7 Ekstrakcja do fazy stalej (SPE)

background image

Ekstrakcja do fazy

stałej (SPE)

background image

Solid Phase Extraction - SPE

Wprowadzona w latach 70-dziesiatych

Wydajna i szybka metoda selektywnego
izolowania, a także zagęszczania i
oczyszczania od matrycy biologicznej
lub środowiskowej

Umożliwia przygotowanie prób o
odpowiedniej czystości do analizy HPLC,
GC, HPTLC, RIA, spektrofotometrycznej
itp..

background image

Solid Phase Extraction - SPE

Polega na przeniesieniu analitów, dzięki
wykorzystaniu zjawiska podziału, z próbki
ciekłej do fazy stałej, którą stanowią
sorbenty

Stosuje się obniżone ciśnienie w celu elucji
małych porcji rozpuszczalników

Zaczyna z powodzeniem zastępować
ekstrakcję ciecz-ciecz, ponieważ
pozbawiona jest większości jej wad

background image

SPE - zalety

Możliwość izolacji i wzbogacania
zarówno analitów lotnych, jak i
nielotnych

Możliwość zastosowania zarówno do
ekstrakcji składników organicznych, jak
i nieorganicznych, np. metali

Możliwość przechowywania analitów
zatrzymanych w warstwie sorbentu
przez długi czas

background image

SPE - zalety

Drastyczne zmniejszenie ilości używanych
rozpuszczalników

Wyeliminowanie problemów związanych z
tworzeniem się emulsji w procesie
ekstrakcji (ciecz-ciecz), czy tez pienienia
się próbki (ciecz-gaz)

Możliwość wykorzystania nie tylko w
procesie izolacji i wzbogacania, ale także w
trakcie oczyszczania i frakcjonowania
ekstraktów

background image

SPE - zalety

Duży wybór stałych sorbentów
umożliwia uzyskanie znacznej
selektywności procesu wzbogacania, co
poważnie zmniejsza ryzyko interferencji
na dalszych etapach procesu
analitycznego

Wysoka powtarzalność procesu

Łatwość automatyzacji procesu

background image

background image

Wypełnienia kolumn SPE

Wypełnienie

Struktura związanego ligandu

Odwrócone fazy

Octadecyl (C18)

-(CH2)17-CH3

Octyl (C8)

-(CH2)7-CH3

Ethyl (C2)

-CH2-CH3

Cyklohexyl

-CH2-CH2-

Phenyl

-CH2CH2CH2-

Normalne fazy

Cjano (CN)

-(CH2)3CH

Amino (NH2)

-(CH2)NH2

Diol (COHCOH)

-(CH2)3-OCH2CH-CH2OH OH

Adsorpcyjne

Żel krzemionkowy

-SiOH

Florisil ®

Mg2SiO3

Tlenek glinu

Al2O3

background image

Wypełnienia kolumn SPE

Wypełnienie

Struktura związanego ligandu

Jonowymienne

Amino (NH2)

-(CH2)3 NH2

1,2 – Amino (NH/NH2)

-(CH2)3 NH CH2CH2 NH3

Amina IV-rzedowa (N+)

-(CH2)2 COOH

Kwas karboksylowy (COOH)

-(CH2)3 N+ (CH3)2

Kwas (SO2 OH)

-(CH2)3 SO2 OH

Kwas (Ar SO2 OH)

-(CH2) -3- SO2 OH

SE
Sephadex® G-25

Dextran

Szerokoporowate

RP Butyl (C4)

-(CH2)3 CH3

HI HI-propyl (C3)

-(CH2)2 CH3

IE CBX (kwas karboksylowy)

-COOH

PEI (polietylenoimina)

-(CH2CH2NH)n-

background image

Wypełnienia kolumn SPE

Dobór fazy stałej i eluentu zależny jest

od rozpuszczalności, polarności,

właściwości chemicznych izolowanych

analitów, ich ilości, objętości próbki,

stopnia zanieczyszczenia, złożoności

matrycy, a także wpływu matrycy lub

innych analitów.

background image

SPE – zastosowanie

SPE stosowana jest do prób osocza,
surowicy, śliny, potu, włosów

Stosowanie jej do prób krwi pełnej,
tkanek i narządów musi być
poprzedzone izolowaniem wstępnym

W zależności od rodzaju badanego
materiału, należy usunąć białka, lipidy i
inne ciała balastowe. Niekiedy należy
dodatkowo wykonać hydrolizę

background image

Odbiałczanie

Można stosować rożne substancje: kwas
wolframowy, nadchlorowy,
trichlorooctowy, alkohol etylowy,
mieszaninę alkoholu etylowego i kwasu
winowego, siarczan amonowy, czy
alkaliczny r-r siarczanu cynku

Proces prowadzi się w temp 60-100 ºC, co
jest czynnikiem przyśpieszającym, a także
zwiększa rozpuszczalność w wodzie
związków trudno rozpuszczalnych

background image

Odbiałczanie

Najczęściej stosuje się metody:

Siarczanowo-amonową

Wolframową

Metoda wolframowa nadaje się
szczególnie do materiału biologicznego
zawierającego trucizny o charakterze
kwaśnym i obojętnym. Mniej przydatna
dla związków zasadowych.

