INŻYNIERIA
BIOPROCESOWA
PODSTAWOWE DEFINICJE
INŻYNIERIA
Inżynieria
– działalność polegająca na:
projektowaniu,
konstrukcji,
modyfikacji
i utrzymaniu efektywnych kosztowo rozwiązań dla
praktycznych problemów,
z wykorzystaniem wiedzy naukowej oraz technicznej.
Działalność ta wymaga rozwiązywania problemów
różnej natury oraz skali. Bardziej ogólnie, inżynieria
zajmuje się też rozwojem technologii.
Technologia
– metoda przygotowania i prowadzenia
procesu wytworzenia lub przetwarzania jakiegoś
dobra.
Bioproces
Bioproces-
proces biotechnologiczny, w
którym używa się:
organizmów,
fragmentów komórek (np.
chloroplastów, kwasów
dezoksyrybonukleinowych i
rybonukleinowych itp.)
oraz ich metabolitów (szczególnie
enzymów, przeciwciał)
Cel procesów
biotechnologicznych
Celem procesów biotechnologicznych jest:
nagromadzenie biomasy mikroorganizmów
(produkcja drożdży piekarniczych, paszowych,
wytworzenie dużej ilości osadów organicznych do
oczyszczania ścieków)
otrzymanie odpowiedniej ilości metabolitu
wytwarzanego przez namnażanie drobnoustrojów,
komórek czy tkanek (produkcja kwasów
organicznych, enzymów, antybiotyków, alkoholi)
przemiana składników pożywki - substratu,
utlenianie, redukcja, destrukcja, eliminacja
składników szkodliwych biologicznie w wyniku
biokonwersii i kometabolizmu
Cel procesów
biotechnologicznych
Biomasa
mieszanina substancji pochodzenia
biologicznego np. hodowla mikroorganizmów lub
komórek i produkty jej metabolizmu.
Biokonwersja
- przemiany chemiczne jednych związków
organicznych w drugie, zachodzące w obecności
biokatalizatorów
Kometabolizm
- Niezależne współdziałanie dwóch
organizmów, polegające na tym, że jeden z nich
przypadkowo modyfikuje daną cząsteczkę nie
odnosząc przy tym żadnych korzyści.
Rodzaje
bioprocesów
Rodzaje bioprocesów
Biosynteza
Biotransformacja
Biohydroliza
Bioługowanie
Biodegradacja
Fermentacja
Rodzaje bioprocesów
Biosynteza
Biosynteza
- wieloetapowy proces,
tworzenia się złożonych związków
organicznych ze związków prostych.
Biosynteza
zachodzi w żywych
organizmach pod wpływem enzymów i
podlega bardzo ścisłej regulacji np.
biosynteza białek, lipidów.
Biosynteza
- ogół procesów
zachodzących
w organizmach żywych, w wyniku
których powstają związki organiczne.
Biosynteza
jest częścią
anabolizmu
.
Anabolizm
Anabolizm – grupa reakcji chemicznych, w wyniku których
z prostych substratów powstają związki złożone,
gromadzące energię. Jest to ta część metabolizmu, która
związana jest ze wzrostem tkanek organizmu.
Często procesy metaboliczne dzieli się na:
anaboliczne (wzrostowe)
i kataboliczne (związane z rozkładem i zanikaniem materii
organicznej).
Do reakcji anabolicznych zalicza się biosyntezę:
białek, tłuszczów i węglowodanów (przykładem może
być proces asymilacji CO2 w przebiegu fotosyntezy lub
chemosyntezy).
Anabolizm
Anabolizm to reakcje syntez związków bardziej złożonych z
prostszych, wymagające dostarczenia energii. Energia ta
umożliwia podniesienie poziomu energetycznego związków
w czasie procesu chemicznego. Powstający w ten sposób
produkt reakcji zawiera większą ilość energii, niż substraty.
Dostarczona energia zostaje zmagazynowana w postaci
wiązań chemicznych.
