Obliczenia

Elektroforeza w żelu agarozowym w celu oceny analizowanych próbek DNA.

Przygotowano 100 ml 0,8% żelu agarozowego w buforze 1xTAE według następujących obliczeń.

Objętość buforu:

1/50*100 ml= 2ml TAE

Masa agarozy:

0,8 g - 100 ml

x g - 100 ml

x = 0,8 g

Objętość buforu potrzebnego do prowadzenia elektroforezy:

1/50*2000 ml= 40ml TAE uzupełniono wodą destylowaną do objętości 2L

Nieizotopowa detekcja DNA

W celu zablokowania niespecyficznych miejsc wiązania przygotowano bufor J.

Roztwór wyjściowy był 20x stężony.

1/20 * 100mL = 5mL buforu J - uzupełniono wodą destylowaną do 100mL

A następnie bufor K

Roztwór wyjściowy był 20x stężony.

1/20 * 50mL = 2,5mL buforu J - uzupełniono wodą destylowaną do 50mL

Detekcja

W celu detekcji produktów hybrydyzacji przygotowano bufor J.

Roztwór wyjściowy był 20x stężony.

1/20 * 10mL = 0,5mL buforu J - uzupełniono wodą destylowaną do 10mL

A następnie bufor SAAP(P)

Roztwór wyjściowy był 20x stężony.

1/20 * 8μL = 0,4μL buforu P - uzupełniono wodą destylowaną do 8μL

Po czym ponownie przygotowywano bufor J

1/20* 200mL = 10ml - uzupełniono wodą do objętości 200mL

---