BIOTECHNOLOGIA W
KRYMINALISTYCE

Wprowadzenie

Największe zmiany, jakie zaszły w ostatnich
latach w biologii kryminalistycznej, związane
są z wprowadzeniem do badań technik
genetyki molekularnej. Dzięki pracowania
reakcji PCR możliwa stała się
indywidualizacja tak małych śladów, jak np.
pojedyncza cebulka włosowa, czy też
mikrośladowe zaplamienia krwią lub
wydzielinami ciała ludzkiego, wobec których
klasyczne metody serologiczne były
bezradne.

Metody biotechnologiczne

• Ekstrakcja DNA z biologicznych

próbek

• Metody typowania DNA w locus DQα
• 5 loci PolyMarkera
• Locus D1S80, TH01, VWA, FGA, CD4
• Fragmenty genu amelogeniny

umożliwiające określenie płci

Locus DQα i pięć loci

PolyMarkera

• DQα (Human Leukocyte Antigen)
• LDLR (Low Density Lipoprotein

Receptor)

• GYPA (Glycophorin A)
• HBGG (Hemoglobin G Gammaglobin)
• D7S8
• GC (Group Specific Component)

Locus D1S80

• Region VNTR
• 16 par zasad powtarzających się

wielokrotnie

• Definiowane cyframi od 14 do 41
• Wysoki współczynnik dyskryminacji

Fragment genu

amelogeniny

• Gene Print™ Sex Determination

System

• XX: 212pz
• XY: 212 i 218pz
• Wysoce konserwatywna budowa

Fragment genu

amelogeniny

STR w locus TH01, VWA, FGA,

CD4

• Shost Tandem Repeats liczące 2-7 pz
• Wysoki polimorfizm
• TH01 na chromosomie 11
• VWA na chromosomie 12
• FGA ma chromosomie 6
• CD4 na chromosomie 12

Ekstrakcja DNA

• Oddzielne pomieszczenie
• Niezbędne wyposażenie
• Ekstrakcja organiczna - bardzo

skuteczna metoda

• Procedura

Ekstrakcja DNA

• Krew płynna, fragmenty zamrożonych

tkanek miękkich

• Plamy krwi, śliny, nasienia
• Wymazy z ust
• Drobiny krwi, zeskrobiny spod paznokci
• Plamy będące mieszaninami
• Wymazy z pochwy
• Włosy

Etapy badań:

• Ekstrakcja DNA
• Ocena ilości wyizolowanego DNA
• Typowanie DNA w układzie

PolyMarkera i HLA DQα: nastawienie
reakcji PCR, ocena produktów PCR na
żelu agarozowym, hybrydyzacja i
barwienie produktów PCR

• Interpretacja wyników

Interpretacja wyników PM

• Na podstawie zabarwionych na

niebiesko kropek

• Odczyt pasków w stanie mokrym
• Intensywność zabarwienia świadczy

o pozytywnej próbie

• Różnica intensywności wskazuje na

mieszany charakter próbki

• Kontrola ujemna

Interpretacja wyników w locus

DQα

• Porównanie uzyskanego wzoru na

pasku testowym z sondami
komplementarnymi

• Początek odczytu od C
• Kontrola ujemna
• Kontrola dodatnia
• Wybarwienie na kolor niebieski

Definiowanie alleli

• Na zasadzie porównania
• Na wynik duży wpływ ma ilość DNA
• Zjawisko wypadania alleli (allele

dropout)

• Przykłady

Archiwizacja żeli

Definiowanie alleli

TH01,VWA,FGA,CD4

• Sprawdzenie pochodzenia prób
• Typowanie na zasadzie porównania
• Odczyt na mokrych żelach
• Przykłady

Literatura:

• „Badanie polimorfizmu DNA przy użyciu

techniki PCR” - Wydawnictwo Centralnego
Laboratorium Kryminalistycznego KGP
Warszawa 2000

• http://clk.policja.pl/portal/clk/503/11021/Zes

pol_Bazy_Danych_DNA.html

• http://clk.policja.pl/portal/clk/503/11026/Zes

pol_Badan_Biologicznych.html

• http://www.biote21.com/html/pl/sek-home-

01.html

Pytania: