ANALIZA GENETYCZNA

ANALIZA GENETYCZNA

W MEDYCYNIE

W MEDYCYNIE

SĄDOWEJ

SĄDOWEJ

Badania klasyczne - wykrywalność

AB0

około 1 roku

Gm (1)

około 1 roku

PGM1

2-3 miesiące

ESD

2-10 tygodni

Badania DNA - wykrywalność

NIEOGRANICZONA

WYKRYWALNOŚĆ

• Krew
• Nasienie
• Ślina
• Mocz
• Włosy
• Zęby
• Kość
• Tkanka

komórka 2n

komórka 2n

1 x 10

1 x 10

-10

-10

g

g

plemnik

plemnik

100 pg DNA

100 pg DNA

PCR

PCR

włos

włos

Badania klasyczne -

polimorfizm

AB0

0, A, B, AB

Gm (1)

Gm(1), Gm(-1)

PGM1

1-1, 1-2, 2-2

np.

4

allele =

4

homozygoty +

6

heterozygot =

10

genotypów

Badania DNA - polimorfizm

Locus genomowego DNA – średnio

7

alleli

=

28

genotypów

Multiplex PCR

15 loci

28

15

= 5 097 655 355 238 390 956 032

(5 x 10

21

)

GENOMOWE DNA

Region VNTR

Region VNTR

chromosom

Jądro
komórkowe

Dwuniciowa
struktura DNA

nukleotydy

Variable number of tandem repeat (VNTR)

9 powtórzeń

5 powtórzeń

AATG

AATG

AATG

lokus

lokus

allel 5,9

allel 5,9

genotyp 5-9

genotyp 5-9

HETEROZYGOTA = allele różnią się od siebie

Variable number of tandem repeat (VNTR)

