63803 skanuj0006

C, OZNACZANIE AKTYWNOŚCI AMINO TRANSFERAZY AL ANINOWEJ Grupa a-aminowa wielu aminokwasów jest przenoszona na a-ketoglutaran w reakcji, której mechanizm określany jest jako mechanizm podwójnego przeniesienia (reakcje ping-pong). Cechą wyróżniającą ten mechanizm katalizy jest istnienie enzymu z podstawioną grupą a więc pośredniej formy enzymu, który uległ czasowej modyfikacji. Tak więc, aminotransferaza alaninowa katalizuje przeniesienie grupy aminowej z alaniny na a-ketoglutaran, a produktami reakcji są pirogronian i glutaminian. Po związaniu alaniny do enzymu zostaje z niej usunięta grupa aminową która jest przeniesiona na fosforan pirydoksalu (PLP)(koenzym aminotransferaz i liaz), a z aminotransferazy uwalnia się pirogronian. Drugi substrat, a-ketoglutaran, wiąże się do zmodyfikowanego enzymu i przyjmuje od niego grupę aminową a następnie zostaje uwolniony jako produkt reakcji - glutaminian. Na ryc. 3 pokazany jest schemat reakcji podwójnego przeniesienia, a na ryc. 4 mechanizm transaminacji.

m

u

■ C i 0 I -H₃N-C r-H

pĘĘ

. . © H₃N'

<0

ójSo

C ' ■

■

O-C.

r₂

b

as >o - * c

o=c

i i

j§

f^tol&yasl.

Fosforan

pirydoksaminy

0^/0 C •

j -H3N—CfrH

Aminokwas 2

Ketokwas 2

Lyc. 3. Schemat reakcji podwójnego przeniesienia katalizowanej przez aminotransferazy

4