L A B O R A T O R I U M 9 - 1 0 / 2 0 1 0 L A B O R A T O R I U M P R Z E M Y S AO W E
|
W y k r y w a n i e z a f a Bs z o w a D
w p r o d u k t a c h m l e c z a r s k i c h
S T R E S Z C Z E N I E Z a f a Bs z o w a n i a r o d u k c j s e r w , p o d o b n i e j a k w y p i e k W o s t a t n i c h l a t a c h o p r a c o w a n o k i l k a
m l e k a i p r o d u k t w s e r o w a r s k i c h p i e c z y w a , m o |n a z a l i c z y d o j e d n y c h m e t o d a n a l i t y c z n y c h , k t r e p o z w a l a j
r |n y m i t y p a m i m l e k a , i n n y m i P z n a j s t a r s z y c h p r o c e s w b i o t e c h n o l o - n a o c h r o n k o n s u m e n t a i m o n i t o r o w a n i e
o d d e k l a r o w a n y c h , s d u |y m g i c z n y c h . T e c h n o l o g i a w y t w a r z a n i a t e g o a u t e n t y c z n o [c i w y r o b w m l e c z a r s k i c h .
w y z w a n i e m d l a a g e n c j i m o n i t o r u j c y c h s e g m e n t u p r o d u k t w s p o |y w c z y c h p o d - P r o c e d u r y t e s w s p i e r a n e p r z e z l e g i s l a -
|y w n o [. N a j c z [c i e j m l e k o o w c z e l e g a n i e u s t a n n e j m o d y f i k a c j i w y m u s z a n e j c j U n i i E u r o p e j s k i e j .
i k o z i e z a s t p o w a n e j e s t z n a c z n i e p r z e z r o s n c k o n k u r e n c j i w y m a g a n i a
t a Ds z y m m l e k i e m k r o w i m . W p r a c y k o n s u m e n t w . W o s t a t n i c h l a t a c h z a i n - M E T O D Y
p r z e d s t a w i o n o t e c h n i k i a n a l i t y c z n e t e r e s o w a n i e p r o d u k t a m i o p o d w y |s z o - I M M U N O C H E M I C Z N E
s t o s o w a n e w t y m o b s z a r z e b a d a D. n y c h w a l o r a c h z d r o w o t n y c h p r z y c z y n i Bo M e t o d y i m m u n o l o g i c z n e p o l e g a j
S AO W A K L U C Z O W E k o n t r o l a s i d o w z r o s t u s p o |y c i a s e r w o w c z y c h n a z a s t o s o w a n i u s p e c y f i c z n e j i n t e r a k c j i
z a f a Bs z o w a D, p r o d u k t y s e r o w a r s k i e , t e s t y i k o z i c h . P o n a d t o w w i e l u k r a j a c h , m . i n . p o m i d z y p r z e c i w c i a Be m i a n t y g e n e m .
i m m u n o e n z y m a t y c z n e , c h r o m a t o g r a f i a , w G r e c j i , P o r t u g a l i i c z y T u r c j i , z u w a g i W p r z e c i w i e Ds t w i e d o m e t o d c h r o m a -
t e c h n i k i e l e k t r o f o r e t y c z n e n a b r a k s p r z y j a j c y c h w a r u n k w d o h o - t o g r a f i c z n y c h o r a z e l e k t r o f o r e t y c z n y c h ,
d o w l i b y d Ba w o Bo w e g o , t e g o r o d z a j u s e r y n i e w y m a g a j w y s p e c j a l i z o w a n e j a p a r a -
S U M M A R Y A d u l t e r a t i o n o f m i l k s t a n o w i i s t o t n y e l e m e n t s e g m e n t u p r o - t u r y i s p r a w d z a j s i p r z y r u t y n o w y m
a n d d a i r y p r o d u c t s w i t h d i f f e r e n t t y p e s d u k t w m l e c z a r s k i c h . W w i e l u p r z y p a d - s k r i n i n g u p r b e k m l e k a i s e r a . R e a k c j a
o f m i l k , o t h e r t h a n d e c l a r e d i s a b i g k a c h s e r w , n p . t a k i c h , j a k F e t a , M a n c h e - a n t y g e n - p r z e c i w c i a Bo j e s t b a r d z o s e l e k t y w -
c h a l l e n g e f o r f o o d m o n i t o r i n g a g e n c i e s . g o c z y R o q u e f o r t , p r o d u k t y t e s t a n o w i n a i p o z w a l a n a w y k r y w a n i e [l a d o w y c h
T h e m o s t f r e q u e n t i s r e p l a c e m e n t o f e w e m a r k r e g i o n a l n , k t r a c i e s z y s i p o p u - ( k i l k a n a n o g r a m w ) i l o [c i z a n i e c z y s z c z e D
a n d g o a t s w i t h l e s s e x p e n s i v e b o v i n e l a r n o [c i k o n s u m e n t w w w i e l u k r a j a c h w p r o d u k t a c h |y w n o [c i o w y c h ; j e s t m . i n .
