Charakterystyka i diagnostyka wybranych bakterii Gram (+)
20.10.2014
ZIARNIAKI
STAPHYLOCOCUS SPP. - gronkowce
względne beztlenowce
holotoleranty
wzrastają na podłożu prostym
gronkowce
koagulazododatnie
koagulazoujemne
np. S. aureus
np. S. epidermidis
gronkowce występują na naszej skórze stanowią naturalną fizjologiczną mikroflorę
w zmienionych warunkach mogą wywoływać zakażenia niebezpieczne dla życia i zdrowia
szczególnie niebezpieczeństwo stanowią szczepy metycilonooporne
●
MRSA
●
MRCNS
wykazują odporność na antybiotyki Blaktamowe często także innych grup
NAJISTOTNIEJSZE:
1.
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
●
najbardziej chorobotwórczy gatunek
●
żródłem zakażenia są osoby chore lub nosiciele
●
Nosicielstwo :
❏ może występować u osób zdrowych w okresie wylęgania choroby lub w okresie zdrowieni
rodzaj zakażenia bezobjawowego
❏ polega na bytowaniu drobnoustrojów w obszarach ciała lub rozprzestrzenia się do środowiska
❏ w większości nosicielstwo przejściowe ale może trwać miesiące lub lata nosicielstwo stałe
nie stanowi zagrożenia dla zdrowego człowieka i nie wymaga leczenia
❏ wyjątek: osoby z nawracającym gronkowcowym zakażeniam skóry oraz nosiciele szczepów
MRSA (zalecana eradykacjapersonel medyczny, pacjenci)
● drogi zakażenia:
1. kropelkowa
2. przez kontakt pośredni (ręce)
3. przez przedmioty codziennego użytku
● Jakie zakażenia wywołuje? :
❏ zapalenie mieszków włosowych
❏ jęczmienie
❏ ropnie
❏ czyraki
❏ figówka gronkowca twarzy
● choroby wywoływane toksynami:
1.
SSS gronkowcowe zapalenie złuszczające “zespół oparzonej skóry
” :
najczęściej u dzieci do 5 r. ż.
toksyna eksfoliatywna odpowiada za powstawanie licznych dużych pęcherzy, które pękają i odsłaniają
skórę właściwą
postać łagodna:
a) płonica nie złuszczająca się rumienna wysypka podobna do obserwowanej w płonicy
paciorkowej
b) liszajec pęcherzy: ogromna liczba pęcherzy
2.
TEN ciężkie zmiany martwicze
:
u starszych dzieci
efekt działania eksfoliatyny
3.
TSS zespół wstrząsu toksycznego
:
choroba gorączkowa, toksyna TSST
po raz 1. została u kobiet, które używały tamponów
objawy wymioty, biegunka, wysypka, bóle mięśni, obniżenia ciśnienia tętniczego, może prowadzić do
śmierci i niewydolności narządów
4.
gronkowcowe zatrucia pokarmowe:
zatrucie wywołane przez enterotoksyny gronkowcowe
objawy : występują po 11,5 godz. , po spożyciu lodów, ciastek z kremem, sałatek z majonezem
STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS
zakażenie dróg moczowych u młodych kobiet
DIAGNOSTYKA MIKROBIOLOGICZNA :
1) Badanie mikroskopowe groniaste skupiska ziarenkowców
2) hodowla :
● agar z krwią :
typ B np. aureus, haemolitykus
typ
γ np. hominis, epidermidis
● podłoże Chapmana
● S. aureus wytwarza barwnik( stymulowany przez światło, tem. 2730 stopni C )
3) oznaczanie wytwarzania koagulazy różnicowanie S aureus (koagulaza “+” ) do innych
gronkowców (koagulaza “” )
KOAGULAZA
jest białkowym enzymem produkowanym przez niektóre mikroorganizmy
pozwalającym na przemianę fibrynogenu w fibrynę.