Procesy anaboliczne prowadzą do tworzenia i wzrostu
organów i tkanek, są więc związane z ogólnym wzrostem
masy i rozmiarów ciała.
Rodzaje bioprocesów
B
iotransformacja
Biotransformacja
- proces biotechnologiczny, w którym
czynnik biologiczny wykorzystywany jest do
przeprowadzenia ściśle określonej przemiany chemicznej dzięki
swej
specyficzności reakcyjnej, substratowej lub
stereochemicznej
(np. otrzymywanie kwasu octowego, konwersja glukozy do
fruktozy)
Biotransformacje
- katalizowane przez enzymy reakcje
chemiczne, w których następuje przekształcenie określonego
(nych) fragmentu (ów) substratu.
Biotransformacje
u mikroorganizmów można porównać do
"biokatalizatorów", które przeprowadzają przemiany
prowadzące do otrzymania pożądanego produktu. Są to
procesy wykorzystujące najczęściej tylko jeden enzym i nie
dostarczają komórce energii ani potrzebnych związków.
Rodzaje bioprocesów
Biotransformacja
Biotransformacje
zachodzą też w formach
przetrwalnikowych mikroorganizmów dzięki braku
zaangażowania jakichkolwiek
szlaków
metabolicznych
w proces.
Jednym z ważniejszych problemów
przy
stosowaniu biotransformacji jest występujące
ograniczenie przepuszczalności substratów i
produktów przez błony cytoplazmatyczne lub też
wydzielenie odpowiedniego enzymu z komórki.
Dlatego też opracowane specyficzne sposoby
postępowania zależą od charakteru mikroorganizmu.
Rodzaje bioprocesów
Biotransformacja
Szlak
metaboliczny
Szlak metaboliczny
– szereg następujących po sobie
reakcji biochemicznych, w których produkt jednej reakcji jest
substratem kolejnej. Reakcje szlaków są zwykle katalizowane
przez enzymy, oraz podlegają ścisłej kontroli. W skali całego
organizmu reakcje metaboliczne regulowane są przez
hormony.
Rodzaje bioprocesów
Biohydroliza
Biohydroliza
- procesy u podstaw których leży
reakcja podwójnej wymiany zachodząca między
wodą a substancją w niej rozpuszczoną (np.
ścinanie mleka, hydroliza laktozy, skrobi,
wytwarzanie soków owocowych)
W chemii organicznej przykładowe reakcje hydrolizy
to hydroliza estrów (dla której reakcją odwrotną
jest estryfikacja), inwersja cukrów, hydrolityczny
rozpad białek lub zmydlanie tłuszczów.
Rodzaje bioprocesów
Bioługowanie
Bioługowanie
( Biozageszczanie) - technika
mikrobiologiczna polegająca na przeprowadzeniu, przy
użyciu bakterii, nierozpuszczalnych soli (np. siarczków) w
sole rozpuszczalne (np. siarczany).
Pozwala na uzyskanie metali z rud ubogich oraz odpadów
przemysłowych.
Otrzymane tą metodą metale mogą być izolowane z
otrzymanych roztworów metodami chemicznymi za pomocą
wymieniaczy jonowych bądź przez ekstrakcję.
Rodzaje bioprocesów
Biodegradacja
Biodegradacja
- biochemiczny rozkład związków
organicznych przez organizmy żywe (bakterie,
grzyby, glony, robaki, pierwotniaki) na prostsze
składniki chemiczne (np. oczyszczanie ścieków,
produkcja biogazów z odpadów i ścieków).
Rodzaje bioprocesów
Fermentacja
Fermentacja
– procesy enzymatyczne stopniowego
rozkładu związków organicznych przebiegające bez udziału
tlenu.
Zachodzi powszechnie w mikroorganizmach, gdzie
fermentują rozmaite związki np. sacharydy, aminokwasy,
związki heterocykliczne.
Końcowymi produktami są różne
kwasy np.: mlekowy, octowy, masłowy
lub alkohole np.: etylowy, butylowy, glicerol.