m i l k . T h e t e c h n i q u e s u s e d f o r r e s e a r c h E u r o p y . W P o l s c e s e r y o w c z e r w n i e | w y k o r z y s t y w a n a d o a n a l i z y z a w a r t o [c i
i n t h i s a r e a w e r e s t u d i e d i n t h i s p a p e r . m a j u g r u n t o w a n p o z y c j w s e g m e n c i e w i t a m i n , a n t y b i o t y k w , r |n e g o r o d z a -
K E Y W O R D S a d u l t e r a t i o n c o n t r o l , p r o d u k t w m l e c z a r s k i c h . j u d o d a t k w d o |y w n o [c i , a l e p r z e d e
d a i r y p r o d u c t s , i m m u n o e n z y m a t i c t e s t s , P r o d u k c j a m l e k a o w c z e g o o r a z k o - w s z y s t k i m s p e c y f i c z n y c h b i a Be k .
c h r o m a t o g r a p h y , e l e c t r o p h o r e t i c t e c h n i q u e s z i e g o , k t r a s t a n o w i o k . 3 , 5 % w g l o b a l - D o s z e r o k i e g o s p e k t r u m p r o t e i n
n y m b i l a n s i e , t o j e d n a k p r o c e s z n a c z n i e r o z p o z n a w a n y c h w r e a k c j i i m m u n o c h e -
d r o |s z y z u w a g i n a c e n i d o s t p n o [ m i c z n e j m o |n a z a l i c z y b i a Bk a m l e k a .
w y j [c i o w e g o s u r o w c a o r a z s e z o n o w e W o f e r c i e p r o d u c e n t w ( m . i n . E u r o - D i a -
f l u k t u a c j e w j e g o p o z y s k i w a n i u . W w i e - g n o s t i c a , R - B i o p h a r m , Z E U - I m m u n o t e c )
l u p r z y p a d k a c h p r o w a d z i t o d o n i e l e g a l - z n a j d u j s i t e s t y p a s k o w e , n i e w y m a g a -
n y c h p r a k t y k , p o l e g a j c y c h n a z a s t p o - j c e s p e c j a l i s t y c z n e j a p a r a t u r y z e s t a w y
w a n i u m l e k a o w c z e g o m l e k i e m k r o w i m n i t r o c e l u l o z o w y c h p a s k w p o k r y t y c h
w t e c h n o l o g i i p r o d u k c j i s e r w o w c z y c h p r z e c i w c i a Ba m i m o n o - l u b p o l i k l o n a l n y -
i k o z i c h ; n i e j e d n o k r o t n i e m o |e t o b y m i , s p e c y f i c z n y m i w o b e c b i a Be k m l e k a
n a w e t p r o c e s n i e [w i a d o m i e r e a l i z o w a - k r o w i e g o i o w c z e g o c z y k o z i e g o . P r o -
n y p r z e z p r o d u c e n t a , k t r y d y s p o n u j e c e d u r a w y k o n a n i a t e s t u s p r o w a d z a s i
n i e d o s t a t e c z n y m z a p l e c z e m a n a l i t y c z - d o z a n u r z e n i a p a s k a r e a k c y j n e g o w r o z -
