 | Pobierz cały dokument podloza.do.hodowli.szczepow.uniwersytet.doc Rozmiar 225 KB |
WYMAGANIA STAWIANE PODŁOŻOM STAWIANYM DO HODOWLI SZCZEPÓW PRZEMYSŁOWYCH
Pożywki ze względu na ich podstawowe znaczenie w diagnostyce mikrobiologicznej powinny spełniać określone wymagania drobnoustrojów, a także pracowników laboratorium, dlatego podczas ich sporządzania należy tak dobrać składniki, aby:
Miały odpowiednią wartość odżywczą
Ten warunek zapewnia dobór składników niezbędnych do życia, wzrostu i rozmnażania drobnoustrojów. Wszystkim organizmom są niezbędne pierwiastki biogenne tj. C, O, N, P, S, a ponad to inne pierwiastki w ilościach śladowych tj. mikroelementy.
W podłożu odżywczym do hodowli heterotrofów muszą być obecne substancje organiczne w postaci peptonu, który jest źródłem azotu. Źródłami różnych pierwiastków są sole min., np. fosforany, siarczany.
Wykazywały odpowiedni odczyn pH
Reguluje się go wg potrzeb poszczególnych grup drobnoustrojów. Dla większości z nich optymalny jest odczyn słabo alkaliczny (7,2-7,4), natomiast dla grzybów odczyn kwaśny (5,5-6,5)
Były przejrzyste
Szczególnie ważna cecha pożywek płynnych, konieczna do wizualnego stwierdzenia wzrostu drobnoustrojów, które namnażając się powodują zmętnienie, powstanie osadu lub błonki na powierzchni podłoża.
Były sterylne (jałowe)
Podstawowa cecha warunkująca prawidłową pracę laboratorium mikrobiologicznego i wiarygodność wyników analiz.
Wykazywały izotoniczność
Polega na stworzeniu w nich ciśnienia osmotycznego podobnego do ciśnienia w komórkach.
Podłoże hipotoniczne - o niższym ciśnieniu osmotycznym niż w komórkach, powoduje ich pęcznienie a nawet pękanie.
W podłożu o ciśnieniu hipertonicznym - o wyższym ciśnieniu osmotycznym niż w kom. następuje kurczenie się plazmy komórkowej i oddzielenie od ściany kom. drobnoustrojów.
Zjawiska te powodują zmianę morfologii kom. drobnoustrojów i zaburzenie ich fizjologii.
Pożywki izotoniczne nie powodują takich zaburzeń. W celu uzyskania izotoniczności do podłoża dodaje się NaCl.
Dokładność
Dokładność uzyskanego wyniku w stosunku do wartości rzeczywistej. Oznaczana na podstawie znanych wzorów, porównanie z wynikami uzyskanymi inną opracowaną i znormalizowaną metodą. Wyliczona z rozcieńczenia zawiesiny bakteryjnej.
W badaniach ilościowych należy tak dobrać rozcieńczenia aby otrzymać 30-300 cfu/płytkę.
Wyrażona jako % odzyskanych drobnoustrojów w teście.
Należy analizować co najmniej 5 rozcieńczeń.
Kryterium akceptacji jest co najmniej 70% wartości wyjściowej.
Precyzja
 | Pobierz cały dokument podloza.do.hodowli.szczepow.uniwersytet.doc rozmiar 225 KB |