pobieranie i konserwacja nasienia psa w temp dodatnich
WETERYNARIA WETERYNARIA ANDROLOGIA W PRAKTYCE W PRAKTYCE WiesÅ‚aw Bielas, Marta Siemieniuch Katedra i Klinika Rozrodu, Chorób Przeżuwaczy i Ochrony Zdrowia ZwierzÄ…t, WydziaÅ‚ Medycyny Weterynaryjnej Akademii Rolniczej we WrocÅ‚awiu Z uwagi na znaczny wzrost liczebnoÅ›ci cennych pod wzglÄ™dem genetycznym i eko- nomicznym psów rasowych wzrasta również zainteresowanie hodowców oraz lekarzy weterynarii zagadnieniami zwiÄ…zanymi z rozrodem i andrologiÄ… u tych zwierzÄ…t. Szcze- gólne zainteresowanie budzi problematyka zwiÄ…zana z optymalnym wykorzystaniem potencjaÅ‚u genetycznego wartoÅ›ciowych psów reproduktorów dziÄ™ki konserwacji nasienia i sztucznej inseminacji suk nasieniem Å›wieżym, pÅ‚ynnym i konserwowanym w niskich temperaturach. Pobieranie i konserwacja nasienia psa w temperaturach dodatnich stawów czy koÅ›ci) u wartoÅ›ciowego pod Sposób pobierania nasienia metodÄ… POBIERANIE NASIENIA wzglÄ™dem genotypowym i fenotypowym manualnej manipulacji (masturbacji) OD PSÓW psa idealnym wyjÅ›ciem pozostaje po- Do pobrania ejakulatu od psa należy IstniejÄ… trzy podstawowe metody po- branie jego ejakulatu/ów w celu dalszej wybrać miejsce zapewniajÄ…ce komfor- bierania nasienia od psów: metoda ma- reprodukcji. Ponadto pobranie nasienia towe i spokojne warunki, bez Å›liskiej nualna, przy pomocy sztucznej pochwy wskazane jest wtedy, kiedy kopulacja podÅ‚ogi i bez Å›wiadków , ponieważ oraz elektroejakulacja. nie może dojść do skutku, np. z powodu zwierzÄ™ta pÅ‚ochliwe i nerwowe mogÄ… Najprostszym i godnym polecenia spo- zbyt bujnego owÅ‚osienia wokół sromu siÄ™ zablokować w Å›rodowisku haÅ‚aÅ›li- sobem pobierania nasienia od psa jest lub z powodu Å‚Ä…cznotkankowych zrostów wym, ruchliwym i nie oddać nasienia. metoda manualnej manipulacji lub ina- w pochwie samicy. Pobieranie nasienia Idealnym rozwiÄ…zaniem jest obecność czej masturbacji, polegajÄ…ca na masażu do celów sztucznej inseminacji pozwala suki przejawiajÄ…cej objawy rujowe, co żoÅ‚Ä™dzi prÄ…cia (glans penis), (1,2,5,8,11). w dużej mierze wyeliminować schorzenia nie tylko stymuluje psa do aktywnoÅ›ci Pobieranie nasienia od psa jest jed- weneryczne psów przenoszone drogÄ… seksualnej, ale również podnosi wskaz- nym z elementów klinicznego badania krycia, takie jak np. bruceloza czy guzy niki jakoÅ›ci pobieranego nasienia (fot. 1). narzÄ…du rozrodczego psa, obok oglÄ™dzin, Stückera. Wreszcie, dziÄ™ki pobieraniu Okazuje siÄ™, że odruch tolerancji prze- omacywania, testometrii i USG (6). i konserwacji nasienia psa możliwe jest jawiany przez samicÄ™ pobudza samca Jednym z zasadniczych powodów pobie- przesyÅ‚anie nasienia na duże odlegÅ‚oÅ›ci do oddania nasienia. W przypadku gdy rania nasienia od psa jest sztuczna