n y m d o k o n t r o l i j a k o [c i d o s t a r c z a n e g o t w o r z e m l e k a i a n a l i z i e w i z u a l n e j o b e c -
s u r o w c a . S t o p r o c e s y n i e p o |d a n e n i e n o [c i k o l o r o w y c h p a s m p o c h o d z c y c h
t y l k o z e k o n o m i c z n e g o p u n k t u w i d z e - o d r e a g u j c e g o z p r z e c i w c i a Ba m i b i a Bk a
n i a , a l e t a k |e z e w z g l d w m e d y c z n y c h , m l e k a o w c z e g o i e w e n t u a l n e g o d r u g i e g o
z u w a g i n a p o t e n c j a l n e a l e r g i z u j c e d z i a - p a s m a d o w o d z c e g o z a n i e c z y s z c z e n i a
Ba n i e n i e k t r y c h s k Ba d n i k w m l e k a c z y m l e k i e m k r o w i m . T e s t y p a s k o w e t o m e -
d r R o b e r t D u l i Ds k i
t e | z p o w o d w e t y c z n y c h , r e l i g i j n y c h t o d a p Bi l o [c i o w a , p o z w a l a j c a j e d y n i e
K A T E D R A B I O T E C H N O L O G I I {Y W N O ZC I
U N I W E R S Y T E T R O L N I C Z Y W K R A K O W I E i k u l t u r o w y c h . n a w y k r y c i e z a n i e c z y s z c z e D p o w y |e j 1 % .
3 6
L A B O R A T O R I U M P R Z E M Y S AO W E L A B O R A T O R I U M 9 - 1 0 / 2 0 1 0
|
p r z e c i w c i a Bo
R y s u n e k . Z a s a d a d z i a Ba n i a t e s t u t z w . k a n a p k o w e j E L I S A
1 d o Be k m i k r o p By t k i p o k r y t y p r z e c i w c i a Ba m i ; 2 i n t e r a k c j a a n t y g e n u z a w a r t e g o w p r b c e z u n i e r u c h o m i o n y m p r z e c i w c i a Be m ;
3 p r z y Bc z e n i e k o n i u g a t u e n z y m u d r u g o r z d o w e p r z e c i w c i a Bo ; 4 u s u n i c i e p o z o s t a Bo [c i n i e z w i z a n e j p r b k i ; 5 - 6 w p r o w a -
d z e n i e s u b s t r a t u , k t r y z m i e n i a b a r w p o d w p By w e m r e a k c j i e n z y m a t y c z n e j
Z n a c z n i e w i k s z e m o |l i w o [c i w t y m z a - b u f o r w i d y s p o n o w a n i a u r z d z e n i a m i
k r e s i e o f e r u j k l a s y c z n e t e s t y E L I S A ( a n g . d o h o m o g e n i z a c j i i w i r o w a n i a , n a c o n i e
E n z y m e - L i n k e d I m m u n o a d s o r b e n t A s s a y ) , z a w s z e p o z w a l a z a p l e c z e [r e d n i e j w i e l k o -
z a z w y c z a j z Bo |o n e z 9 6 - d o Bk o w e j p o l i s t y - [c i z a k Ba d u s p o |y w c z e g o .
