LABORATORIUM 6 

 

 

 

Temat: PODATNOŚĆ RÓŻNYCH SUBSTANCJI NA BIODEGRADACJE 

Z WYKORZYSTANIEM DROBOUSTROJÓW OSADU CZYNNEGO 

 

 
Zadanie 1. Zużywanie glukozy przez osad czynny i czyste szczepy bakterii 
 
Wykonanie: 
 

Przygotować cztery probówki. Następnie dodać do nich: 

 

1.  1 ml wymieszanego osadu czynnego i 1 ml 1% roztworu glukozy- próba badana 
2.  1 ml wymieszanego osadu czynnego i 1 ml 0,9% roztworu NaCl- próba kontrolna 
3.  1 ml zawiesiny bakterii i 1 ml 1% roztworu glukozy- próba badana 
4.  1 ml zawiesiny bakterii i 1 ml 0,9% roztworu NaCl- próba kontrolna 

 

Próby  inkubować  przez  20  minut  w  temperaturze  pokojowej.  Po  tym  czasie  we 

wszystkich  mieszaninach  wykonać  próbę  Benedicta.  W  tym  celu  do  czterech  czystych 
probówek dodać po 1  ml odczynnika Benedicta i  do każdej  z nich dodać 0,2  ml  mieszaniny 
reakcyjnej.  Probówki  umieścić  na  ok.  1-2  minuty  we  wrzącej  łaźni  wodnej.  Zanotować 
wyniki i zinterpretować je.    
 
 
Zadanie  2.  Badanie  aktywności  glikozydazowej  osadu  czynnego  i  czystych  szczepów   
bakterii 
 

Przygotować cztery probówki. Następnie dodać do nich: 

 

1.  1  ml  wymieszanego  osadu  czynnego,  1  ml  buforu  octanowego  o  pH  4,7  i  1  ml  2% 

sacharozy- próba badana 

2.  1 ml wymieszanego osadu czynnego, 1 ml buforu octanowego o pH 4,7 i 1 ml wody - 

próba kontrolna 

3.  1 ml zawiesiny bakterii, 1 ml buforu octanowego o pH 4,7 i 1 ml 2% sacharozy- próba 

badana 

4.  1  ml  zawiesiny  bakterii,  1  ml  buforu  octanowego  o  pH  4,7  i  1  ml  wody  -  próba 

kontrolna 

 

Próby  inkubować  przez  20  minut  w  temperaturze  pokojowej.  Po  tym  czasie  we 

wszystkich  mieszaninach  wykonać  próbę  Benedicta.  W  tym  celu  do  czterech  czystych 
probówek dodać po 1  ml odczynnika Benedicta i  do każdej  z nich dodać 0,2  ml  mieszaniny 
reakcyjnej.  Probówki  umieścić  na  ok.  1-2  minuty  we  wrzącej  łaźni  wodnej.  Zanotować 
wyniki i zinterpretować je.    

 
 
 
 
 

Zadanie 3. Rozkład skrobi przez osad czynny i czyste szczepy bakterii 
 
Wykonanie: 
 

Przygotować dwie probówki. Następnie dodać do nich: 

 

1.  2 ml wymieszanego osadu czynnego i 1 ml 0,1% roztworu skrobi 
2.  2 ml zawiesiny bakterii i 1 ml 0,1% roztworu skrobi 

 

Próby inkubować przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Po tym czasie przygotować 

dla każdej z prób sześć rozcieńczeń. W tym celu dodać do sześciu probówek po 2 ml wody, a 
następnie  do  pierwszej  przenieść  2  ml  odpowiedniego  inkubatu,  zamieszać,  pobrać  2  ml  i 
przenieść  do  drugiej  probówki  itd.    Rozcieńczając  w  ten  sposób  każdą  z  kolejnych  prób 
uzyskuje  się  jej  rozcieńczenia:  2-,  4-,  8-,  16-,  32-  i  64-  krotne.  Następnie  do  każdego  z 
rozcieńczeń dodać po 2 ml 0,01 N roztworu jodu. 

Na podstawie rozcieńczenia,  w którym  już  nie powstaje  niebieskie  zabarwienie,  określić 

ubytek  skrobi  w  poszczególnych  inkubatach.  Wyniki  zestawić  w  tabeli,  oznaczając 
wystąpienie barwy z jodem jako „+”, a brak barwy jako „-‘’.