❖ związana (CF) wykrywana testem szkiełkowym, wynik (+) kłaczki
❖ wolna wykrywana testem probówkowym, wynik (+) skrzep
z użyciem osocza krwii lub ludzkiej lub króliczej
4) Test na katalazę :
Kat (+) gronkowce
Kat () paciorkowce
5) Identyfikacja biochemiczna: testy API STAPH, ID 32 STAPH, system Vitek umożliwiają
identyfikację
STREPTOCOCCUS SPP. -paciorkowce
względne beztlenowce
niektóre szczepy wytwarzają otoczkę polisacharydową
drobnoustroje wymagające
najważniejsze gatunki :
a
) Streptococcus pyogenes paciorkowiec gr. A
❏ “paciorkowiec ropotwórczy”
❏ bytuje na błonach śluzowych górnych dróg oddechowych (gardło)
❏ zakażenia: drogą kropelkową, przez kontakt lub zakażone przedmioty
❏ powoduję : anginę, zapalenie gardła, migdałków,
❏ powoduje ropne zakażenia skóry (liszajec, róża, niesztowica)
❏ ropne zapalenie tkanki łącznej podskórnej (łac. cellulitis)
❏ rumień guzowaty nieropne zapalenie skóry i tkanki podskórnej związane z toczącą się lub przebytą
infekcją paciorkowcową
❏ szczepy wytwarzane przez toksynę erytrogenną (przede wszystkim SPE A)
płonica szkarlatyna
STSS (syndrom szoku toksycznego)
❏ szczepy wytwarzane przez toksynę erytrogenną B (SPE B)
martwicze zapalenie powięzi
uogólnione zakażenia: ( zakażenia płodowe i sepsa, ostre zapalenie wsierdzia)
nieropne następstwa przebytych zakażeń: (gorączka reumatyczna, ostre kłębuszkowate
zapalenie nerek)
b) Streptococcus pneumoniae
❏ pl. : dwoinka zapalenia płuc
❏ kolonizuje jamę gardłowonosową
❏ zakażenia: droga kropelkowa, przez bezpośredni kontakt z chorymi lub nosicielami
❏ czynnik etiologiczny zakażenia dróg oddechowych (m.in.: zapalenie płuc) sepsy, ZOMR
c) Streptococcus agalactiae paciorkowiec gr. B
❏ pl.: paciorkowce bezmleczności
❏ składnik mikroflory fizjologicznej jamy ustnej, nosogardzieli, przewodu pokarmowego, pochwy
❏ zakażenia: podczas przechodzenia dziecka orzez kanał rodny
❏ najważniejsze przyczyny zakażen okołoporodowych u matek (zak. ropne, sespsa połogowa) i
noworodków( zapalenie płuc, bakteriemia, później sepsa, lub ZOMR)
Streptococcus viridans
● zieleniejące jamy ustnej
● grupy S.mutans, salirarius, mitis, milleri
● fizjologiczna mikroflora jamy ustnej gardła
● odgrywają istotną rolę w rozwoju próchnicy zębów
● mogą powodować zapalenie wsierdzia, ZOMR( gdy przedostana się do krwii)
Enterococcus Enterokoki
● paciorkowce kałowe
● dawniej klasyfikowane jako paciorkowce grupy D (obecnie osobny rodzaj)
● powszechnie izolowane z orzewodu pokarmowego człowieka
● względne beztlenowce
● nieruchliwe (wyjątek E. gallinarum E. casseliflavus
● najważniejsze gatunki pod względem klinicznym : E. faecalis , E. faeclum
● drobnoustroje oportunistyczne :
czynnik etiologiczny zakażenia pacjentów hospitalizowanych (m.in.:
zakażenia układu moczowego, zapalenia wsierdzia, bakteriemie)
● DIAGNOSTYKA:
1.
Badanie mikroskopowe
łańcuszki
dwoinki (S.pneumoniae)
otoczki w preparatach bezpośrednich (S.pneumoniae)
2.
Hodowla:
○ agar z krwią: typ hemolizy
B: S. pyogenes, agalactiae
L: pneumoniae
E. faecalis B lub brak E.faecium L lub brak
3.
identyfikowanie biochemiczne: testy API 20 STREP, ID 32 STAPH, system Vitek
4.
testy aglutynacji lateksowej
Slidex Strepto Icit: wykrywanie AG grupowych paciorkowców wielocukru
Slidex Pheumo Kit : wykrywanie Ag otoczkowych S. pneumoniae
5.
test z batrytacyną i optochiną
wrażliwość S. pyogenes na bacytracynę (A)
wrażliwość S. pneumoniae na optochine (P)
6.
Test CAMP (identyfikacja S.agalactiae)
Enteroccoccus spp.
● od innych paciorkowców różni je
wzrostu w obecności 6,5 % NaCl
w podłożu z 40% żółcią
hydrolizy eskuliny
PODŁOŻE DCA:
∙
wybiórczo – namnażające
∙
zawiera żółć 40%, eskulinę, azydek sodu
∙
używana do identyfikacji streptokoków z grupy D rosną na żółci
∙
pomarańczowe
∙
hydroliza eskuliny powoduje pojawienie się czarnego zabarwienia
∙
eskulinę rozkładają i powodują zaczernienie podłoża Enterococcus spp.
