Mikro Klimek-Ochab, ĆWICZENIE 3- Techniki posiewów, ĆWICZENIE 3: Techniki posiewów


ĆWICZENIE 2: Techniki posiewów

  1. Wylewanie płytek i skosów agarowych.

Materiały: agar odżywczy w kolbkach, jałowe szalki Petriego, probówki i pipety

    1. Przygotowanie skosu mikrobiologicznego (2 na parę):

Do umieszczonych w statywie dwóch probówek odmierzyć (sterylnie!) po 5 ml płynnego agaru odżywczego. Probówki ułożyć na stole skośnie- opierając górną część na pipecie (1ml).

Pozostawić do całkowitego zestalenia agaru.

    1. Przygotowanie płytek Petriego z podłożem agarowym ( 2 na parę):

Na dolną część płytki, z zachowaniem sterylności, wylać ok. 20ml płynnego agaru odżywczego (unikać zbytniego napowietrzenia, dno całkowicie przykryte). Płynnym, kolistym ruchem przesunąć płytkę po stole w celu równomiernego rozmieszczenia agaru. W przypadku powstania pęcherzyków gazu, płytkę należy delikatnie przesunąć nad płomieniem palnika.

Pozostawić do zestalenia agaru.

  1. Techniki posiewów

Materiały: sterylny agar, bakteryjna hodowla płynna, płytki i skosy agarowe przygotowane w poprzednim ćwiczeniu, płytki z agarem odżywczym ( 4 na parę).

    1. Posiew ezą na płytkę.

Pobrać (sterylnie) ezą hodowlę bulionową danego szczepu i rozprowadzić ją na powierzchni płytki agarowej zgodnie z rysunkiem.

0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
I krok0x01 graphic
II krok 0x01 graphic

Ezę należy prowadzić bardzo delikatnie by nie porysować agaru!

    1. Posiew na skos

Pobrać analogicznie jak w pkt a hodowlę płynną i rozprowadzić ruchem zygzakowatym po skośnej płaszczyźnie agaru. Pamiętać o zachowaniu sterylnych warunków pracy.

0x08 graphic
0x01 graphic

    1. Posiew głaszczką

Pobrać jałową pipetą 0,1 ml przygotowanej hodowli płynnej i przenieść na powierzchnię płytki z pożywką agarową. Naniesiony płyn rozprowadzić po powierzchni płytki za pomocą głaszczki szklanej wysterylizowanej uprzednio przez zanurzenie w alkoholu i przepalenie w płomieniu palnika. Przestrzegać zasad sterylnej pracy!

    1. Posiew redukcyjny

Pobrać ezą hodowlę płynną danego szczepu bakteryjnego i rozprowadzić na połowie płytki agarowej (rys.1). Przepalić ezę w płomieniu palnika i ostudzić dotykając niezasianej części agaru lub wewnętrznej ścianki płytki. Płytkę przekręcić o 90º i ponownie prowadzić ezę po powierzchni agaru zbierając punktowo materiał bakteryjny z dolnej linii poprzedniego posiewu (rys.2). Ponownie przepalić ezę i po ostudzeniu powtórzyć całą operację prowadząc ezę po ostatniej ćwiartce płytki (rys.3).

0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
0x08 graphic
Rys.10x01 graphic
rys.20x01 graphic
rys.3 0x01 graphic

Płytki i skosy inkubować 7 dni w odpowiedniej temperaturze. Płytki inkubować w pozycji odwróconej z uwagi na gromadzące się krople wody.



Wyszukiwarka