r e n o w e j m i k r o p By t k i , k t r e j d n o p o k r y t e
j e s t p r z e c i w c i a Ba m i s p e c y f i c z n y m i w o b e c M E T O D Y
b i a Be k w y s t p u j c y c h n a t u r a l n i e w m l e k u C H R O M A T O G R A F I C Z N E
k r o w i m ; n a j c z [c i e j s t o p r o t e i n y z g r u p y Z a s t o s o w a n i e c h r o m a t o g r a f i i p o z w a l a
i m m u n o g l o b u l i n G , a l b u m i n l u b k a z e i n n a p r e c y z y j n a n a l i z z a n i e c z y s z c z e D
( t a b e l a ) . P o w p r o w a d z e n i u d o m i k r o - i z n a c z n a u t o m a t y z a c j p r o c e d u r y o z n a -
d o Bk w r o z t w o r u b a d a n e j p r b k i l u b c z e n i a . N a j c z [c i e j s t o s o w a n e s t e c h n i k i
s t a n d a r d u o b e c n e t a m i m m u n o g l o b u - c h r o m a t o g r a f i i H P L C w o d w r c o n e j f a z i e
l i n y r e a g u j z i m m o b i l i z o w a n y m i p r z e - ( a n g . R e v e r s e d - P h a s e H i g h - P e r f o r m a n c e L i q u i d
c i w c i a Ba m i . N a s t p n i e p o z a a p l i k o w a n i u C h r o m a t o g r a p h y , R P - H P L C ) , c h r o m a t o -
t z w . k o n i u g a t u e n z y m u o p e r o k s y d a z y g r a f i a j o n o w y m i e n n a , h y d r o f o b o w a o r a z
c h r z a n o w e j z p r z e c i w c i a Be m i p r z e - w y k l u c z e n i a c z s t e c z k o w e g o . W w y p a d -
p Bu k a n i u d o Bk w m i k r o p By t k i b u f o r e m k u R P - H P L C w y k o r z y s t u j e s i k o l u m n
w p r o w a d z a n y j e s t s u b s t r a t . W k o Dc o w y m C h r o m p a c k P 3 0 0 R P . R o z d z i a Bo w i p o d -
e f e k c i e n a s t p u j e k a t a l i z o w a n a p r z e z d a w a n e s f r a k c j e a- o r a z b- l a k t o g l o b u l i n
e n z y m r e a k c j a b a r w n a . P o m i a r m o |n a m l e k a k r o w i e g o o r a z o w c z e g o i k o z i e g o
p r z e p r o w a d z i n a c z y t n i k u m i k r o p By t e k w z a l e |n o [c i o d o c z e k i w a n e g o c h a r a k t e r u
z f i l t r e m o d c i n a j c y m d l a o d p o w i e d n i e j d e n o m i n a c j i p r o d u k t u . T e r m o s t a t o w a n a
d Bu g o [c i f a l i ( r y s u n e k ) . C z u Bo [ t e g o t e s t u w t e m p e r a t u r z e 4 5 C k o l u m n a p o z w a l a
o s c y l u j e w o k B 0 , 5 % . P o z w a l a o n n a w y - n a g r a d i e n t o w y r o z d z i a B p o w y |s z y c h s k Ba d -
k r y c i e z a n i e c z y s z c z e D w z a k r e s i e 1 - 1 0 % ; n i k w p r z y z a s t o s o w a n i u f a z y r u c h o m e j
p r o c e d u r a o z n a c z e n i a w r a z z w s t p n A : 0 , 1 - p r o c e n t o w y k w a s t r i f l u o r o o c t o w y
e k s t r a k c j p r b k i t r w a o k . 2 - 3 g o d z i n . w w o d z i e o r a z f a z y B : 0 , 1 - p r o c e n t o w y
W w y p a d k u p r b e k t r a k t o w a n y c h t e c h - k w a s t r i f l u o r o o c t o w y w 8 0 - p r o c e n t o w y m
n o l o g i U H T l u b e k s p o n o w a n y c h p r z e z a c e t o n i t r y l u . C h r o m a t o g r a m r o z w i j a -
p o n a d 1 5 - 2 0 s e k u n d n a t e m p e r a t u r n y j e s t p r z e z 3 0 m i n u t p r z y p r d k o [c i
7 2 C z a l e c a n e j e s t s t o s o w a n i e t e s t w s e - p r z e p By w u f a z y m o b i l n e j 0 , 5 m L / m i n