insemi- w kraju i za granicÄ… oraz inseminacja sa- nie ma w pobliżu suki z cieczkÄ…, można nacja suki, której z różnych powodów nie micy przy jednoczesnym wyeliminowaniu podsunąć samcowi pod nos rozmro- można unasiennić w sposób naturalny. dÅ‚ugotrwaÅ‚ej kwarantanny zwierzÄ…t. żonÄ… wymazówkÄ™, która sÅ‚użyÅ‚a wcze- W takim przypadku powinna również nastÄ…pić ocena jakoÅ›ci ejakulatu w celu zakwalifikowania nasienia do sztucznej in- seminacji suk(i) nasieniem Å›wieżym nieroz- rzedzonym lub konserwowanym w stanie pÅ‚ynnym i w niskich temperaturach (6). U suk rasowych bÄ™dÄ…cych w cieczce czÄ™sto można spotkać siÄ™ z awersjÄ… do wybranego partnera, co jest zachowa- niem atawistycznym, odziedziczonym w spadku po dzikich przodkach psa do- mowego canis familiaris. U niektórych ras, np. dogów, bernardynów, doberma- nów, chow chow, mastiffów, bassetów, wodoÅ‚azów wystÄ™puje niejednokrotnie znaczny dymorfizm pÅ‚ciowy i unasien- nianie naturalne jest zupeÅ‚nie wykluczo- ne. Problem rodzi siÄ™ także, gdy mÅ‚oda suka nie pozwala na kopulacjÄ™ lub sa- miec jest niedoÅ›wiadczony. W tym przy- padku także najlepszym rozwiÄ…zaniem pozostaje pobranie nasienia i sztuczna inseminacja. W przypadku nabytych za- burzeÅ„ aparatu ruchu (wiÄ™zadeÅ‚, mięśni, Fot. 1. WRZESIEC-PAyDZIERNIK " 5/2004 50 WETERYNARIA WETERYNARIA ANDROLOGIA W PRAKTYCE W PRAKTYCE runkach domowych, można posÅ‚użyć siÄ™ zwykÅ‚Ä… strzykawkÄ… 20 ml z wyjÄ™tym tÅ‚oczkiem, maÅ‚ym palcem zamykajÄ…c jej dolny otwór. Po wysuniÄ™ciu prÄ…cia z worka naplet- kowego, w czasie trwania ruchów fryk- cyjnych prÄ…cia, dochodzi do wytrysku pierwszej frakcji nasienia. JeÅ›li w tym czasie zwierzÄ™ wykonuje bardzo gwaÅ‚- towne ruchy kopulacyjne, wskazana jest szczególna uwaga i ostrożność, ponieważ podstawianie np. lejka szklanego może doprowadzić do urazu prÄ…cia. Przed ejakulacjÄ… zasadniczej drugiej biaÅ‚ej frakcji nasienia pies zaprzestaje wykonywania ruchów frykcyjnych. Tuż przed, w trakcie, lub bezpoÅ›rednio po oddaniu drugiej frakcji nasienia, pies zdradza pragnienie wykonania obrotu Fot. 2. do tyÅ‚u, co manifestuje siÄ™ unosze- Å›niej do pobierania wymazu z pochwy furii psa, delikatnie obejmujÄ…c prÄ…cie. suki bÄ™dÄ…cej w cieczce. W momencie U psów spokojniejszych można w tym przeprowadzania zabiegu suka prowo- czasie zaobserwować brak ruchów kopu- katorka powinna być tak okieÅ‚znana, lacyjnych z jednoczesnym bezwiednym aby samiec mógÅ‚ obwÄ…chiwać jej srom, oddawaniem nasienia. i dziÄ™ki temu nie przejawiać skÅ‚onnoÅ›ci W momencie, kiedy opuszka żoÅ‚Ä™dzi do przysiadania na zadzie. Efektywność prÄ…cia zaczyna ulegać wzwodowi, należy postÄ™powania majÄ…cego na celu uzy- niezwÅ‚ocznie wysunąć caÅ‚e prÄ…cie z wor- skanie peÅ‚nowartoÅ›ciowego ejakulatu ka napletkowego