7 powtórzeń

AATG

AATG

AATG

7 powtórzeń

lokus

lokus

allel 7,7

allel 7,7

genotyp 7-7

genotyp 7-7

HOMOZYGOTA = allele jednakowej długości

CSF1PO

D5S818

D21S11

TH01

TPOX

D13S317

D7S820

D16S539

D18S51

D8S179

D3S1358

FGA

VWA

AMEL

AMEL

13 CODIS loci - Combined DNA Index

System

Izolacja

DNA

Izolacja

DNA

ANALIZA GENETYCZNA

Amplifikacja DNA

Amplifikacja DNA

Analiza jakościowa

i ilościowa

Analiza jakościowa

i ilościowa

Detekcja alleli DNA

Detekcja alleli DNA

Ocena wartości

dowodowej badania

Ocena wartości

dowodowej badania

GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA

• Badania pokrewieństwa - ustalanie
ojcostwa

• Ustalanie tożsamości zwłok

• Identyfikacja osób w katastrofach
masowych

• Identyfikacja sprawców przestępstw –
śladów biologicznych - bazy profili DNA

• Identyfikacja osób zaginionych

GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA

•

identyfikacja osobnicza

• badanie pokrewieństwa

WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY

badanie spornego ojcostwa

ANALZA VNTR W OJCOSTWIE

ANALZA VNTR W OJCOSTWIE

1 2 3

1 2 3

1-domniemany ojciec 2- dziecko 3-matka dziecka

ANALZA OJCOSTWA - STR

ANALZA OJCOSTWA - STR

Brak wyłączenia

Wyłączenie

lub

Mutacja

OCENA WARTOŚCI DOWODOWEJ

OCENA WARTOŚCI DOWODOWEJ

BADANIA Z ZAKRESU

BADANIA Z ZAKRESU

GENETYKI SĄDOWEJ

GENETYKI SĄDOWEJ

Izolacja

DNA

Izolacja

DNA

ANALIZA GENETYCZNA

Amplifikacja DNA

Amplifikacja DNA

Analiza jakościowa

i ilościowa

Analiza jakościowa

i ilościowa

Detekcja alleli DNA

Detekcja alleli DNA

Ocena wartości

dowodowej badania

Ocena wartości

dowodowej badania

GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA

•

identyfikacja osobnicza

• badanie pokrewieństwa

WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY

badanie spornego ojcostwa

ZASADY WYŁĄCZANIA OJCOSTWA

ZASADY WYŁĄCZANIA OJCOSTWA

U dziecka pojawia się nowa cecha,

U dziecka pojawia się nowa cecha,

nieobecna u pozwanego o ojcostwo

nieobecna u pozwanego o ojcostwo

mężczyzny ani u matki

mężczyzny ani u matki

Dziecko nie dziedziczy żadnej

Dziecko nie dziedziczy żadnej

cechy po pozwanym o ojcostwo

cechy po pozwanym o ojcostwo

mężczyźnie

mężczyźnie

i

lub

OPINIOWANIE W ANALIZIE

OPINIOWANIE W ANALIZIE

OJCOSTWA

OJCOSTWA

POTWIERDZENIE

POTWIERDZENIE

ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM

ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM

99.999% (PI=100 000)

99.999% (PI=100 000)

EKSPERTYZA DNA

EKSPERTYZA DNA

WYŁĄCZENIE

WYŁĄCZENIE

•DNA Comission of the International Society of Forensic Genetics

•Komisja Hemogenetyki Polskiego Towarzystwa Medycyny Sadowej i Kryminologii

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

Szansa ojcostwa

- PI



Prawdopodobieństwo ojcostwa

Ocenia,

Ocenia,

ile razy bardziej prawdopodobne

ile razy bardziej prawdopodobne

jest

jest

ojcostwo badanego

ojcostwo badanego

pozwanego

pozwanego

w porównaniu do

w porównaniu do

ojcostwa losowo

ojcostwa losowo

wybranego mężczyzny

wybranego mężczyzny

dla konkretnego

dla konkretnego

wyniku ekspertyzy

wyniku ekspertyzy

Szansa ojcostwa

- PI



Prawdopodobieństwo ojcostwa - P

P =

———

PI

PI

+1

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

Lokus

Przykładowo:

D12S11

matka:

11 - 11

mężczyzna:

15 - 15

dziecko:

11 - 15

Wówczas:

PI = 1/częstość(15)

np. jeżeli częstość(15)=0.2, to

PI = 1/0.2

= 5

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

PI = 5

oznacza, że hipoteza, iż badany

mężczyzna jest ojcem dziecka jest

5 razy

bardziej

prawdopodobna

, niż hipoteza, że

ojcem jest inny, losowo wybrany, mężczyzna

z populacji.

np. jeżeli częstość(Q)=0.2, to

PI = 1/0.2 = 5

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

PI = 5



Prawdopodobieństwo ojcostwa

P =

——— = 0.83 = 83%

5

5

+1

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

Łączna szansa ojcostwa – PI c



Zasada iloczynu – „PRODUCT RULE”

PI c

=

PI

1

lokus

x

PI

2 lokus

x

PI

3 lokus

x .......

OPINIOWANIE W ANALIZIE

OPINIOWANIE W ANALIZIE

OJCOSTWA

OJCOSTWA

POTWIERDZENIE

POTWIERDZENIE

ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM

ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM

99.999% (PI=100 000)

99.999% (PI=100 000)

EKSPERTYZA DNA

EKSPERTYZA DNA

WYŁĄCZENIE

WYŁĄCZENIE

•DNA Comission of the International Society of Forensic Genetics

•Komisja Hemogenetyki Polskiego Towarzystwa Medycyny Sadowej i Kryminologii

Jeżeli obliczenia PI dla pojedynczego układu dadzą

PI = 5

,

to ile układów należy zbadać,

aby otrzymać minimalną łączną szansa

ojcostwa

PI c = 100 000

?