l e k t y w n y c h w o b e c g B w n e j f r a k c j i b i a Be k i d e t e k c j i s p e k t r o f o t o m e t r y c z n e j p r z y
m l e k a , g- k a z e i n , b o w i e m i m m u n o g l o b u - d Bu g o [c i f a l i 2 0 5 n m . A n a l i z a j a k o [c i o -
l i n y G r w n i e | s t o s o w a n e w t e g o t y p u w a j e s t m o |l i w a d z i k i z r |n i c o w a n y m
t e s t a c h p o d l e g a j w t y c h w a r u n k a c h c z a s o m r e t e n c j i g a t u n k o w o s p e c y f i c z -
t e r m i c z n e j d e n a t u r a c j i . W t y m w y p a d k u n y c h a- o r a z b- l a k t o g l o b u l i n . L i n i o w a
k o n i e c z n e j e s t z a s t o s o w a n i e p r o c e d u r y k o r e l a c j a p o m i d z y l o g a r y t m e m z p o l a
e k s t r a k c j i k a z e i n z m l e k a l u b s e r a , w y - p o w i e r z c h n i p i k u c h r o m a t o g r a f i c z n e g o
m a g a j c e j p r z y g o t o w a n i a d o d a t k o w y c h w o Bo w e j b- l a k t o g l o b u l i n y a p r o c e n t o w
3 7
r e k l a m a
L A B O R A T O R I U M 9 - 1 0 / 2 0 1 0 L A B O R A T O R I U M P R Z E M Y S AO W E
|
T E C H N I K A M A R K E R Y P R G W Y K R Y W A L N O ZC I
w o Bo w a p a r a - - k a z e i n a
E l e k t r o f o r e z a w o Bo w a aS 1 - k a z e i n a 0 , 5 - 1 %
w o Bo w a a- k a z e i n a
w o Bo w a 2 - o r a z 3 - k a z e i n a , m e t o d a r e f e r e n c y j n a U E
I z o e l e k t r o o g n i s k o w a n i e 0 , 5 - 1 %
k o z i a o r a z o w c z a p a r a - - k a z e i n a
k o z i a - l a k t o g l o b u l i n a o r a z w o Bo w a - l a k t o g l o b u l i n a A
E l e k t r o f o r e z a k a p i l a r n a k o m p l e k s o w a a n a l i z a w o Bo w y c h k a z e i n o r a z b i a Be k s e r w a t k i 1 %
w o Bo w a aS 1 - k a z e i n a
w o Bo w a - k a z e i n a
w o Bo w a i m m u n o g l o b u l i n a G
P o [r e d n i a E L I S A o w c z a aS 2 - k a z e i n a 0 , 1 - 1 %
w o Bo w a - k a z e i n a
w o Bo w a aS 1 - k a z e i n a
w o Bo w a - k a z e i n a
K a n a p k o w a E L I S A k o z i e b i a Bk a s e r w a t k i 0 , 5 - 1 %
w o Bo w a - l a k t o g l o b u l i n a
w o Bo w a , k o z i a o r a z o w c z a - l a k t o g l o b u l i n a
R P - H P L C w o Bo w a a- l a k t o a l b u m i n a 1 - 2 %
o r a z - l a k t o g l o b u l i n a B
C h r o m a t o g r a f i a j o n o w y m i e n n a w o Bo w a , k o z i a o r a z o w c z a aS 1 - , - k a z e i n a 1 %
C h r o m a t o g r a f i a h y d r o f o b o w a w o Bo w a , k o z i a o r a z o w c z a aS 1 - , - aS 2 - , - k a z e i n a
s t a r t e r y z s y n t e t y z o w a n e n a b a z i e g e n u w o Bo w e j o k s y d a z y c y t o c h r o m u I I ,
P C R m i t o c h o n d r i a l n e g o c y t o c h r o m u B , m i t o c h o n d r i a l n e g o D N A , p o d j e d n o s t k i 1 2 S 0 , 1 - 0 , 5 %
r y b o s o m a l n e g o R N A
T a b e l a . P o r w n a n i e m e t o d a n a l i z y z a f a Bs z o w a D p r o d u k t w m l e c z a r s k i c h
z a w a r t o [c i m l e k a k r o w i e g o w m l e k u b e k m l e k a . I E F b y Bo r w n o c z e [n i e p i e r w - 2 o r a z 3 . T e f a Bs z y w i e n e g a t y w n e w y n i k i
o w c z y m l u b k o z i m p o z w a l a n a a n a l i z s z t e c h n i k , k t r a z o s t a Ba z a a p r o b o w a n z g r e c k i e g o l a b o r a t o r i u m s p o w o d o w a n e
