MORFOLOGIA KRWI

1. Zasady pobrania krwi do badań:

1. Pobranie krwi włośniczkowej

1)Przygotowanie zestawu do nakłucia:

• Nożyki lub specjalne nakłuwacze

• Waciki z waty i ligniny

• 70% spirytus do dezynfekcji

• Pojemnik na odpady

• Heparynizowane kapilary

• Penseta zanurzona w spirytusie

• Rękawiczki jednorazowe

• plaster

2) przygotowanie miejsca nakłucia:

• Opuszka palca powinna być słucha, ciepła, czysta

• Rozmasować opuszkę palca

• Dokładnie zdezynfekować

3) wykonanie:

• Uciskać nasadę opuszki palca

• Nakłuć część boczną szczytu opuszki palca jednym energicznym ruchem

• Zetrzeć pierwszą kroplę krwi, gdyż jest zanieczyszczona, bo zawiera złuszczający się naskórek

• Swobodnie wypływającą krew zbierać do kapilar lub mikroprobówek(uwaga:palca nie można zbyt mocno uciskać, aby nie spowodować wypływania płynów śródtkankowych oraz tromboplastyny przyspieszającej proces krzepnięcia)

• Po zakończeniu pobierania krwi do kapilary zabezpieczyć miejsce nakłucia wacikiem lub plastrem

1. Pobieranie krwi żylnej

1)przygotowanie zestawu do pobrania krwi żylnej

• Igła

• Odpowiednie probówki, opisane danymi pacjenta

• Waciki nasączone środkiem dezynfekującym

• Pojemnik na odpady

• Staza

• Rękawiczki jednorazowe

• Plaster

2)wykonanie pobrania krwi żylnej.

Pobranie krwi żylnej najczęściej wykonujemy z żyły łokciowej, pacjent powinien znajdować się w pozycji siedzącej lub leżącej.

• Zacisnąć stazę 10-15 cm nad zgięciem łokciowym

• Poprosić pacjenta o zaciśnięcie dłoni

• Przetrzeć miejsce wkłucia wacikiem nasączonym środkiem dezynfekującym

• Wkuć igłę w wybraną żyłę i pobierać krew do kolejnych probówek

• Poprosić pacjenta o zwolnienie dłoni

• Odpiąć stazę

• Przytrzymując nasączonym wacikiem wyjąć igłę z żyły

• Poprosić pacjenta o przytrzymanie wacika

• Zakleić miejsce pobrania plastrem

• Krew po pobraniu należy dokładnie wymieszać(szczególnie ważne przy morfologii krwi wymieszanie z antykoagulantem)

3)rodzaje probówek

• Czerwona-morfologia

• Fioletowa-OB

• Biała-biochemia

• Zielona-koagulologia

2. Parametry morfologii krwi

1. Czerwonokrwinkowe

• RBC

• HCT

• HGB

• MCV

• RDW

• MCH

• MCHC

1. Białokrwinkowe

• WBC

• NEUT

• MID

• LYMPH

• MONO

• EOS

• BASO

1. Płytek krwi

• PLT

• MPV

• PDW

• PCT

3. Oznaczenie manualne wybranych parametrów morfologii krwi

1. Liczby WBC

0,38 ml płynu Turka

• Kwas octowy lodowaty-powoduje hemolizę erytrocytów, nadtrawia błonę leukocytów co umożliwia podbarwienie jądra komórkowego

• Fiolet krystaliczny- zabarwia jądra leukocytów

0,02 ml krwi

Rozcieńczenie 1:20 (20×)

Dokładnie wymieszać, napełnić kamerę i odczekać 3 min., aż opadną krwinki. Liczymy na:

• Komorze Thoma na 2 całych siatkach, czyli 800 elementarnych kwadracików

Wynik: a×100=tys./µl

• Komorze Burkera na 4 dużych kwadratach oddzielonych liniami potrójnymi, czyli 1600 elementarnych kwadracików

Wynik:a×50=tys./µl

1. Liczby erytrocytów

4 ml płynu Hayema

• Chlorek rtęci-utrwala błony erytrocytów, stabilizuje krwinki czerwone, zapobiega ich obkurczaniu, działa bakteriobójczo