LASECZKI
bezwzględne tlenowce
wytwarzają przetrwalniki (tylko w warunkach tlenowych, zlokalizowane centralnie)
Bacillus anthracis
● wąglik
a) postać skórna (najczęstsza)
b) postać płucna( krwotoczne zapalenie węzłów chłonnych śródpiersia)
c) postać pokarmowa (krwista, puchlina brzuszna)
● DIAGNOSTYKA:
1.
Badanie mikroskopowe:
przetrwalniki: w preparatach barwionych metodą Gramma wyglądają jak puste miejsca w komórce
u preparatów wykonanych bezpośrednio laseczki wąglika ułożone są pojedynczo lub w proste łańcuszki
przypominają kij bambusowy, widoczne są otoczki, które mogą obejmować kilka komórek
w preparatach pośrednich laseczki wąglika ułożone są w długie splątane nici, pojawiają się przetrwalniki,
brak otoczki
2.
Hodowla:
badany materiał przed posianiem ogrzać do 80 stopni C na 2030 min w celu zabicia bakterii
nieprzetrwalników
wzrost na podłożach zwykłych w postaci dużych kolonii, duże szarobiałe kolonie z licznymi
wypustkami jak głowy meduzy
➔ w bulionie tworzą kożuszek albo błonkę
➔ agar z krwią hemoliza B (wyjątek B. anthracis brak)
rodzaj Clostridium (beztlenowe, wytwarzają przetrwalniki ułożone podbiegunowo, biegunowo, centralnie)
Clostridium tetani
● Laseczka tężca
● wytwarza :
tetanospazminę silna neurotoksyna, doprowadza di skurczu mięśni
tetanolizynę powoduję hemolizę
● odmiany:
a) miejscowy okolica rany
b) obejmuje mięsień głowy zabija 1 lub > nerwów
c) tężec uogólniony dominuje skurcz silnych mięśni nad słabymi, napady drgawkowe, sztywność karku,
zaburzenia rytmu serca, opistotonus
d) tężec noworodków rozwija się po zakażeniu rany lub przecięciu pępowiny
szczepionka skojarzona DTP szczep uodparnia przeciw błonnicy, tężcowy i krztuścowy
Clostridium botulinum
● czynniki dominujące chorobotwórczo:
botulina ciepłochwiejna egzotoksyczna neurotoksyna blokuje uwalniane acetylocholiny w płytce
nerwowomięśniowej co doprowadza do zwiotczałości mięśni
botulizm :
a) klasycznyzatrucie pokarmowe toksyną znajdującą się w artykule żywnościowym np. tzw. puszki
objawy : po 1236 godz, podwójne widzenia, opadanie powiek, ślinotok,
śmierćskutkiem zatrzymania akcji serca
b) przyranny przez zanieczyszczenie rany ziemą, objawy takie same jak przy klasycznym
botuliźmie
c) u niemowląt (do 1 r. ż. )
toksyna wytwarzana w jelicie po kolonizacji laseczek, które w formie
przetrwalników dostały się do pożywienia, w szczegółności miód
Clostridium difficile
● biegunka związana ze stosowaniem antybiotyków AAD
→ schorzenie będące następstem długotrwałym (38tyg) antybiotykoterapii z
użyciem antybiotyków o szerokim zakresie działania
● poantybiotykowe zapalenie okrężnicy (AAC)
● PMC
wytwarza enterotoksynę A i cytotoksynę B, które powodują owrzodzenie
Clostridium perfringens
●
zgorzel gazowa
rozpływna martwica mięśni, lub tkanki łącznej z wytworzeniem gazu i znamionami
ogólnej toksemii
● zatrucie pokarmowe
● DIAGNOSTYKA:
1.
badanie mikrobiologiczne:
średnica przetrwalników najczęściej większa od szerokości komówki
2.
hodowla:
materiał ogrzać do 80 st C przez 2030 min
podłoża płynne zawierające składniki obniżające potencjał oksydacyjnoredukcyjny np. bulion
podłoża stałe umieszcza się w anaerostacie
agar z krwią: hemoliza B (wyj. difficilebrak), wokół kolonii C. perfringens obserwuje się podwójną strefę
hemolizy
podłoże wybiórcze z antybiotykami np. CCFA do izolacji difficile (jasnozielona fluorestencyjna w świetle
UV, zapach parakrezolu koński obornik)
3.
identyfikacja
różnicowanie biochemiczne: Testy API, ZOA, ID 32A, system Vitek
wykrywanie toksyn(techniki immunologiczne i biologii molekularnej)
w rozpoznaniu obraz kliniczny często wystarczający