Izolacja kwasów
nukleionocy
Izolacja kwasów
nukleionocy
Fizykochemiczna charakterystyka
lipidów (rozpuszczalność)
• Zróżnicowana grupa substancji, które w
wodzie rozpuszczają się słabo, albo nie
rozpuszczają w ogóle.
• Ekstrahują się rozpuszczalnikami
organicznymi (eterem, benzenem,
chloroformem).
Fizykochemiczna charakterystyka
lipidów (właściwości amfofilowe)
Cząsteczki lipidów są apolarne, co
wynika z nagromadzenia dużej liczby
grup –CH
2
-.
Oprócz łańcuchów węglowych w
cząsteczkach lipidów występują grupy
polarne lub jonowe (np. estrowe,
fosforanowe, aminowe, hydroksylowe i
in.).
Fizykochemiczna charakterystyka
lipidów (właściwości amfofilowe)
a
b
1.
a b
a
b
2.
3.
1. Lecytyna, 2. Cholesterol, 3. Schemat cząsteczki amfofilowej;
a. Część hydrofilowa, b. Część hydrofobowa
N
+
CH
3
CH
3
C
H
2
C
H
3
C
H
2
O P
OH
O
O CH
2
C
H
C
H
2
O CO
O CO rodnik weglowodorowy
rodnik weglowodorowy
O
H
Fizykochemiczna charakterystyka
lipidów (aktywność
powierzchniowa)
Woda
Ole
j
Ole
j
Woda
Lipidy jako składniki błon
biologicznych
Lipidy - funkcje biologiczne
Środowisko wodne (np.
cytoplazma, płyn śródtkankowy i
in.)
Środowisko wodne
Podwójna błona lipidowa jest stabilnym
termodynamicznie układem stanowiącym barierę
dla większości substancji wymienianych między
oddzielonymi błoną przedziałami
Lipidy występujące najczęściej w
błonach biologicznych:
Fosfolipidy (uniwersalny składnik
błon),
Glikolipidy (w chloroplastach),
Cholesterol (w komórkach
Eucariota),
Karotenoidy (w chloroplastach, w
komórkach siatkówki oka).
Izolacja DNA
• Etapy
– Liza błon
komórkowych i
denaturacja białek)
– Wiązanie DNA z
złożem
krzemionkowym
– Przemywanie
– Elucja (wymywanie
cząsteczek DNA)
Cele izolacji DNA
• Badania kliniczne
(ludzie,
mikroorganizmy)
• Badania kryminalistyczne
(ludzie)
• Ustalanie tożsamości
(ludzie, rośliny,
mikroorganizmy)
• Transformacje genetyczne
(zwierzęta, rośliny, mikroorganizmy)
• Badania genów i genomów genomów
(ludzie, rośliny, zwierzęta,
mikroorganizmy)