i ponownie uchwycić zależy w głównej mierze od samego re- prÄ…cie za opuszkÄ™. CzÄ™sto trudno jest produktora, a przede wszystkim od jego zdecydować, w którym momencie należy wieku, doÅ›wiadczenia, temperamentu wysunąć prÄ…cie z worka napletkowego. i charakteru popÄ™du pÅ‚ciowego. Oka- JeÅ›li pies siÄ™ opiera przed oddaniem zuje siÄ™, że od wiÄ™kszoÅ›ci starszych, nasienia i nie współpracuje w momencie doÅ›wiadczonych samców w zasadzie masażu prÄ…cia, przedwczesne wydoby- można bez wiÄ™kszego problemu pobrać cie prÄ…cia na zewnÄ…trz powoduje zanik nasienie metodÄ… manualnÄ… bez obecno- wzwodu i caÅ‚Ä… procedurÄ™ po pewnym Å›ci suki prowokatorki, czego nie można czasie należy rozpoczynać od poczÄ…tku. powiedzieć o osobnikach mÅ‚odych lub Odwrotnie, jeÅ›li opuszka żoÅ‚Ä™dzi prÄ…cia nerwowych, które mogÄ… być kompletnie ulega szybko erekcji (co obserwuje siÄ™ zablokowane lub niezainteresowane u psów doÅ›wiadczonych), caÅ‚kowite wy- oddaniem nasienia. W takim przypadku suniÄ™cie może okazać siÄ™ już niemożliwe należy uzbroić siÄ™ w cierpliwość, stoso- do przeprowadzenia z powodu ograniczo- wać różne formy obÅ‚askawiania, nie stre- nej do pewnego stopnia zdolnoÅ›ci do roz- sować dodatkowo zwierzÄ…t niespokojnym szerzania siÄ™ ujÅ›cia worka napletkowego Fot. 3. postÄ™powaniem (5,8,11). ostium praeputiale. W tym przypadku Osoba przystÄ™pujÄ…ca do pobrania pobieranie nasienia powinno być prze- nasienia od psa prawÄ… rÄ™kÄ… powinna rwane, ponieważ worek napletkowy nie uklÄ™knąć po prawej stronie psa i objąć może rozciÄ…gnąć siÄ™ wystarczajÄ…co i nie dÅ‚oniÄ…, pomiÄ™dzy kciukiem i palcem zezwoli na peÅ‚ny wzwód opuszki żoÅ‚Ä™dzi wskazujÄ…cym pars longa glandis przez prÄ…cia, powodujÄ…c reakcjÄ™ bólowÄ…. Kie- napletek (fot. 2). U niektórych psów już dy wzwód prÄ…cia opadnie, można dalej samo to postÄ™powanie powoduje częścio- próbować masować prÄ…cie przez worek wÄ… erekcjÄ™ opuszki żoÅ‚Ä™dzi prÄ…cia (bulbus napletkowy, ale może to siÄ™ okazać glandis). JeÅ›li ten chwyt nie przynosi niemożliwe do zrealizowania z powodu pożądanego rezultatu, konieczny jest fizycznego i psychicznego urazu zwie- dalszy ciÄ…gÅ‚y masaż żoÅ‚Ä™dzi prÄ…cia tam rzÄ™cia. Czasami można pobrać nasienie i z powrotem masaż prÄ…cia powinien do zbiorniczka pod brzuchem psa, jeÅ›li przypominać ruchy kopulacyjne (1,8). prÄ…cie nie zdąży siÄ™ wysunąć z naplet- U psów ostrych, z żywym temperamen- ka. Nasienie należy pobierać do dwóch tem, poczÄ…tkowy wzwód opuszki prÄ…cia probówek lub zbiorniczków na nasienie poÅ‚Ä…czony jest z gwaÅ‚townymi ruchami buhaja z pÅ‚aszczem wodnym, o tempera- kopulacyjnymi. Z wÅ‚asnego doÅ›wiad- turze 38oC, przez lejki szklane, gumowe czenia wynika, iż najlepiej jest w takim lub plastikowe (fot. 3). W skrajnym momencie