background image

Metoda siarczanowo-

amonowa

Do 50 g próbki dodaje się siarczan
amonowy i 1M kwas siarkowy do pH 4.
Mieszaninę ogrzewa się do wrzenia i w
tej temperaturze utrzymuje się przez 3
minuty, po czym sączy się na gorąco, a
osad na sączku przemywa wrząca
woda, aż do uzyskania 500ml
przesączu.

background image

Metoda wolframowa

1cz. materiału homogenizuje się z 1cz.
25% r-r wolframianu sodowego i 1cz.
wody. Mieszaninę przenosi się do kolby,
homogenizator przepłukuje 4cz. wody. Po
podaniu 1cz. 50% r-r disiarczanu
sodowego, mieszaninę ogrzewa się na
łaźni wodnej, aż przestanie ciemnieć,
sączy się lub wiruje. Przesącz ekstrahuje
rozp. organicznymi tj.: chloroform, eter,
octan etylu.

background image

SPE – schemat kolumny

background image

SPE – tok postępowania

Kondycjonowanie kolumienek

Podanie próbki

Przemywanie

Elucja

background image

SPE – kondycjonowanie

kolumn

Proces polega na aktywacji

materiału wypełniającego

przed naniesieniem próbek.

Rodzaj rozpuszczalnika zależy

od materiału wypełniającego

kolumienkę i rodzaju

analizowanego związku.

background image

SPE – podanie próbki

(adsorpcja)

Objętość próbki: od kilku

mikronów do litrów. Dla

maksymalnej wydolności

systemu nie powinna
przekraczać 250ml w

odwróconym układzie

polarności. Szybkość

prowadzenia procesu jest

czynnikiem decydującym o

retencji wielu składników.

background image

SPE - przemywanie

W celu oczyszczenia

pozostających w materiale

wypełniającym kolumienkę –

przemyć roztworem, w którym

próbka była rozpuszczona, lub

innym, nie wypłukującym

interesujących nas związków.

background image

SPE - elucja

Przemycie kolumienek małymi

porcjami (200mcl do 2ml) r-rów

mających zdolność wyrugowania

oznaczanych związków.

Większa wydajność procesu

zachodzi przy stosowaniu

mniejszych objętości eluentu.

Rzadziej: ekstrakcja nadkrytyczna,

czy desorpcja termiczna.

background image

Użycie dwóch lub

więcej kolumienek z

rożnymi adsorbentami

umożliwia wstępne

rozdzielenie analitu na

grupy związków, co

podnosi czułość i

selektywność metody.

background image

SPE – ograniczenia/wady

Rurki sorpcyjne i kolumienki ekstrakcyjne:

Stosunkowo łatwo następuje
mechaniczne zatkanie porów materiału
adsorbującego, zwłaszcza jeśli próbka
nie była uprzednio filtrowana

Strumień próbki można przepuszczając
przez złoże sorbentu w ograniczonym
zakresie natężeń przepływu, co może
istotnie przedłużyć czas ekstrakcji

background image

SPE – ograniczenia/wady

Dlatego też, coraz powszechniejsze

staja się krążki ekstrakcyjne

background image

SPE – zalety krążków

ekstrakcyjnych

Przyspieszenie wzbogacania dzięki
możliwości zwiększania przepływu
przez urządzenie ekstrakcyjne

Brak efektu ‘kanalikowania’ złoża

Mała objętość martwa

Łatwość suszenia krążka przed elucją
zatrzymanych analitów

background image

Jednym z kierunków badan mających

doprowadzić do wytworzenia tzw.

szybkich krążków ekstrakcyjnych, które

mogą znacznie skrócić czas ekstrakcji,

są prace nad wykorzystaniem krążków

na matrycy z włókna szklanego.

background image

Dziękuję za uwagę


Document Outline


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
EKSTRAKCJA DO FAZY STAŁEJ spe ppt
eKSTRAKCJA DO FAZY STAŁEJ spe1 ppt
Ćw 2 - Badanie adhezji fazy ciekłej do fazy stałej 2008, Politechnika Poznańska, Elektrotechnika, I
Ćw 2 - Badanie Adhezji Fazy Ciekłej Do Fazy Stałej, Politechnika Poznańska, Elektrotechnika, Inżynie
SPME mikroekstrakcja do fazy stałej, Chemia Przydatne dla studentów
GESTOŚĆ FAZY STAŁEJ GK, Ogrodnictwo UP Lbn, Gleboznawstwo
gestosc fazy stalej
Ćw 2 ?danie?hezji?zy Ciekłej Do?zy Stałej 11
Ustawa o dopłatach do oprocentowania kredytów mieszkaniowych o stałej stopie procentowej, Ustawy
wyk%u0142ady do ekstrakcji, Synteza cała - egzamin
Aerozol, Aerozol- układ dwu- lub trójfazowy, składający się z gazowej fazy rozpraszającej oraz stałe
Przeciwwskazania do ekstrakcji zębów
Wyznaczanie stosunku molowego ciepła właściwego gazu przy stałym ciśnieniu do molowego ciepła właści
5(3), Proroctwo doktora P˙owicza co do dalszych los˙w Judymowych spe˙ni˙o si˙ o tyle, ˙e istotnie ta
do kola PPT, PPT opracowanie 2ściąga, 1)Fazy rozwoju i życia produktu i miejsce procesu technologicz
do kola PPT, PPT opracowanie 2ściąga, 1)Fazy rozwoju i życia produktu i miejsce procesu technologicz

więcej podobnych podstron