i l o [c i o w . W p r a c y M e y e r a i w s p . z r o k u p r z e z K o m i s j E u r o p e j s k d o b a d a n i a b y By n i e f o r t u n n y m w y b o r e m t e s t u E L I -
1 9 9 7 m o n i t o r o w a n o p o z i o m z a n i e c z y s z - a u t e n t y c z n o [c i p r o d u k t w m l e c z a r s k i c h S A s e l e k t y w n e g o w o b e c i m m u n o g l o b u l i n
c z e D m l e k i e m k r o w i m w s z e r o k i m z a k r e s i e ( 1 9 9 2 r . ) . I z o e l e k t r o o o g n i s k o w a n i e g- k a z e i n G , k t r e w t e r m i z o w a n y m m l e k u p o d l e g a j
s t |e D: 2 - 9 5 % . p o w s t a By c h w w y n i k u h y d r o l i z y b i a Be k s e r a p r z y n a j m n i e j c z [c i o w e j d e n a t u r a c j i . W t a -
C h r o m a t o g r a f i a j o n o w y m i e n n a p o - p o d w p By w e m p l a z m i n y ( E . C . 3 . 4 . 2 1 . 7 ; n u - k i c h p r z y p a d k a c h z n a k o m i c i e s p r a w d z a s i
l e g a n a z r |n i c o w a n e j e l u c j i s k Ba d n i k w m e r a c j a w e d Bu g n o m e n k l a t u r y K o m i s j i r e a k c j a Ba Dc u c h o w a p o l i m e r a z y , b o w i e m
w s k u t e k w y h a m o w y w a n i a n a k o l u m n i e E n z y m o w e j ) z z a s t o s o w a n i e m s t a n d a r d w k w a s y n u k l e i n o w e t o j e d e n z n a j t r w a l s z y c h
p o p r z e z j o n o w e o d d z i a By w a n i a z e z Bo |e m 0 o r a z 1 - p r o c e n t o w e j w o Bo w e j k a z e i n y p o - s k Ba d n i k w k o m r e k . W w y p a d k u w y b o r u
c h r o m a t o g r a f i c z n y m . D o a n a l i z y b i a Be k z w a l a n a j a k o [c i o w a n a l i z . M e t o d a p Bi l o - t e j t e c h n i k i d o p o m i a r u a u t e n t y c z n o [c i
m l e k a , m . i n . aS 1 - , k- k a z e i n w w a r i a n c i e [c i o w a w y m a g a a n a l i z y d e n s y t o m e t r y c z n e j p r o d u k t w m l e c z a r s k i c h , z r e s z t p o d o b n i e
k a t i o n o w y m i e n n e j c h r o m a t o g r a f i i s t o s o - |e l i i t y m s a m y m d o [ z a a w a n s o w a n y c h j a k w w y p a d k u d o w o l n e g o a r t y k u Bu |y w n o -
w a n e s s z e r o k o p o r o w e k o l u m n y ( [r e d - z e s t a w w d o a r c h i w i z a c j i i d o k u m e n t a c j i [c i o w e g o , w a r t o z w r c i u w a g n a w Ba [c i w y
n i c a z i a r e n : 1 0 m ) W a t e r s P r o t e i n P a k e l e k t r o f o r o g r a m w . d o b r s t a r t e r w d o P C R , k t r e z a d e c y d u j
D E A E - 5 P W l u b S h o d e x I E C C M - 8 2 T . o w y d a j n o [c i c a Be j r e a k c j i . T e k i l k u d z i e s i -
R o z w i j a n y j e s t d w u s k Ba d n i k o w y g r a d i e n t , T E C H N I K I P C R c i o n u k l e o t y d o w e s e k w e n c j e p r z y Bc z a j c e
g d z i e j a k o f a z A s t o s u j e s i 1 0 m M k w a s O p r a c o w a n a w r o k u 1 9 8 7 p r z e z K a r y M u l - s i n a j e d n y m z e t a p w r e a k c j i w p r o c e s i e
m a l o n o w y z a w i e r a j c y 5 M m o c z n i k , l i s t e c h n i k a P C R ( a n g . P o l y m e r a s e C h a i n t z w . a n i l i n g u d o m a t r y c y D N A m u s z b y