Zalety procesów
biotechnologicznych
Zalety procesów
biotechnologicznych
- są tanie,
- łatwe do przeprowadzenia,
- nie wymagają skomplikowanej aparatury,
- są oparte na znanych procesach biologicznych,
- materiał do nich jest łatwo dostępny (bakterie,
drożdże, pierwotniaki),
- nie wymagają dużych nakładów energii,
- są nieszkodliwe dla środowiska.
FERMENTACJA
Fermentacja
Fermentacja – proces beztlenowych przemian
enzymatycznych związków chemicznych (przede
wszystkim zawierających
grupę hydroksylową
), których
efektem jest uzyskanie energii, najczęściej pod postacią
ATP
.
Proces umożliwia uzyskanie energii użytecznej
metabolicznie – ATP – w warunkach beztlenowych
organizmom stale lub okresowo żyjącym w warunkach
beztlenowych.
Fermentacje przeprowadzane są przez liczne
drobnoustroje lub wytworzone przez nie
enzymy
.
Niektóre procesy produkcji związków organicznych z
wykorzystaniem mikroorganizmów w biotechnologii
określane są nazwą fermentacja pomimo zachodzenia w
warunkach tlenowych. Przykładem jest fermentacja
octowa przebiegająca z dostępem tlenu.
Fermentacja
Grupa hydroksylowa
-
grupa hydroksylowa, grupa
wodorotlenowa (-OH) – jednowartościowa grupa funkcyjna.
ATP
-
Adenozyno-5'-trifosforan (ATP) – organiczny związek
chemiczny, zbudowany z grupy trójfosforanowej przyłączonej
w pozycji 5' cząsteczki andenozy, tworząc bezwodnik kwasu
fosforowego.
Odgrywa on ważną rolę w biologii komórki, jako
wielofunkcyjny koenzym i molekularna jednostka w
wewnątrzkomórkowym transporcie energii. Stanowi nośnik
energii chemicznej używanej
w metabolizmie komórki. Powstaje jako magazyn energii w
procesach fotosyntezy i oddychania komórkowego.
Zużywają go liczne enzymy, a zgromadzona w nim energia
służy do przeprowadzania różnorodnych procesów, jak
biosyntezy, ruchu i podziału komórki
Fermentacja
Enzymy
wielkocząsteczkowe, w większości białkowe
katalizatory przyspieszające specyficzne reakcje chemiczne
poprzez obniżenie ich energii aktywacji.
Niemal wszystkie reakcje chemiczne związane z
funkcjonowaniem organizmów żywych (a także wirusów)
wymagają współudziału enzymów, by osiągnąć
wystarczającą wydajność.
Enzymy są wysoce specyficzne wobec substratów i wobec
tego dany enzym katalizuje zaledwie kilka reakcji spośród
wielu możliwych dla danych substratów. W ten sposób
enzymy determinują procesy metaboliczne i biochemiczne
związane z funkcjonowaniem organizmów żywych.
Fermentacja alkoholowa
Fermentacja alkoholowa – proces rozkładu
węglowodanów pod wpływem enzymów wytwarzanych
przez drożdże
z wytworzeniem alkoholu etylowego i dwutlenku
węgla:
C
6
H
12
O
6
→ 2C
2
H
5
OH + 2CO
2
W wyniku tego procesu powstaje również szereg
produktów ubocznych, między innymi: gliceryna, kwas
bursztynowy
i kwas octowy.
Produktami ubocznymi fermentacji są również wyższe
alkohole i estry, które mają decydujący wpływ na
bukiet smakowo-zapachowy produktu.
Fermentacja
alkoholowa
Fermentacja alkoholowa jako
proces biochemiczny pozwala
organizmom działającym w
warunkach beztlenowych na
regenerację NAD zużytego w
procesie glikozy. Produkt
ostatniego etapu wspomnianej
glikolizy – pirogronian jest w
dwóch etapach redukowany do
etanolu (alkoholu etylowego) przy
jednoczesnym utlenieniu NADH
powstałego w procesie glikolizy
do NAD i wydzieleniu dwutlenku
węgla.
