkiełka, jednolity i cienki. Rozmazy suszymy na wolnym

powietrzu w temperaturze pokojowej



Barwienie metodą Giemsy – wysuszone preparaty utrwalamy w alkoholu metylowym przez 3

min. następnie barwimy roztworem barwnika (1 – 2 krople barwnika na 1 ml wody) przez 15 –
20 min, spłukujemy wodą destylowaną i ponownie barwimy 10 – 15 min, następnie płuczemy

woda destylowaną i pozostawiamy do wyschnięcia

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej



Barwienie metodą Pappenheima – barwimy preparaty wyschniete, nieutrwalone. Na

wyschniety preparat nalewamy barwnik May – Grunwalda na 3 min, po tym czasie
bez zlewania barwnika dodajemy równą ilośc wody destylowanej i pozostawiamy na 2
– 3 min, spłukujemy woda i wycieramy zabarwiony spód szkiełka i barwimy
roztworem wodnym barwnika Giemsy przez 10 – 15 min. następnie spłukujemy i

suszymy



Technika liczenia: na wysuszony rozmaz dajemy krople olejku imersyjnego i
oglądamy preparat pod obiektywem 100x, oglądamy preparat linią łamaną i każdą
znalezioną krwinke zapisujemy na papierze lub przy użyciu licznika do krwinek

białych

Erytrocyty

Neutrofil

Eozynofil

Bazofil

Limfocyt

Monocyt

Trombocyt

Badania laboratoryjne

Badanie krwi obwodowej

Oznaczanie czasu krzepnięcia krwi metoda Lee – White'a



Wykonanie: krew pobieramy z żyły strzykawką płukaną płyn fizjologicznym. Do

probówki wypłukanej płynem fizjologicznym wlewamy 2 ml krwi i właczamy stoper i
wkładamy probówke do łaźni wodnej 37ºC i co 30 sek przechylamy probówkę w celu
stwierdzenia końcowego momentu krzepnięcia. Jako końcowy moment krzepnięcia
przyjmuje się czas, w którym zostanie zatrzymany swobodny przepływ krwi. Wynik

podaje się w minutach i sekundach



Ocena wyników:

−

Przedłużenie czasu krzepnięcia może wystepować w niektórych chorobach
zakażnych, niedokrwistości i skazach krwotocznych

−

Skórcenie czasu krzepnięcia może wystepować po krwotokach, w stanach
wyniszczenia, po podaniu witaminy C i K, oraz środków zwiększających
krzepliwość krwi