id9449875 pdfMachine by Broadgun Software - a great PDF writer! - a great PDF creator! - http://www.pdfmachine.com http://www.broadgun.com Wyznaczanie toksycznoœci za pomoc¹ testu TTC

Zabiegi wstêpne



Wyznaczyã optymalne stê¿enie TTC w inkubowanych próbkach dla oznaczeñ aktywnoœci TTC.



Wyznaczyã zale¿noœã przyrostu TF od czasu inkubacji.



Wyznaczyã orientacyjnie zakres stê¿eñ powoduj¹cych wyraêny efekt toksyczny. Na tej podstawie wytypowaã szczegóùowe stê¿enia do wùaœciwych pomiarów.

Wykonanie ãwiczenia Nale¿y oznaczyã aktywnoœã mikroorganizmów nie poddanych dziaùaniu substancji toksycznej oraz jednoczesne wyznaczenie wpùywu siedmiu ró¿nych stê¿eñ substancji toksycznej. W tym celu do 16 oznakowanych probówek wirówkowych nale¿y wprowadziã podane w powy¿szej tabelce objêtoœci reagentów: REAGENT

PROBÓWKA

1 i 2 3 i 4 5 i 6 7 i 8 9 i 10 11 i 13 i

15 i

12

14

16

Roztwór

1

1

1

1

1

1

1

1

Na2SO3

Roztwór TTC

1

1

1

1

1

1

1

1

Subst.

-

0,1

0,2

0,3

0,4

0,6

0,8

1

toksyczna

H2O

1,0

0,9

0,8

0,7

0,6

0,4

0,2

-

Osad czynny

7

7

7

7

7

7

7

7

Po wprowadzeniu mikroorganizmów nale¿y inkubowaã próbki w ciemnoœci w temperaturze zgodnej z panuj¹c¹ w naturalnych warunkach hodowli osadu czynnego. Czas inkubacji bêdzie zale¿aù od wykazywanej przez drobnoustroje aktywnoœci, ale powinien on mieœciã siê w zakresie wyznaczonego proporcjonalnego przyrostu TF (najczêœciej 15÷30

minut). Po inkubacji nale¿y próbki odwirowaã, odrzuciã ciecz nadosadow¹ (supernatant) a do probówek wprowadziã dozownikiem po 8 ml metanolu. Po wytrz¹œniêciu zawartoœci próbki ponownie odwirowaã. Zawartoœã TF wyliczyã ze wzoru:

TF = 20•E•(Vmetanolu/Vpr

), czyli TF = E

óbki

•20•(8/7)

Opracowanie wyników



Obliczyã stopieñ toksycznoœci (ST) dla ka¿dego stê¿enia substancji toksycznej wg wzoru: AD  AD

0

T

ST 

AD0

T



Wyznaczyã wartoœci staùych STmax i K dla zale¿noœci ST od C .

T

C

ST  ST

max

T

K  C

W tym celu wykre T

œliã zale¿noœã 1/ST od 1/C . Na podstawie wspóùczynników regresji liniowej wyznaczyã wartoœci: STmax i K.

1/ST

ST

STmax

T

1/ST

½STmax

C

max

ST  STmax

T

K  C

1/CT

-1/K

K

Ct

T



Wykreœliã zale¿noœã ST od C :



wg punktów pomiarowych



wg wzoru (patrz wykres)



Przeprowadziã dyskusjê wyników.