72943 skanuj0006

72943 skanuj0006



3.    Ustawiamy długość Mi na fc* 340 ma, zerujemy względem pustej kuwety.

4.    Mieszaninę reakcyjną wlewamy do kuwety, dodajemy 250 pl NADH w buforze (odczynnik R2) jednocześnie włączając stoper. Natychmiast notujemy wartość absorbancji (Ao),

a następnie JSkonujejii)' pomiarów co 1    do uzyskania stałej wartoMj^^i

W celu uzyskania liniowości oznaczeń zmiana absorbancji w ciągu minuty nie powinna przekraczać 0,150. Jeśli jest większą, próbę należy rc^ieńc^j^ |0-krotnie 0,*iffi& roztworem NaCl.

II. Elektroforetyczny rozdział izoenzymów dehydrogenazy mleczanowej surowicy krwi WSTĘP

Ruchliwość białka w polu elektrycznym jĘj&f od wielkości ładunku, jaki niaitfc'! W sobie cząsteczka, a jej ładunek zależy od punktu izoelektrycznego białka i pH roztworu,    białko

jest rozpuszczone. Białka różnią się punktami izoelektrycznymi, więc umieszczone w buforze o takim samym pH będą przesuwały się z różną szybkością do elektrody o ładunku przeciwnym do ładunku cząsteczki białka. Różnice w ruchliwości możemy oznaczyć denaturując (utrwalając) a następnie wybarwiając je odpowiednim barwnikiem np. czernią amidową lub ksiSS^jSąowym. W przypadku gdyąf^interestge nas ilość i jakość rozdzielonych białek fen katalityczna aktywność, wykonujemy tzw. zymogram. Zy mogramami nazywamy ulektreforogramy z wybarwioną swoistą dla badanego enzymu reakcją enzymatyczną. Pożądaną cechą takiej reakcji są nierozpuszczalne produkty. Takie produkty nie będą dyfundowały w nośniku podczas jego inkubacji, dzięki czemu obserwowane pasma będą miały stosunkowo ostre granice.

(A>

(B)

serce

nerki

erytrocyty

mózg

leukocyty

mięśnie

wątroba

IDH-l

■ O ■9

h4

SS33

SH

-S

LDH-2

30

KO

aa

HjM

m8

■a

n

ira

LDH-3

99

93

99

39

99

a m

H2M2

ww

Mi

OBM

MBflBB

10H-4

99

HM3

IDH-5

99

Si

mm

-9

-5

-i

-21

Aduit

Profil izoenzymów LDH zmienia się u szczura wraz $ wiekiem (B) Rozdział rlr1rtrrń|Hipti|jf ^enzymów LDH z różnych tkanek (według: J.M. Berg, L. Stryer. JX. Tj<fcoczko

biochemia”, PWN 2007).


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
jak u konających, oczy niesionego na kocach paralityka. Nikt na nikogo nie ma tu względu. Każdy walc
skanuj0026 - Nie dogonisz mnie, nie złapiesz, szarobury kocie! - Wcale gonić cię nie będę. Dobrze mi
skanuj0140 (5) 290 W ON mi (KilA ITYC/NA Pytania tc wytyczają ogólny kierunek naszych dalszych docie
skanuj0085 152 SANATORIUM POD KLEPSYDRĄ Przed kawiarnią ustawiono już stoliki na bruku. Panie siedzi
skanuj0033 3 32 Budowlane roboty przygotowawcze Paliki geodezyjne+ -......m poziom Ustawić tyczkę mi
skanuj0020 (21) Zadanie 37. Na podstawie danych zamieszczonych w tabeli, oblicz długość cokolika pły
17841 skanuj0025 (21) Romb Czworokąt, który ma dwie pary boków równoległych jednakowej długości.&nbs
33231 skanuj0116 Kąt skręcenia pręta na długości pomiarowej lp (przy Ms = const) wynosi <P

więcej podobnych podstron