101923

Ten profil nazywamy pikiem chromatograficznym.

Jeśli mamy stosunek stężenia substancji zatrzymywanej, do substancji niezatrzymywanej nazywamy to współczynnikiem podziału Nemsta (charakteryzuje dany proces chromatograficzny, choć z praktycznego punktu widzenia nas bardziej interesuje oddalenie w jakim pojawi się nasza substancja, ale najważniejszy jest współczynnik rozdziału).

Współczynnik rozdziału wprowadzonych na kolumnę chromatograficzny substancji:

Współczynnik rozdziału alfa.

Dla dobrego rozdziału ten współczynnik musi być jak największy.

Wtedy piki będą jak najdalej od siebie oddalone, a więc umożliwia nam to uzyskanie wyższej czystości substancji rozdzielanej.

Musimy tak modyfikować warunki chromatografii aby ten współczynnik był jak największy. Liczba pólek teoretycznych:

Liczba określająca wydajność procesu cliromatograficznego.

Określa nam kształt piku substancji zatrzymywanej.

Z punktu widzenia praktyki my chcemy żeby ten pik był ostry jak brzytwa.

Idea chromatografii- nasza pożądana substancja płynie w dużej masie substancji innej.

I my zbierając pożądana przez nas substancje chcemy żeby jej było jak najwięcej, żeby stężenie było jak najwyższe.

A im jest wyższe w jak najkrótszym czasie, tym pik jest bardziej ostry. Jak pik będzie rozmyty- substancja będzie rozcieńczona.

Im więcej półek tym lepiej- lepsza jakość rozdziału, tym większe stężenie otrzymamy.

Najważniejsze aby uzyskać substancję jak najbardziej zatężoną.

Drobnoustroje wydzielają najwięcej:

•    etanolu, 180g/ll

•    kwas cytiynowy 120g/ll

•    butanol 30g/ll.

Metody membranowe i chromatograficzne są lepsze niż ekstrakcja, która mocno rozcieńcza, a przy destylacji tracimy dużo energii.

Procesy Downstreen procesing są to procesy, z których należy odzyskać mocno rozcieńczone substancje.

Mechanizmy zatrzymywania w chromatografii cieczowej- rodzaje HPLC:

1) Układ z tzw. fazą odwrócona, gdzie rozpuszczalnik który płynie przez kolumnę jest rozpuszczalnikiem polarnym. Wypełnienie stałe, jest wypełnieniem niepolamym, węglowodorowym, są to grupy.

•    C8

•    08

•    Metylowe

•    Fenylowe.

Związki niepolarne, np. antybiotyki mają duże powinowactwo do niepolamych grup i się na nich zatrzymują.

A wypłukiwane są: mieszanina wody z pewnym, niewielkim dodatkiem fazy organicznej (etanol, acetonitryi).

Dodatek fazy organicznej do wody zmienia siłę elucji, zmienia nam czas retencji, pozwala rozdzielać mieszaniny.

Faza ruchoma polania.