Fermentacja
alkoholowa
W pierwszym etapie pirogronian
jest przekształcany w etanal
(aldehyd octowy) oraz
dwutlenek węgla za pomocą
dekarboksylazy pirogonianowej.
W drugim etapie etanal jest
redukowany do etanolu
(z jednoczesnym utlenieniem
NADH do NAD) przez
dehydrogenazę alkoholową
(ADH).
Fermentacja alkoholowa
NAD -
Dinukleotyd nikotynoamidoadeninowy
(NADH - forma zredukowana, NAD+ - forma utleniona) –
organiczny związek chemiczny pełniący istotną rolę w
procesach oddychania komórkowego.
Dinukleotyd nikotynoamidoadeninowy nie występuje w
zasadzie w organizmach żywych w stanie wolnym, lecz
występuje w postaci jonów (NAD+ i NADP+) oraz w formie
zredukowanej (NADH i NADPH).
NAD+
– forma utleniona dinukleotydu
NADP+
– kation fosforanowy dinukleotydu
NADH
– forma zredukowana NAD+
NADPH
– forma zredukowana NADP+
Fermentacja alkoholowa
Glikoza - ciąg reakcji biochemicznych, podczas których jedna
cząsteczka glukozy zostaje przekształcona w dwie cząsteczki
pirogronianu.
Dehydrogenaza
alkoholowa – enzym z
grupy oksydoreduktaz
przyspieszający
przekształcanie się
aldehydu octowego w
etanol lub odwrotnie.
Pirogronia
n
Pirogronian - Kwas
pirogronowy (kwas 2-
oksopropanowy),
CH
3
-CO-COOH
– organiczny związek
chemiczny.
Fermentacja alkoholowa
Drożdże górnej fermentacji
Drożdże górnej fermentacji:
np. Saccharomyces
cerevisiae
.
Szczepy drożdży z gatunku
Saccharomyces
cerevisiae
wykorzystywane w piwowarstwie do
warzenia piw pszenicznych, angielskich,
niektórych belgijskich i.in.
Saccharomyces
cerevisiae
drożdże
fermentacji górnej fermentują w
temperaturach wyższych 15-25 °C, a w
trakcie fazy burzliwej fermentacji
zbierają się na powierzchni brzeczki.
Z czasem również drożdże górnej
fermentacji osadzają się na dnie,
jednakże w browarach posiadających
kadzie otwarte zbierane są one z
powierzchni zanim opadną na dno.
Saccharomyces
cerevisiae
Drożdże dolnej fermentacji
(Saccharomyces
carlsbergensis
,
Saccharomyces
pastorianus
)
- szczep
drożdży piwowarskich stosowanych w celu
przeprowadzenia dolnej fermentacji
brzeczki piwnej i otrzymania piw typu lager.
Charakterystyczną cechą tych drożdży jest
ich zdolność do fermentacji w
temperaturze 5-10 °C i osadzanie się pod
koniec procesu na dnie fermentora.
Fermentacja alkoholowa
Drożdże dolnej fermentacji
Saccharomyces
carlsbergensis
Nazwa drożdży dolnej fermentacji jest hołdem złożonym Emilowi
Christianowi Hansenowi - synowi założyciela browaru Carlsberg w
Kopenhadze.
W 1883 r. rozwijając badania Ludwika Pasteura’ udało mu się w
laboratorium browaru wyhodować czystą kulturę drożdży
stanowiących podstawę piw dolnej fermentacji.
Fermentacja alkoholowa
Drożdże
(Saccharomyces)
Drożdże (Saccharomyces) - to rodzaj
grzybów jednokomórkowych z klasy
workowców, rozmnażające się głównie
przez pączkowanie (tworząc kolonie),
rzadziej przez zarodniki (drożdże
zarodnikujące).
Są organizmami saprofitycznymi - żyją
na podłożach zawierających cukry
proste, przeprowadzają fermentację
alkoholową, przeważnie w warunkach
beztlenowych.
Dobrze poznano ok. 30 gatunków
drożdży,
z dużą liczbą odmian.