65

j ak przy krzywej wzorcowej DNA. Następnie wszystkie próby wstawić do wrzącej łaźni wodnej na 10 min. Po oziębieniu prób odczytać absorbanqę wnbec próby kontrolnej w fotometrze przy długości fali 600 nm. Oznaczenie ilości DNA w próbie i krzywą wzorcową DNA wykonywać jednocześnie.

Opracowanie wyników

1.    Studenci wykreślają na papierze milimetrowym krzywą wzorcową zależności absor-bancji od ilości DNA w próbie, nanosząc na wykres punkty odpowiadające średnim wartościom absorbancji obu powtórzeń dla każdego stężenia DNA. W sprawozdaniu podają odczyty absorbancji dla obu powtórzeń, dla każdego stężenia DNA oraz wyliczone w-artości średnie.

2.    Przy oznaczaniu zawartości DNA wartość absorbancji w zadaniu kontrolnym zamienić na odpowiadającą wartości DNA z krzywej wzorcowej, a następnie uwzględniając schemat rozcieńczeń obliczyć zawartość DNA w materiale wyjściowym (w' g/100 g grasicy).

Sposób przygotowania roztworu kw-asów' nukleinowych będzie podany na tablicy. Po przedstawieniu przez studenta wyników pomiarów kolorymetrycznych na Spekolu prowadzący ćwiczenia poda, ile było ml materiału w zadaniu kontrolnym.

Pytania

1.    Napisać i podać w^ory zasad purynowych i pirymidynowych z numeracją atomów w pierścieniu. Podać ich nazwy systematyczne.

2.    Co to jest nukleozyd, a co nukleotyd? Jakie typy wiązań w nich występują? Nazwać i przedstawić wzory nukleozydu i nukleotydu, zawierających odpowiednio P-D-rybozę i (3-D-deoksyrybozę.

3.    Z jakich jednostek strukturalnych zbudowany jest kwas deoksyrybonukleinowy, a z jakich kwas rybonukleinowy? Przedstawić fragmenty’wzorów struktury pierwszorzędowej obu kw'asów\

4.    Przedstawić wzorami sposób tworzenia się wiązań wodorowych w kwasach nukleinowych.

5.    Jakie prawidłowości w stosunkach ilościowych zasad obserwuje się w budowie drugo-rzędowej DNA?

6.    Jakie biologiczne funkcje pełni DNA?

7.    Wymienić rodzaje RNA; określić ich funkcje biologiczne.

8.    Określić w przybliżeniu wielkości cząsteczek kwasów nukleinowych.

9.    Jakie znamy sposoby hydrolizy kwasów nukleinowych?

10.    Jakie składniki uwalniają się w wyniku całkowitej hydrolizy DNA i RNA?

11.    Wymienić i scharakteryzować różne sposoby badania składników kwasów nukleinowych.

12.    Jakie charakterystyczne reakcje są wspólne dla DNAi RNA, a jakie pozwalają odróżnić te związki?

13.    Na jakich cechach budowy kwasów nukleinowych oparte są metody ich oznaczania?

14.    Wyjaśnić, na czym polega wybrana na ćwiczeniu metoda oznaczania zawartości DNA?

15.    W jakim celu na ćwiczeniu przy oznaczaniu zawartości DNA sporządza się krzywą wzorcową?

55