p H 6 , 0 , a f a z a B w z b o g a c o n a j e s t d o d a t - R e a c t i o n , P C R ) , c z y l i t e c h n i k a r e a k c j i Ba D- s t a r a n n i e d o b r a n e . W l i t e r a t u r z e p r z e d m i o -
k i e m 0 , 5 M N a C l . D e t e k c j a w y m y w a n y c h c u c h o w e j p o l i m e r a z y , p o z w a l a n a a m p l i f i - t u z a l e c a n e s s e k w e n c j e o l i g o n u k l e o t y d w
z k o l u m n y b i a Be k n a s t p u j e w z a k r e s i e k a c j e s e l e k t y w n y c h f r a g m e n t w D N A p r z y z s y n t e t y z o w a n e n a b a z i e f r a g m e n t u g e n u
n a d f i o l e t u p r z y d Bu g o [c i f a l i 2 8 0 n m . w y k o r z y s t a n i u t e r m o s t a b i l n e j p o l i m e r a z y k o d u j c e g o w o Bo w o k s y d a z c y t o c h r o m u
C h r o m a t o g r a f i a h y d r o f o b o w a p o z w a - b a k t e r y j n e j . M e t o d P C R c e c h u j e w y s o k a I I , o d c i n k w m i t o c h o n d r i a l n e g o D N A c z y
l a n a r o z d z i a B c a Be g o n i e m a l s p e k t r u m c z u Bo [ w z a k r e s i e 0 , 1 - 0 , 5 % . P o n a d t o j e s t t e | f r a g m e n t u p o d j e d n o s t k i 1 2 S r y b o s o -
k a z e i n ( aS 1 - , k- aS 2 - , b- ) , c h o j e s t m n i e j o n a d o b r a l t e r n a t y w w w y p a d k u s e r w m a l n e g o R N A . D o d a t k o w y m e l e m e n t e m
p o p u l a r n a , p r a w d o p o d o b n i e z u w a g i p o d d a w a n y c h o b r b c e t e r m i c z n e j . W l i t e r a - p r z y g o t o w a n i a p r b y j e s t t u t a j d o b r o d p o -
n a n i e c o m n i e j s e l e k t y w n e o d d z i a By w a n i e t u r z e c y t o w a n y j e s t p r z y p a d e k , k i e d y j e d n o w i e d n i e g o z e s t a w u d o i z o l a c j i t k a n k o w e g o
z w y p e Bn i e n i e m k o l u m n y . z l a b o r a t o r i w w e t e r y n a r y j n y c h w L a r i s s i e D N A , g w a r a n t u j c e g o o p t y m a l n y u z y s k
n i e w y k r y Bo m e t o d E L I S A z a n i e c z y s z c z e D k w a s u n u k l e i n o w e g o d o r e a k c j i P C R , c h o
M E T O D Y s e r a f e t a w t r z e c h a n a l i z o w a n y c h p r b k a c h , w i e l u p r o d u c e n t w o f e r u j e j u | s p e c j a l n e
E L E K T R O F O R E T Y C Z N E p o d c z a s g d y r w n o l e g Be t e s t y w y k o n a n e z e s t a w y d o i z o l a c j i g e n o m o w e g o D N A
M e t o d a i z o e l e k t r o o g n i s k o w a n i a ( a n g . m e t o d I E F o r a z P C R w A u s t r i i o r a z z a r t y k u B w r o l n o s p o |y w c z y c h . q
I s o e l e c t r o f o c u s i n g , I E F ) p o z w a l a n a a n a l i z t e c h n i k E L I S A , a l e s p e c y f i c z n w o b e c
w i k s z e j i l o [c i p r b e k n i | c h r o m a t o g r a f i a , k a z e i n y , w N i e m c z e c h p o t w i e r d z i By j e d - P i [m i e n n i c t w o d o s t p n e n a
c o j e s t i s t o t n e w r u t y n o w y m s k r i n i n g u p r - n a k o b e c n o [ z a n i e c z y s z c z e D w p r b k a c h w w w . l a b o r a t o r i u m . e l a m e d . p l
3 8
1 . C o l a k H . , A y d i n A . , N a z l i B . , E r g u n O . : D e t e c t i o n o f c o w s m i l k i n s h e e p s c h e e s e s b y
i m m u n o c h r o m a t o g r a p h y . F o o d C o n t r o l , 2 0 0 6 , 1 7 , 9 0 5 - 9 0 8 .
