26376 img031 (32)

Przy korzystaniu ze spektrofotometru można obliczyć stężenie z odczytanej wartości absorbancji, przyjmując wartość 44 dla mi 1 i — molowego współczynnika absorbancji przy długości fali 540 nm.

Hb w g/100 cm'

A■mol Hb • rozcieńczenie krwi mmolowy współczynnik absorbancji ■1•10■1000

= A-36,7

Aj54 • 4-0Oj - £51

44 ■ 10000

OZilACZAtlIE KAFBOKSYHEMOGLOB1H¥

(MEFOCDĄ WOLFFA

Zasada oznaczania

£

HbOp ulega prawie całkowicie koagulacji termicznej,

Metoda polega na wykorzystaniu różnic w fizykochemicznych właściwościach HbO_D i HbCO. W doświadczalnie dobranych warunkach

podczas gdy

HbCO pozostaje w roztworze. Po koagulacji wytrąconą HbOg odsącza się, natomiast HbCO zabarwiającą roztwór na kolor czerwony oznacza się kolorymetrycznie przy długości fali 540 nm.

Pełne wykonanie oznaczenia wymaga analizy krwi osoby narażonej oraz krwi kontrolnej.

Krew kontrolną ( pochodzącą od osoby nie narażonej i nie palącej papierosów ) wykorzystuje się do:

a)    sporządzenia czystego roztworu HbOg ( przez utlenowanie powietrzem )

b)    sporządzenia roztworu zawierającego 100X HbCO ( poprzez wysy-cenie krwi CO pochodzącym z generatora tlenku węgla lub gazu świetlnego )

Dla celów klinicznych wynik przedstawia się w V. HbCO obliczonych w stosunku do całkowitej Hb; ponieważ skalę wzorców wykonuje się na krwi osoby nie narażonej, wartość / HbCO ma jedynie charakter przybliżony. Dla celów ściśle ilościowych należałoby zawartość HbCO wyrażać w jednostkach bezwględnych, np. mg HbCO/cm^, co wymagałoby dodatkowego oznaczania poziomu całkowitej Hb we krwi badanej oraz we krwi używanej do kalibracji.

4