spokojnie wytrzymać napad przypadku, pobierajÄ…c nasienie w wa- Fot. 4. WRZESIEC-PAyDZIERNIK " 5/2004 51 WETERYNARIA ANDROLOGIA W PRAKTYCE niem jednej z tylnych z reguÅ‚y wykluczajÄ… dalszy wytrysk koÅ„czyn i usiÅ‚owaniem drugiej frakcji, bogatej w plemniki lub przeÅ‚ożenia jej przez trzeciej frakcji ponasiennej. JeÅ›li po- rÄ™kÄ™ osoby pobierajÄ…cej bieraniu frakcji nasiennej towarzyszyć nasienie (fot. 4). W tym bÄ™dÄ… haÅ‚as i niezdrowe zainteresowanie przypadku asystent po- osób postronnych, pies może oddawać winien objąć koÅ„czynÄ™ jasny pÅ‚yn bez plemników, w zasadzie i postawić z powrotem na koÅ„czÄ…c ejakulacjÄ™ frakcji bogatej swoim miejscu (przed dÅ‚o- w gamety. niÄ… osoby pobierajÄ…cej). Po pobraniu nasienia wzwód może W tym samym czasie oso- utrzymywać siÄ™ nawet przez dÅ‚uższy ba pobierajÄ…ca nasienie czas, dlatego zaleca siÄ™, aby pozwolić powinna zgiąć i odchylić zwierzÄ™ciu na oblizywanie prÄ…cia w celu prÄ…cie do doÅ‚u i do tyÅ‚u, szybszego ustÄ…pienia erekcji. DziÄ™ki w ten sposób, aby zna- temu prÄ…cie szybciej powróci do pierwot- lazÅ‚o siÄ™ ono wyciÄ…gniÄ™te nych wymiarów i wsunie siÄ™ Å‚atwiej na pomiÄ™dzy koÅ„czynami swoje miejsce bez niezbyt komfortowej tylnymi, z jednoczesnym dla psa i wymagajÄ…cej korekcji inwersji zezwoleniem na obrót bÅ‚ony Å›luzowej worka napletkowego. prÄ…cia tak, że powierzch- Pobieranie nasienia od psów maÅ‚ych nia górna pozostaje dor- ras jest utrudnione z powodu niewielkiej salnie (fot. 5). Ejakulacja przestrzeni, jaka pozostaje na manipu- drugiej frakcji nasienia lacjÄ™ przy prÄ…ciu zwierzÄ™cia pod jego postÄ™puje w tym samym brzuchem i trudnoÅ›ciami zwiÄ…zanymi czasie bez przeszkód, aż z utrzymaniem odpowiedniego ucisku do pojawienia siÄ™ trzeciej na podstawÄ™ trzonu prÄ…cia. W tym przy- frakcji ejakulatu w formie padku, u takich ras jak chichuachua, przezroczystego, jasne- pomeranian i yorkshire terrier, do pobra- go, wodnistego pÅ‚ynu. nia nasienia od psa można wykorzystać Bezbolesne odchylanie maÅ‚Ä… probówkÄ™ (o wymiarach 7-8 cm prÄ…cia do tyÅ‚u może oka- dÅ‚ugoÅ›ci i 0,8 cm Å›rednicy wewnÄ™trznej) zać siÄ™ zabiegiem pro- podÅ‚Ä…czonej do 5-ml gumowego smocz- blematycznym u psów ka, gruszki z odciÄ™tym koÅ„cem Å›lepym. Fot. 5. z dÅ‚ugÄ… okrywÄ… wÅ‚osowÄ… W momencie wydobycia prÄ…cia z worka w okolicy zadu. U psów, napletkowego pars longa glandis jest które sÅ‚abo odpowiadajÄ… wkÅ‚adana do gruszki, która w momencie na masaż wzwodem, pole- peÅ‚nego wzwodu żoÅ‚Ä™dzi prÄ…cia wypeÅ‚nia ca siÄ™ odchylać prÄ…cie do siÄ™ opuszkÄ… żoÅ‚Ä™dzi bulbus glandis. Po tyÅ‚u nawet przy częścio- pobraniu drugiej frakcji nasienia pro- wym wzwodzie opuszki bówkÄ™ odÅ‚Ä…cza siÄ™ od smoczka. TrzeciÄ… żoÅ‚Ä™dzi. frakcjÄ™ najlepiej pobrać do osobnej Frakcje ejakulatu na- probówki