• Siarczan sodu

• Chlorek sodu-zapewniają odpowiednie, izotoniczne środowisko dla krwinek

0,02 ml krwi

Rozcieńczenie 1:200 (200×)

Dokładnie wymieszać, napełnić komorę, odczekać 3 min. Liczymy na:

• Komorze Thoma na 5 kwadratach oddzielonych potrójnymi liniami, czyli 80 elementarnych kwadracików

• Komorze Burkera na 20 prostokącikach, czyli 80 elementarnych kwadracików

Wynik: a×10000 mln/µl

1. Liczby PLT

0,38 ml płynu Stavema

• Aceton-zapobiega agregacji płytek

• Formalina

• Chlorek sodu

0,02 ml krwi

Rozcieńczenie 1:20 (20×)

Dokładnie wymieszać, odczekać 10-15 min., napełnić komorę i umieścić ją w komorze wilgotnej i odczekać 10 min. Liczyć na:

• Komorze Thoma na 5 kwadratach oddzielonych potrójnymi liniami, czyli 80 elementarnych kwadracikach

• Komorze Burkera na 20 prostokącikach, czyli 80 elementarnych kwadracikach

Wynik: a×1000 tys/µl

1. Wartości HCT

Wykonanie:

• Pobrać krew włośniczkową lub żylną bez powietrza do 2/3 długości kapilary

• Zatopić w płomieniu ciągle obracając pustą końcówkę kapilary do uzyskania łezki

• Umieścić w wirówce hematokrytowej zatopioną kapilarę końcówką zatopioną na zewnątrz

• Przykręcić dokładnie pokrywę wirówki

• Wirować przy 12000 obrotach/min. Przez 3 min.

• Odczytać na czytniku, wynik podać w %.

Wartości prawidłowe: kobiety 37-47%

Mężczyźni 45-54%

1. Poziomu HGB

1)Zasada metody:

Hb pod wpływem odczynnika Drabkina ulega przekształceniu w cyjanomethemoglobinę, której gęstość optyczną mierzy się fotokolorymetrycznie przy długości fali 540 nm.

2) wykonanie:

Do 5 ml odczynnika Drabkina dodać 0,02 ml świeżo pobranej krwi wersenianowej. Odstawić na 20 min., zmierzyć absorbancję próbek badanych oraz wzorca wobec odczynnika Drabkina jako próby ślepej przy 540nm.

Dla każdego pacjenta należy przygotować 2 próbki badane.

Rozcieńczenie próbki badanej-251

	Próba badana 1 powtórzenie	Próba badana 2 powtórzenie	Próba ślepa	Próba wzorcowa
Odczynnik Drabkina	5 ml	5 ml	5 ml	-
Krew badana	0,02 ml	0,02 ml	-	-
wzorzec	-	-	-	5 ml

3)obliczenie wyniku:




4)wartości prawidłowe:

Kobiety 12-14 g/dl (7,5-10 mmol/l)

Mężczyźni 14-18 g/dl (8,5-11 mmol/l)

4. Oznaczenie liczby retykulocytów

1. Wykonanie

1. w probówce umieszczamy 2-3 krople błękitu brylantowo-krezolowego

2. Do barwnika dodajemy 2-3 krople krwi i dokonujemy wymieszania

3. Odstawiamy próbkę na 10-20 min. W temp. 37 C

4. Po ponownym wymieszaniu próbki wykonujemy dwa cienkie rozmazy, wysuszamy je i oglądamy z zastosowaniem olejku immersyjnego w zmniejszonym polu widzenia

5. Określamy liczbę retykulocytów na 1000 erytrocytów. Wynik podajemy w‰

1. Wartości prawidłowe

Dorośli 2-20‰(5-15‰)

Noworodki 20-60‰

2. Wzrost liczby retykulocytów

• Niedokrwistość hemolityczna, pokrwotoczna

• Niedokrwistość z niedoboru żelaza(leczona)

• Niedokrwistość Addisona-Biermera(leczona)

• Białaczki

1. Obniżenie liczby retykulocytów

• Niedokrwistość aplastyczna

• Niedokrwistości niedoborowe przed leczeniem

---