KONSERWACJA PREPARATÓW HISTOLOGICZNYCH
Preparaty po zabarwieniu muszą być odpowiednio zabezpieczone, ponieważ są
nietrwałe(wysychają, pękają, odpadają od szkiełka, odbarwiają się). W tym celu
zamykamy je w odpowiednim medium.
Wybór środka konserwującego zależy od: techniki histologicznej, wykrywanych
składników, np. skrawki żelatynowe uwodnione zamykamy glicerożelatyną wg Kaisera
lub syropem Apathy´ego(wykrywanie lipidów), skrawki parafinowe konserwujemy
balsamem kanadyjskim i żywicami syntetycznymi.
Preparaty parafinowe zamykamy po dokładnym odwodnieniu i prześwietleniu w
żywicach naturalnych lub syntetycznych. Należą do nich: balsam kanadyjski(naturalna
żywica), cedax, DPX, montex i inne.
Wszystkie media muszą spełniać następujące warunki:
-
muszą być przejrzyste, bezbarwne
- nie mogą krystalizować
- muszą być płynne w zamkniętym preparacie
- muszą mieć współczynnik załamania światła zbliżony do szkła aby uniknąć w czasie
oglądania uginania promieni świetlnych(ok.1.34-1,5)
- nie powinny odbarwiać preparatu
Preparat po zabarwieniu musi być natychmiast zamknięty, nie można dopuścić do
całkowitego odparowania ksylenu, ponieważ preparat pęka, odbarwia się i zamknie się
z pęcherzykami powietrza, pod którymi powstają odbarwienia. Maksymalnie czas od
wyjęcia preparatu z ksylenu do zamknięcia balsamem wynosi 25 -30 sek.
Do zamykania preparatów najlepiej używać zobojętnionego balsamu kanadyjskiego lub
salicylowanego o konsystencji ciepłego płynnego miodu. Gęściejszy balsam powoduje
powstanie grubej warstwy zamykającej, co utrudnia obserwację preparatu(uginanie
promienia), zbyt rzadki balsam powoduje powstawanie pęcherzyków.
KOLEJNOŚĆ CZYNNOŚCI
1.
Szkiełko nakrywkowe wytrzeć z pyłu szklanego bawełnianą ściereczką
2. Nanieść na szkiełko nakrywkowe kroplę balsamu kanadyjskiego lub innego medium
o konsystencji ciepłego, płynnego miodu
3. Wyjąć preparat z ksylenu I , sprawdzić pod lampą po której stronie szkiełka
podstawowego jest preparat(obserwacja cienia) i natychmiast przystąpić do zamykania
4. Odwrócić preparat i dotknąć do kropli balsamu(nie dociskać) i natychmiast
odwrócić. Balsam rozprowadza się wzdłuż powierzchni szkiełka nakrywkowego siłami
włosowatości.
5. Preparat wytrzeć z nadmiaru ksylenu od spodu i wzdłuż powierzchni szkiełka
nakrywkowego unikając jego przesunięcia(uszkodzenie preparatu)
6. Preparat opisać ołówkiem diamentowym lub specjalnym pisakiem do szkła: nazwa
narządu, metoda barwienia, data wykonania preparatu
7. Preparat histologiczny umieścić w odpowiedniej kasetce w termostacie do
wyschnięcia.