107199

METODA ROZETOWA E

•    zasada: oparta jest na zjawisku spontanicznego wiązania się erytrocytów barona z limfocytami T człowieka (dzięki obecnemu na powierzchni limfocytów T receptorowi dla krwinek czerwonych barona w postaci cząsteczki CD2)

•    wiązanie pomiędzy limfocytami T a erytrocytami barana jest bardzo trwałe,

zwłaszcza jeśli erytrocyty zostaną wcześnie inkubowane z neuraminidazą

•    za rozetkę uważa się limfocyt T z przyłączonymi co najmniej 3 erytrocytami

•    utworzone rozetki można oddzielić od pozostałych komórek poprzez wirowanie na gradiencie Ficoll-Uropolina

.NjcAąMnię_od_ZAstpjLpj^anęLmę^

zakończeniu procedury oczyszczania zawsze należy:

>    policzyć izolowane komórki i określić czystość otrzymanego preparatu (w rozmazie wybarwionym barwnikiem May-Gmnwald Giemza)

>    ocenić żywotność komórek po dodaniu barwnika przyżyciowego.