Enzymy
Funkcja enzymu wyraża się przebiegiem katalizowanej reakcji,
więc ilość enzymu oznacza się na podstawie pomiaru szybkości reakcji
w określonych warunkach.
Jednostki aktywności enzymatycznej
Komisja Enzymatyczna Międzynarodowej Unii Biochemicznej
wprowadziła pojęcie bezwzględnej międzynarodowej jednostki
standardowej (U) enzymów i określiła warunki jej oznaczania.
Enzymy
Jednostką (U) każdego enzymu jest ta jego ilość, która
katalizuje przemianę 1 źmola substratu w ciągu 1 minuty,
w temp. 30°ðC i w optymalnych warunkach (pH i stężenie
substratu).
U, mU, kU
Aktywność właściwa to liczba jednostek aktywności
na 1 mg białka.
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Wpływ inhibitorów na aktywność enzymatyczną
Inhibitory są substancjami zmniejszającymi szybkość reakcji enzyma-
tycznej. Zahamowanie aktywności jest jednym ze sposobów regulacji
procesów życiowych w komórce.
Inhibicja odwracalna charakteryzuje się zdolnością do dysocjacji
kompleksu enzym-inhibitor.
Inhibicja nieodwracalna powoduje denaturacjÄ™ enzymu (czÄ…steczki
białkowej) przez związki chemiczne i czynniki fizyczne, utlenienie grup  SH
lub ich alkilowanie.
Enzymy
Wpływ inhibitorów na aktywność enzymatyczną
Wyróżnia się typy inhibicji odwracalnej:
- kompetycyjna,
- niekompetycyjna,
- akompetycyjna,
- mieszana.
Enzymy
Hamowanie aktywności enzymatycznej
Inhibitory kompetycyjne (współzawodniczące)  wykazują ścisłe podobień-
stwo strukturalne do substratu, konkurujÄ… z nim o centrum katalityczne,
hamowanie zachodzi w miejscu wiązania substratu, zwiększają Km, efektywność
tych inhibitorów jest oceniana przez wykres podwójnych odwrotności 1/vi
względem 1/[S]).
Szybkość reakcji zależy od stężenia substratu, inhibitora oraz względnego
powinowactwa substratu i inhibitora do centrum aktywnego enzymu.
Enzymy
Hamowanie aktywności enzymatycznej
Inhibitory niekompetycyjne hamują szybkość reakcji enzymatycznej przez
działanie na wolny enzym lub na kompleks ES. Hamowane zależy od stężenia
inhibitora i powinowactwa do enzymu, a nie stężenia substratu. Inhibitor i
substrat wiążą się odwracalnie i niezależnie od siebie w różnych miejscach
enzymu.
Inhibitor niekompetycyjny zmniejsza Vmaks, nie wpływają na Km.
Nie ma konkurencji między substratem i inhibitorem, ponadto inhibitor nie
wykazuje podobieństwa do substratu i wiąże się z inną domeną enzymu.
Enzymy
Hamowanie aktywności enzymatycznej
Inhibitor akompetycyjny wiąże się odwracalnie z kompleksem ES, tworząc
nieaktywny kompleks ESI. Wartość Vmax jest mniejsza w obecności tego
inhibitora niż w jego nieobecności, zmniejsza się również wartość Km.
Inhibicja mieszana jest hamowaniem częściowo kompetycyjnym i niekom-
petycyjnym, inhibitor może wiązać się zarówno z E jak i kompleksem ES.
Zmniejsza siÄ™ Vmax i wzrasta Km.
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
Enzymy
W stanach patologicznych zmiany aktywności enzymów są często odbiciem zmian
w narządach  dostarczają więc informacji ułatwiających rozpoznanie schorzenia i
leczenie.
Grupy enzymów występujące w surowicy krwi:
- sekrecyjne,
- ekskrecyjne,
- wskaz
nikowe (indykatorowe).
Enzymy
Sekrecyjne  sÄ… normalnie wydzielane do krwi, np. czynniki
krzepniecia i fibrynolizy, esteraza cholinowa, ceruloplazmina,
lipaza lipoproteinowa&
Wskaz
nikowe  pojawiają się w dużych ilościach po uszko-
dzeniu różnych narządów, są specyficzne.
Ekskrecyjne  ich wzrost obserwuje siÄ™ wskutek przeszkody
w normalnym odpływie różnych wydzielin ustrojowych takich
jak żółć, sok trzustkowy, ciecz sterczowa, ślina (amylaza,
lipaza, fosfataza zasadowa).
Enzymy
Pomiar aktywności enzymatycznej jako wykładnika stanu fizjologicznego
organizmu (AspAT, AlAT, LDH, fosfatazy).
Enzymy