Ćwiczenie 2

Badanie zdolności światła pochłanianego przez róż bengalski do uszkodzenia komórek pierwotniaków.

Wykonanie:

1. Przygotowano 2 serie, każda złożona z 4 szalek, na które wylano 2 ml zawiesinowej hodowli pantofelków (Paramecium sp.).

2. Na 4 szalki składające się na każdą serię dodano odpowiednio:0, 50, 100 oraz 150 μl różu bengalskiego o stężeniu 0,2 mM.

3. Obejrzano ruchy pantofelków na szalkach, gdzie nie dodawano różu bengalskiego.

4. Pierwszą serię szalek przykryto folią dla zapewnienia ciemności; drugą serię naświetlano światłem z rzutnika.

5. Co 30 s przerywano naświetlanie i kontrolowano ruchy pantofelków na szalce gdzie stężenie barwnika było najwyższe oraz porównywano je z szalką o takim samym stężeniu barwnika trzymaną w ciemności.

6. Po zaobserwowaniu zahamowania ruchliwości i zmiany wyglądu pierwotniaków odkładano szalki o danym stężeniu różu i kontynuowano doświadczenie dla pozostałych szalek, aż do zaobserwowania w.w. zmian na wszystkich naświetlanych szalkach.

Wyniki:

dodany barwnik [μl]	pantofelki naświetlane			pantofelki w ciemności
		30s	60s	90s	30s	60s	90s
0	żywotne	żywotne	żywotne	żywotne	żywotne	żywotne
50	żywotne	żywotne		żywotne	żywotne	żywotne
100	żywotne			żywotne	żywotne	żywotne
150				żywotne	żywotne	żywotne

- pantofelki o kulistym kształcie, postrzępione

Żywotność wszystkich pantofelków, do których hodowli dodano barwnika i przetrzymywano je w ciemności, pozwala dowieść, że sam róż bengalski nie jest substancją toksyczną. Wykazano również, że samo światło również nie jest czynnikiem szkodliwym dla badanych pierwotniaków - świadczy o tym żywotność pantofelków, do których nie dodawano barwnika, ale szalka z nimi była naświetlana.

Uzyskane przez nas wyniki pozwalają wykazać. że światło pochłaniane przez róż bengalski jest zdolne do uszkadzania pantofelków, o czym świadczy śmierć pantofelków eksponowanych na światło w obecności barwnika. Dodatkową obserwacją potwierdzającą ten wniosek jest istnienie zależności czasu naświetlania potrzebnego do zabicia komórek od stężenia dodanego barwnika.

Wykres zależności czasu naświetlania od stężenia fotouczulacza

Wnioski:

Patrząc na sporządzony wykres, zaobserwować można liniową zależność czasu naświetlania hodowli pantofelków potrzebnego do zabicia większości komórek od stężenia obecnego w hodowli różu bengalskiego. Można przypuszczać, że liniowość ta jest zachowana tylko na pewnym odcinku, ponieważ, jak wykazaliśmy w doświadczeniu, światło bez obecności barwnika, ani też barwnik bez ekspozycji na światło, nie zabijają pierwotniaków. Na obserwowaną zależność ma też wpływ stosunkowo długi czas naświetlania, po którym żywotność organizmów była kontrolowana - możliwe, że ginęły one w krótszym czasie i w rzeczywistości istnieją odstępstwa od liniowości.

---