KOLOKWIUM X Teoretyczne podstawy oznaczeń laboratoryjnych 30.05-03.06.2011

Aminokwasy:

Reakcja ogólna na aminokwasy, peptydy i białka - reakcja ninhydrynowa. Reakcje charakterystyczne na wybrane aminokwasy - wykrywanie aminokwasów aromatycznych, tyrozyny, tryptofanu, histydyny, argininy, cysteiny. Metody rozdziału aminokwasów - chromatografia bibułowa i jonowymienna.

Peptydy i białka:

Oznaczanie pierwszorzędowej struktury polipeptydów za pomocą metody Sangera, Edmana oraz z zastosowaniem chlorku dansylu. Oznaczanie stężenia białka - reakcja biuretowa i Lowry`ego. Metody frakcjonowania mieszaniny białek - wysalanie, filtracja żelowa. Analiza jakościowa i ilościowa białek za pomocą metody elektroforezy żelowej (w tym SDS-PAGE). Metody oznaczania masy cząsteczkowej białek.

Witaminy:

Wykrywanie witamin rozpuszczalnych w tłuszczach, oznaczanie stężenie witaminy C.

Cukry:

Reakcje charakterystyczne cukrów w środowisku obojętnym, zasadowym i silnie kwaśnym - reakcje ogólne na cukry, reakcja z fuksyną, właściwości redukujące cukrów, odróżnianie ketoz od aldoz oraz heksoz od pentoz. Metody służące identyfikacji cukrów - tworzenie osazonów. Oznaczanie stężenia glukozy we krwi. Wyznaczanie krzywej tolerancji glukozy. Oznaczanie stężenia kwasów sialowych.

Utlenianie biologiczne:

Wykrywanie aktywności oksydazy cytochromowej i katalazy. Oznaczanie aktywności peroksydazy glutationowej i ceruloplazminy w surowicy krwi.

Tłuszcze:

Wykrywanie glicerolu. Jełczenie aldehydowe. Oznaczanie stężenia trójglicerydów, cholesterolu całkowitego oraz frakcji HDL w surowicy krwi.

Kwasy nukleinowe:

Oznaczanie stężenia RNA. Reakcje służące odróżnianiu cząsteczki RNA od DNA. Wykrywanie pentozy, zasady purynowej oraz reszt fosforanowych po hydrolizie cząsteczki DNA.

Soki trawienne:

Wykrywanie enzymatycznych składników soków trawiennych - amylaza, lipaza, trypsyna. Oznaczanie kwasowości soku żółądkowego. Wykrywanie kwasów żółciowych oraz bilirubiny w żółci.

Krew

Oznaczanie stężenia: hemoglobiny we krwi pełnej oraz kwasu moczowego w surowicy krwi. Wykrywanie śladowych ilości krwi. Różnicowanie obecności bilirubiny wolnej i związanej w surowicy krwi - bezpośredni i pośredni odczyn van den Bergha. Oznaczanie aktywności aminotransferazy alaninowej, aminotransferazy asparaginianowej, dehydrogenazy mleczanowej, fosfatazy alkalicznej i α-amylazy w surowicy krwi.

Mocz

Wykrywanie obecności: mocznika, kreatyniny, indykanu, urobilinogenu, kwasu delta-amonolewulinowego, krwi, białka, bilirubiny, cukru i ciał ketonowych w moczu. Ilościowe oznaczanie kreatyniny w surowicy oraz mocznika i białka w moczu. Wykorzystanie poznanych metod do diagnozowania wybranych stanów chorobowych (cukrzyca, żółtaczka, stany zapalne nerek).

Dodatkowo

Prawidłowe wartości biochemicznych badań laboratoryjnych krwi (białko całkowite i frakcje białkowe, glukoza, trójglicerydy, cholesterol całkowity i jego frakcje lipoproteinowe, kreatynina, mocznik, kwas moczowy, bilirubina całkowita oraz wolna i związana, aktywności enzymów diagnostycznych: AlAT, AST, LDH). Podstawowe obliczenia chemiczne - rozcieńczenia roztworów, zamiana jednostek.

---