przez lejek, ponieważ bardzo leży pobierać do osob- trudno jest ponownie podÅ‚Ä…czyć nowÄ… nych pojemników, przy probówkÄ™ do gruszki Å›ciÅ›le obejmujÄ…cej czym (do celu sztucznej żoÅ‚Ä…dz. U maÅ‚ych ras najlepiej pobierać inseminacji) z reguÅ‚y do nasienie z sukÄ… i samcem na blacie pierwszej probówki po- o przyczepnym podÅ‚ożu wtedy osoba biera siÄ™ frakcjÄ™ przed- pobierajÄ…ca i asystujÄ…ca siedzÄ… wygodnie nasiennÄ…, nasiennÄ… oraz po obu stronach stoÅ‚u. niewielkÄ… część wydzie- Przy pobieraniu nasienia na sztucz- liny prostaty. PozostaÅ‚Ä… nÄ… pochwÄ™ również ważne jest, aby część trzeciej frakcji na- w czasie wykonywania tej procedury leży pobrać do osobnej byÅ‚a obecna osoba, którÄ… pies dobrze probówki (fot. 6), (1). zna. W przypadku, gdy otoczenie jest PrzejÅ›cie pierwszej frak- obce dla psa, odruch ejakulacji może cji w drugÄ… oraz drugiej nie nastÄ…pić. Czasami pomocne może w trzeciÄ… zazwyczaj jest być Å‚agodne przemawianie, gÅ‚askanie maÅ‚o wyrazne i trudne do i podawanie smakoÅ‚yków. Także sama uchwycenia. U niektó- obecność suki bÄ™dÄ…cej w cieczce lub nie rych psów, na poczÄ…tku bÄ™dÄ…cej w okresie cieczki wzmaga popÄ™d lub pod koniec odda- pÅ‚ciowy samca. Pies oddaje nasienie do wania drugiej frakcji, specjalnie do tego celu dostosowanej mogÄ… nastÄ™pować skur- pochwy zaopatrzonej w pulsator albo też, cze mięśniówki kanaÅ‚u w zależnoÅ›ci od wielkoÅ›ci psa, do pochwy Fot. 6. moczopÅ‚ciowego, które przeznaczonej dla królików, tryków lub WRZESIEC-PAyDZIERNIK " 5/2004 52 WETERYNARIA ANDROLOGIA W PRAKTYCE skróconej pochwy dla buhaja. PrzestrzeÅ„ nowi koÅ„cowÄ… frakcjÄ™ ejakulatu. Jest to Konsystencja nasienia zależy od miÄ™dzyÅ›cienna pochwy napeÅ‚niona jest wodnista wydzielina pochodzÄ…ca z jedy- koncentracji plemników. Nasienie wodÄ… o temp. 39-40oC, w różnej iloÅ›ci, nego dodatkowego gruczoÅ‚u pÅ‚ciowego o wysokiej koncentracji plemników w zależnoÅ›ci od wielkoÅ›ci żoÅ‚Ä™dzi dawcy u psowatych, czyli prostaty, decydujÄ…ca (160-600 tys./mm3) ma konsystencjÄ™ nasienia. Aby doprowadzić do erekcji, o caÅ‚ej objÄ™toÅ›ci ejakulatu. Wydzielina mleka lub rozwodnionego mleka (18% wykonuje siÄ™ masaż opuszki żoÅ‚Ä™dzi ta stwarza plazmÄ™ ejakulatu u psa, uÅ‚a- ejakulatów), a o niskiej koncentracji (po- prÄ…cia poprzez napletek, a prÄ…cie w fazie twiajÄ…c transport plemników w drogach niżej 160 tys./mm3) jest wodniste (82%). wzwodu wprowadza siÄ™ do podstawionej rodnych samicy. PozyskujÄ…c nasienie do Koncentracja plemników w peÅ‚nym eja- sztucznej pochwy. oceny pÅ‚odnoÅ›ci psa czy do inseminacji kulacie waha siÄ™ od 10 do 610 tys./mm3 U psów ostrych i nerwowych stosuje i/lub dalszej konserwacji, pobiera siÄ™ nasienia, Å›rednio 80 tys.; liczba plemni- siÄ™ elektroejakulacjÄ™ po ich spÄ™taniu głównie