Normy (wartości
referencyjne)
• populacja referencyjna
• próba referencyjna
• wartości referencyjne
• rozkład referencyjny
• wartości referencyjne (normy)
Błąd przedlaboratoryjny
• złe przygotowanie
• interferencja leków
• zła technika pobrania krwi
• użycie niewłaściwego antykoagulantu
• hemoliza
• opóźnione oddzielenie osocza
• przechowywanie próbki
Materiał pobierany do
badań
• Krew
– krew pełna
– osocze
– surowica
• Mocz
• Płyn mózgowo-rdzeniowy
• Płyn wysiękowy
• Płyn przesiękowy
Materiał pobierany do
badań
• Krew
– krew pełna
• antykoagulanty: sole heparyny, wersenian potasowy,
cytrynian sodowy lub potasowy, szczawian sodu
fluorek sodu
– krew pełna - badania hematologiczne, hematokryt, OB,
gazometria
– krew pełna włośniczkowa – kontrola glikemii, czasami
morfologia krwi, bilirubina u noworodków
– Krew pełna włośniczkowa arterializowana - gazometria,
elektrolity
– krew tętnicza – gazometria
– osocze – płyn po usunięciu elementów komórkowych z
krwi pełnej - jonogram
– surowica – po oddzieleniu skrzepu krwi pełnej od
pozostałej fazy płynnej – RA (mocznik, kreatynina,
enzymy, itd.)
Krew - błędy
• niewłaściwy antykoagulant – wersenian
potasowy przy oznaczaniu jonów potasu
• Nadmierne rozcieńczenie
antykoagulantem
• Złe wymieszanie z antykoagulantem
• Hemoliza (K
+
, enzymy)
• Błąd stazy – zagęszczenie krwi –
zwiększenie hematokrytu, stężenia białka,
lipidów
Mocz
• Rodzaj badania
– Badanie ogólne moczu
– Dobowa zbiórka moczu (białkomocz, wydalanie elektrolitów
z moczem, badania hormonalne: katecholaminy)
– Badania bakteriologiczne
• Wysiłek fizyczny
• Zmiany ortostatyczne
• Menstruacja
• Typy próbek:
– Pierwsza poranna próbka moczu
– Druga poranna próbka moczu
– Próbka przypadkowa
• Uzyskanie próbki:
– Droga mikcji – środkowy strumień
– cewnik Foleya
– punkcja pęcherza
– urostomia
Materiał pobierany do
badań
• Morfologia – krew żylna – wersenian potasowy
(EDTA/K
2
)
• OB – krew żylna – 3.8% cytrynian sodowy
• Jony potasu – surowica (krew żylna na skrzep) lub
osocze – sól litowa heparyny – hemoliza!
• Jony sodu surowica (krew żylna na skrzep) lub
osocze – sól litowa heparyny
• Mocznik, kreatynina, AST, ALT, bilirubina,
lipidogram, ALP, GGT – surowica (krew pełna na
skrzep)
• Parametry układu krzepnięcia – cytrynian sodu
• Gazometria – krew pełna tętnicza lub żylna
arterializowana – sól litowa heparyny
PMR
•
Wygląd
–
Bezbarwny, przejrzysty
–
żółtawe zabarwienie – ksantochromia - krwotok do
przestrzeni płynowych (krwotok podpajęczynówkowy)
–
Zmętnienie – wzrost ilości komórek
–
Krwisty płyn – ksantochromia, próba benzydynowa
dodatnia; „skrwawienie” płynu podczas punkcji
•
Badanie cytologiczne
–
Określenie liczby komórek – cytoza
–
Identyfikacja komórek – cytogram
•
Badania biochemiczne:
–
Białko, glukoza, chlorki
•
Przeciwwskazania do punkcji lędźwiowej:
–
małopłytkowość, zmiany skórne, nadciśnienie
śródczaszkowe
Płyny z jam ciała
• Przesięki (transsudatum)
– Ciśnienie hydrostatyczne, onkotyczne
• Wysięki (exsudatum)
– Nienowotworowe (zapalne)
– Nowotworowe
Przygotowanie pacjenta –
czynniki wpływające na
wynik
• Dieta, tryb życia, czas od ostatniego posiłku –
mocznik, kreatynina, jony potasowe, glukoza, OB,
leukocytoza
• Cykl miesiączkowy- leukozytoza, hematokryt, OB,
hormony płciowe
• Pora dnia – sterydy kory nadnerczy
• Zmiana pory aktywności z dnia na noc, zmiana
stref czasowych
• Alkohol – zwiększa GGT i zmniejsza MCV
• Wysiłek fizyczny – glukoza, lipidy, ekstremalny
wysiłek: zwiększa białko, kreatyninę, CK, AST, LDH
Błędy pomiaru
• przypadkowy
• systematyczny
• omyłka (błąd trywialny)
Błąd przypadkowy
• różnica pomiędzy kolejnymi badaniami –
precyzja metody
• czynniki losowe
• odchylenie standardowe SD
• 144; 138; 148; 150; 140; 132 SD ?