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

8 układów

99.999%

 

 

Szansa

ojcostwa

 

 

Prawdopodo-

bieństwo

ojcostwa

 

10

100

1000

10 000

100 000

1 000 000

 

 

90 %
99 %
99.9 %
99.99 %
99.999 %
99.9999 %

 

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA

Wartość wymagana w opinii potwierdzającej ojcostwo

Wartość wymagana w opinii potwierdzającej ojcostwo

WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY

identyfikacja osobnicza

Analiza porównawcza

uzyskanego profilu DNA

Analiza statystyczna -

CZĘSTOŚCI POPULACYJNE

Analiza statystyczna -

CZĘSTOŚCI POPULACYJNE

BADANIA IDENTYFIKACYJNE

Niezgodność

Zgodność

OPINIA

P r a w d o p o d o b i e ń s t

w o przypadkowej zgodności

OPINIA

P r a w d o p o d o b i e ń s t

w o przypadkowej zgodności

GENETYKA POPULACYJNA – prawo

GENETYKA POPULACYJNA – prawo

Hardy’ego i Weinberga

Hardy’ego i Weinberga

STRUKTURA GENETYCZNA POPULACJI

•

odpowiednio liczna

•

kojarzenie losowe

•

brak doboru naturalnego

•

brak selekcji, mutacji i migracji

STAN DYNAMICZNEJ RÓWNOWAGI

Częstość występowania różnych

Częstość występowania różnych

genotypów

genotypów

w populacji jest stała

w populacji jest stała

i zależna jedynie od

i zależna jedynie od

częstości występowania

częstości występowania

alleli

alleli

w

w

populacji

populacji

OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU

OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU

AA = a

2

CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW

BB = b

2

AB =
2ab

 HWE w populacji

Jeżeli allel „a” w lokus A ma częstość a

a allel „b” w lokus B ma częstość

b

ILOCZYN CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW

=

CZĘSTOŚĆ PROFILU

CZĘSTOŚĆ PROFILU

1

1

= 1 GENOTYP NA ....

= 1 GENOTYP NA ....

OSÓB

OSÓB

CZĘSTOŚĆ GENOTYPU

CZĘSTOŚĆ GENOTYPU

PRAWDOPODOBIEŃSTWO PRZYPADKOWEJ

ZGODNOŚCI

Przykładowo:

TH01 lokus

Genotyp osoby -

6-9

Częstość allela

6

= 0.13

Częstość allela

9

= 0.15

WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY DNA

Wówczas:

częstość genotypu

6-9

=

2

x częstość allela (

6

) x częstość allela (

9

) =

2 x 0.13 x 0.15 =

0.039

Badany genotyp wystąpi w populacji

z częstością

0.039

Prawdopodobieństwo

przypadkowej zgodności =

1/0.039

=

25.664

, to znaczy,

że pojawi się w

1

przypadku na

25

osób

WARTOŚĆ DOWODOWA W IDENTYFIKACJI

WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY DNA

CZĘSTOŚ

ć

PROFILU – PF



CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW - GF

PF =

GF

1 lokus

x

GF

2

lokus

x

GF

3 lokus

x

.......

1

1

= 1 PROFIL NA ....

= 1 PROFIL NA ....

OSÓB

OSÓB

CZĘSTOŚĆ PROFILU

CZĘSTOŚĆ PROFILU

PRAWDOPODOBIEŃSTWO PRZYPADKOWEJ ZGODNOŚCI

OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU

OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU

AA = a

2

CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW

BB = b

2

AB =
2ab

ILOCZYN CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW

=

CZĘSTOŚĆ PROFILU

CZĘSTOŚĆ PROFILU

1

1

=

=

1 PROFIL NA

1 PROFIL NA

2169

2169

OSÓB

OSÓB

0.000461

0.000461

PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU DNA

1

1

=

=

1 PROFIL NA

1 PROFIL NA

8 333 333 333

8 333 333 333

OSÓB

OSÓB

0.00000000000012

0.00000000000012

PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU DNA

PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU

DNA