PODSTAWY BIOTECHNOLOGII
MIKROBIOLOGICZNY ROZKŁAD MATERIAŁÓW
(BIODEGRADACJA)
1. Rozkład celulozy
a)
Na zestalony na płytce Petriego agar mineralny nałożyć za pomocą pęsety krążek bibuły filtracyjnej.
b)
Na powierzchni krążka umieścić kilka grudek ziemi kompostowej.
c)
Płytki nie odwrócone wstawić o cieplarki o temp. 30oC na 2-3 tygodnie
d)
Po inkubacji przeprowadzić obserwacje przy użyciu lupy lub mikroskopu stereoskopowego i opisać zmiany, jakie nastąpiły w krążku bibuły filtracyjnej (wytrawienia, zmiany barwy).
e)
Ze zmienionych miejsc pobrać ezą materiał, wykonać preparaty:
• bakteryjny barwiony fuksyną,
• grzybowy w płynie Lugola
f)
Oglądać pod mikroskopem, podać morfologię występujących bakterii i grzybów.
2. Rozkład tkanin
a)
Przygotować sześć pasków wybranej tkaniny o wymiarach 100 x 15 mm.
b)
Trzy paski tkaniny włożyć za pomocą szpatułki do pojemnika z glebą.
c)
Po 2-tygodniowej inkubacji w cieplarce w temp. 28oC wyjąć paski i oczyścić z gleby.
d)
Używając lupy lub mikroskopu stereoskopowego zaobserwować i opisać zmiany wyglądu tkanin.
e)
Sprawdzić wytrzymałość tkanin w porównaniu z kontrolą.
3. Wpływ grzybów na skórę
a)
Na płytce z podłożem Czapek – Doxa za pomocą jałowej pęsety umieścić dwa paski: jeden skóry naturalnej , drugi z materiału skóropodobnego.
b)
Jałową pipetą pobrać 1 cm3 zawiesiny zarodników grzybów, zaszczepić przygotowane płytki i rozprowadzić ją głaszczką na powierzchni badanych próbek.
Płytki z zaszczepionymi próbkami umieścić w cieplarce w temp. 300C i wilgotności względnej 95% na ok. 28 dni.
d)
Po okresie inkubacji badane próbki wyjąć z płytek, zmyć bieżącą wodą wodociągową. Usunąć nadmiar wody przy użyciu bibuły. Paski pozostawić do wyschnięcia w temperaturze pokojowej.
e)
Wysuszone paski oglądać pod lupą lub mikroskopem stereoskopowym i
zaobserwować zmiany w porównaniu z próbką kontrolną (próbka nie poddana działaniu grzyba).
f)
Zanotować wyniki eksperymentu.
4. Wpływ grzybów na tworzywa sztuczne
a)
Do oznaczenia przygotować trzy próbki
b)
Na płytce ze zmodyfikowanym podłożem Czapek – Doxa umieścić, używając jałowej pęsety próbkę tworzywa sztucznego.
c)
Jałową pipetą pobrać 0,2 cm3 zawiesiny zarodników grzyba i przenieść na płytkę.
d)
Rozprowadzić zawiesinę po powierzchni przy użyciu głaszczki.
e)
Płytki z zaszczepionymi próbkami umieścić w cieplarce w temp. 300C i wilgotności względnej 95% na ok. 28 dni.
f)
Po okresie inkubacji ocenić wzrost grzyba nieuzbrojonym okiem lub za pomocą lupy czy mikroskopu. Wizualną ocenę intensywności wzrostu grzyba
przeprowadzić wg skali podanej w tabeli 1.
Tabela 1
Skala oceny wizualnej
Skala ocen
Wyniki badań
0
Brak widocznego pod mikroskopem wzrostu grzybów na próbce
1
Wzrost grzybów na próbce słabo widoczny nieuzbrojonym okiem,
ale dobrze widoczny pod mikroskopem
2
Wzrost grzybów na próbce widoczny nieuzbrojonym okiem, ale
mniej niż 25% powierzchni pokryte grzybem
3
Wzrost grzybów na próbce widoczny nieuzbrojonym okiem i ponad
25% powierzchni pokryte grzybem
5. Opracowanie wyników
Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w formie sprawozdania Literatura:
1. Bulock J. Kristiansen B.: Basic biotechnology, Academic Press, London 1987.
2. Chmiel A.: Biotechnologia, PWN, W-wa 1991
3. Szostak – Kotowa J.: Ćwiczenia z mikrobiologii ogólnej i przemysłowej, Wyd. AE, Kraków 2002.