• 145; 144; 144; 145.5; 145; 145
SD ?
• współczynnik zmienności (CV) precyzja
w stosunku do wartości zmierzonej
1
-
N
)
X
(
2
i
X
%
100
x
X
SD
Błąd
systematyczny
• dokładność metody
• różnica średniej z wartości mierzonych i
wartości prawdziwej
• Wartość rzeczywista 140 mmol/l
• metoda 1 139.5 mmol/l
• metoda 2 145 mmol/l
Błąd
trywialny
• odstępstwo od poprawnej procedury
analitycznej
– kontaminacja próbki (badanie moczu)
• dotyczy pojedynczych próbek
• są trudne do kontroli i oceny
Błędy laboratoryjne
Jaka jest błąd przypadkowy i
Jaka jest błąd przypadkowy i
systematyczny?
systematyczny?
[Ca]
[Ca]
Wartośc
Wartośc
rzeczywista
rzeczywista
Błąd systematyczny
• metody definitywne -
wyspecjalizowane i kosztowne, najbliżej
wartości rzeczywistej
• metody referencyjne - służą do oceny
metod rutynowych
• metody rutynowe - uwzględniają
wymogi praktycznej dostępności
Kontrola jakości badań
laboratoryjnych
• Kontrola precyzji – zgodność wyników
przy wielokrotnym oznaczaniu stężenia
substancji w tej samej próbce
– Materiał kontrolny niemianowany (surowica
bydlęca, ludzka
– Powtarzalność
– Odtwarzalność
• Kontrola dokładności – porównanie
wyniku ze wzorcem
– Komitet Jakości Miar i Wag – procedury
definitywne
Czułośc analityczna
• Najmniejsza ilość badanej
substancji, która może być
miarodajnie oznaczona za pomocą
metody
Swoistośc analityczna
• Zdolność metody do wybiórczego
oznaczania tylko wybranej
substancji
Czułość testu
• Zdolność do wykrywania prawdziwie
chorych
• PD/(PD+FU)
Swoistość testu
• Zdolność do wykrywania prawdziwie
zdrowych
• PU/(PU+FD)
•
czerwony - dodatni
czerwony - dodatni
,
, zielony - ujemny
zielony - ujemny
•
chory, zdrowy
chory, zdrowy
Czułość i swoistość
Czułość i swoistość
Punkt odcięcia
Punkt odcięcia
•
czerwony - dodatni
czerwony - dodatni
,
, zielony - ujemny
zielony - ujemny
•
chorzy, zdrowi
chorzy, zdrowi
Czułość i swoistość
Czułość i swoistość
Punkt odcięcia
Punkt odcięcia
•
czerwony - dodatni
czerwony - dodatni
,
, zielony - ujemny
zielony - ujemny
•
chorzy, zdrowi
chorzy, zdrowi
Czułość i swoistość
Czułość i swoistość
Punkt odcięcia
Punkt odcięcia
ROC
Zdolność rozpoznawania i
wykluczania – wartości
predykcyjne
• Dodatnia wartość predykcyjna (PV)
PD/(PD+FD)
• Ujemna wartość predykcyjna (NPV)
PU/(PU+FU)
PV - przykład
• Oznaczanie CK w podejrzeniu zawału serca
– czułość 70%
– swoistość 80%
• Częstość zawału w grupie 40%
CK u 28 pacjentów z zawałem (70% z 40)-> PD
CK u 12 pacjentów bez zawału (20% z 60)-> FD
– 28/(28+12)=0,7 [PD/(PD+FD)]
• Częstość zawału w grupie 20%
CK u 14 pacjentów z zawałem (70% z 20)-> PD
CK u 16 pacjentów bez zawału (20% z 80)-> FD
– 14/(14+16)=0,47 (co drugi chory z CK ma zawał)
NPV - przykład
• Oznaczanie CK w podejrzeniu zawału serca
– czułość 70%
– swoistość 80%
• Częstość zawału w grupie 40%
CK u 48 pacjentów bez zawału (80% z 60)-> PU
CK u 12 pacjentów z zawałem (30% z 40)-> FU
– 48/(48+12)=0,80 [PU/(PU+FU)]
• Częstość zawału w grupie 20%
CK u 64 pacjentów bez zawału (80% z 80)-> PU
CK u 12 pacjentów z zawałem (30% z 20)-> FU
– 64/(64+12)=0,84 [PU/(PU+FU)]