2 . M a y e r H . K . : M i l k s p e c i e s i d e n t i f i c a t i o n i n c h e e s e v a r i e t e s u s i n g e l e c t r o p h o r e t i c ,
c h r o m a t o g r a p h i c a n d P C R t e c h n i q u e s . I n t e r n a t i o n a l D a i r y J o u r n a l , 2 0 0 5 , 1 5 , 5 9 5 - 6 0 4 .
3 . M a f r a I . , R o x o A . , F e r r e i r a I . , O l i v e i r a M . B : A d u p l e x p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n f o r t h e
q u a n t i t a t i v e d e t e c t i o n o f c o w s m i l k i n g o a t s m i l k c h e e s e . I n t e r n a t i o n a l D a i r y J o u r n a l 2 0 0 7 , 1 7 ,
1 1 3 2 - 1 1 3 8 .
4 . M a y e r H . K . , H e i d l e r D . , R o c k e n b a u e r C . : D e t e r m i n a t i o n o f c o w s , e w e s a n d g o a t s m i l k i n
c h e e s e b y i s o e l e c t r i c f o c u s i n g a n d c a t i o n - e x c h a n g e H P L C o f - a n d p a r a - - c a s e i n s . I n t e r n a t i o n a l
D a i r y J o u r n a l , 1 9 9 7 , 7 , 6 1 9 - 6 2 8 .
5 . F e r r e i r a I . , C a c o t e H . : D e t e c t i o n a n d q u a n t i f i c a t i o n o f b o v i n e . O v i n e a n d c a p r i n e m i l k
p e r e c e n t a g e s i n p r o t e c t e d d e n o m i n a t i o n o f o r i g i n c h e e s e s b y r e v e r s e d - p h a s e h i g h - p e r f o r m a n c e
l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y o f b e t a - l a c t o g l o b u l i n s . J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h y A , 2 0 0 3 , 1 0 1 5 , 1 1 1 -
1 1 8 .
6 . B o r k o v a M . , S n a s e l o v a J . : P o s s i b i l i t i e s o f d i f f e r e n t a n i m a l m i l k d e t e c t i o n i n m i l k a n d d a i r y
p r o d u c t s a r e v i e w . C h e c h J o u r n a l o f F o o d S c i e n c e , 2 0 0 5 , 2 3 , 4 1 - 5 0 .
7 . A s e n s i o L . , G o n z a l e s I . , G a r c i a T . , M a r t i n R . : D e t e r m i n a t i o n o f f o o d a u t h e n t i c i t y b y e n z y m e -
l i n k e d i m m u n o s o r b e n t a s s a y ( E L I S A ) . F o o d C o n t r o l , 2 0 0 8 , 1 9 , 1 - 8 .
8 . C o m m i s s i o n R e g u l a t i o n ( 1 9 9 2 ) R e f e r e n c e m e t h o d f o r t h e d e t e c t i o n o f c o w s m i l k c a s e i n i n
e w e s m i l k c h e e s e . E E C n o 6 9 0 / 9 2 o f 1 9 M a r c h 1 9 9 2 . O f f i c i a l J o u r n a l o f E u r o p e a n C o m m u n i t i e s ,
L 7 4 , 2 3 - 3 2 .
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
laboratorium artykul 10 0166laboratorium artykul 10)625Laboratorium sprawozdanie 10Wyposazenie pomiarowe w laboratorium artykul laboratorium 08specyfikacja laboratoria wykonawczy 105 1 10 CCNA1 Laboratorium plLaboratorium nr 2, 14 10 2011ARTYKUŁY LIDER 10 ATUTÓWArtykuł moduł 10590,10,artykul87,10,artykul334,10,artykul016 10016 10 (3)więcej podobnych podstron