1
Analiza mikrobiologiczna wody
Flora bakteryjna:
•
Autochtoniczna – typowo wodna
Psychrofile (optimum w 20 st. C)
Tlenowce i względne tlenowce
Prototrofy (woda nie jest bogatym środowiskiem); oligotrofy
Ź
ródło węgla – autotrofy
Ź
ródło energii – fototrofy i chemotrofy
bakterie z rodzajów:
Vibrio, Pseudomonas, Aeromonas, Spiryllom, Micrococcus, Flavibacterium, Serracia,
Chromobacterium
bakterie nitkowate:
Spherotillus, Beggiatoa, Thiotrix
bakterie wodorowe
bakterie metanowe
•
Napływowa –
1.
bakterie glebowe - spłukiwane do wody przez opady
Celulolityczne, nitryfikacyjne
bakterie z rodzajów:
Nitrosomonas, Nitrobacter, Bacillus
2.
bakterie sciekowe – trafiają do wody ze szczątkami pochodzenia organicznego i
nieorganicznego (wraz z nimi do wody trafiają wirusy i pierwotniaki)
Heterotroficzne
Bakterie flory człowieka, zwierząt
Drobnoustroje chorobotwórcze (ze względu na nie przeprowadza się monitoring wody)
bakterie chorobotwórcze:
Shigella – czerwonka, ostre zapalenie żołądka i jelit
Salmonella typhi – dur brzuszny (nie w naszej strefie klimatycznej)
Salmonella paratyphi – dur rzekomy
Salmonella sp. – zatrucia pokarmowe
Bacillus antracis – wąglik – choroba odzwierzęca, wielopostaciowy przebieg
Bacillus subtilis – zapalenie oka, zapalenie spojówek
Campylobacter jejuni – zatrucia pokarmowe
( Proteus – /zwykle saprofit ale przy obniżonej odporności może wywoływać/ zapalenie dróg
moczowych, zapalenie dróg pokarmowych
Escherichia coli szczep chorobotwórczy – zatrucia pokarmowe)
wirusy:
Nagminnego zapalenia wątroby A
enterowirusy (małe )
Polio – choroba Heinego – Mediny
2
Coxakie – zapalenie gardła, przeziębienie, aseptyczne zapalenie opon mózgowych
ECHO – przeziębienie, aseptyczne zapalenie opon mózgowych, zakażenie przewodu
pokarmowego, biegunki u dzieci
drożdże
Bakterie wskaźnikowe
- wskaźniki sanitarne H2O, pośrednio mówią o
zanieczyszczeniu wody – bakterii chorobotwórcze ciężko
hodować w laboratorium, a ich stężenie jest niewielkie
25% masy kałowej to bakterie – kandydatów było dużo – wiele odpadło – nie spełniało
odpowiednich cech
Cechy bakterii wskaźnikowych:
•
stale obecne w przewodzie pokarmowym człowieka (wykrywanie zanieczyszczenia
kałowego wody)
•
znaczna liczba (stale obecna)
•
długość życia w środowisku zewnętrznym dłuższa niż bakterii chorobotwórczych
•
nieprzetrwalnikujące (umożliwia badanie świeżego zanieczyszczenia wody)
•
łatwość identyfikacji
25% masy kałowej to bakterie – kandydatów było dużo – wiele odpadło – nie spełniało
odpowiednich cech
(Bifidobacterium – beztlenowiec; Lactobacillus – ilość zmienna w zależności od składu
diety; Enterococcus faecalis – źle znosi warunki tlenowe;
Bakterie wskaźnikowe – bakterie grupy „coli”:
Gramujemne,
pałeczki,
nieprzetrwalnikujące,
względne beztlenowce,
fermentują laktozę po 48h (wytworzenie kwasu i gazu),
na podłożu Endo (agar odżywczy + laktoza + fuksyna – odbarwiana siarczanem sodu) –
bordowe kolonie z metalicznym połyskiem
Escherichia coli (głównie)
Clepsiella
Aeromonas
Proteus
Enterobacter
Podział bakterii z grupy „coli”
•
typ feralny (E.coli)
fermentują laktozę (z wytworzeniem kwasu i gazu) w 37 st C i w 44 st C
•
typ ziemny (Citrobacter, Enterobacter)
niezdolne do fermentacji laktozy w 44 st C
Oznaczanie miana coli
(najmniejszej objętości badanej wody, w której znajdują się
jeszcze bakterie z grupy coli)
tak realnie to obliczen jeszcze nie było
3
Wskaźnik coli – liczba bakterii z grupy coli w 100 ml wody
Metody badania obecności bakterii z grupy coli:
•
metoda fermentacyjno – probówkowa
płynne podłoże Eijkmana i rurka Durham
•
metoda filtrów membranowych
bakterie na stałych podłożach dyfundują na filtry
Metody obliczania liczby bakterii z grupy coli
•
metody „szybkie” – wygląd podłoża
•
metody statystyczne – „rozcieńczeń Mc Crady’ego”
wyznaczanie NPL (najbardziej prawdopodobnych liczb)
i tu był jakiś bełkot po którym w sposób absolutnie magiczny otrzymaliśmy liczbe 310
☺ ale powiedziala ze to był przykład i ze tego nie trzeba
Odróżnianie Enterobacter aerogenes od Escherichia coli
nie wiem czy tu nie chodzi
o odróżnianie psychrofili od mezofili …
na podstawie wytwarzania indolu z tryptofanu – wynik pozytywny u E. coli
na podstawie wykorzystywania cytrynianu jako jedynego źródła wegla – wynik pozytywny
u E. aerogenes
Badanie ogólnej liczy bakterii
w bulionie odżywczym – obserwacje zmętnienia
na agarze odżywczym
1.
ilość na 1ml po 72h inkubacji w 20 st. C – bakterie wodne
2.
ilość na płytkach lanych (1ml roztworu bakterii zalany wystudzonym agarem) po
24h inkubacji w 37 st. C – bakterie ściekowe i niektóre glebowe
3.
wykrywanie bakterii z grupy coli
reszte trzeba przeczytac w skrypcie ☺