frakcjÄ™ bogatÄ… w plemniki, ków w caÅ‚ym ejakulacie wynosi od 50 do lub premedykacji preparatem z grupy ponieważ wydzielina prostaty obniża 1780 mln, Å›rednio 380 mln. Psy pÅ‚odne neuroleptyków (5,8). Jednak nasienie wartość frakcji plemnikowej i utrudnia powinny posiadać minimum 200 mln uzyskane tÄ… drogÄ… zazwyczaj ma niższÄ… dalszÄ… obróbkÄ™ nasienia podczas kon- plemników w pobranym ejakulacie. jakość niż nasienie pobierane metodami serwacji (5,7). wczeÅ›niej wymienionymi. Ponadto ten Pobrany ejakulat należy ocenić ma- Ejakulaty psów nadajÄ…cych siÄ™ do sposób pobierania nasienia może budzić kroskopowo i mikroskopowo. Przy oce- rozrodu powinny mieć co najmniej 80% pewne opory ze strony wÅ‚aÅ›cicieli zwie- nie makroskopowej ocenia siÄ™: objÄ™tość plemników o ruchu progresywnym. Nie- rzÄ…t, ze wzglÄ™du na nieuniknione dość w ml, barwÄ™, konsystencjÄ™, zapach i pH. normalny ruch (oscylacyjny, wsteczny, brutalne postÄ™powanie z psem. Mikroskopowo ocenia siÄ™ odsetek plem- okrężny) może sygnalizować zmiany ników o ruchu postÄ™powym, koncentracjÄ™ morfologiczne plemników. Szybki zanik OCENA NASIENIA plemników w jednostce objÄ™toÅ›ci i w ca- ruchu plemników tuż po pobraniu na- Psy należą do gatunku zwierzÄ…t, Å‚ym ejakulacie oraz procent plemników sienia może być wskaznikiem obniżonej u których kopulacja wraz z ejakulacjÄ… żywych i martwych. W celu dokÅ‚adnej pÅ‚odnoÅ›ci reproduktora (5). trwa stosunkowo dÅ‚ugo okoÅ‚o 30-45 oceny morfologii plemników utrwalony Preparaty do badaÅ„ morfologicznych minut, a w czasie ejakulacji samiec rozmaz nasienia barwi siÄ™ i oglÄ…da przez barwi siÄ™ barwnikiem nigrozynowo- oddaje z reguÅ‚y trzy frakcje (fot. 7). mikroskop pod imersjÄ… (1,3,5). -eozynowym lub metodÄ… bydgoskÄ… Pierwsza frakcja pojawia siÄ™ Å›rednio Na objÄ™tość pobranego ejakulatu (barwnikiem gencjanowym i eozynÄ…). 20 sekund od rozpoczÄ™cia masażu najwiÄ™kszy wpÅ‚yw majÄ… rasa i masa psa Barwnik nigrozynowo-eozynowy sÅ‚uży oraz warunki i sposób masturbacji. Im zarówno do odróżniania plemników wyższa jest masa samca oraz stymulacja żywych od martwych, jak również do przez obecność suki bÄ™dÄ…cej w cieczce, oceny morfologicznej gamet. W ocenie tym wiÄ™kszÄ… można uzyskać objÄ™tość morfologicznej plemników przyjmuje siÄ™ nasienia. U psów o masie ciaÅ‚a do 20 kg podziaÅ‚ na komórki normalne, ze zmia- waha siÄ™ ona od 1 do 22,5 ml, Å›rednio nami pierwotnymi i wtórnymi. Przyjmuje 5,4 ml, a powyżej 20 kg masy ciaÅ‚a od siÄ™, że prawidÅ‚owy ejakulat psa nie po- 2 do 61 ml i wiÄ™cej, Å›rednio 12,8 ml. winien mieć wiÄ™cej niż 20% plemników Åšrednia objÄ™tość oraz ogólna liczba z wadÄ… dominujÄ…cÄ…, a maksymalnie po plemników w caÅ‚ym ejakulacie wynosi, 10% komórek ze zmianami pierwotnymi odpowiednio dla obydwu grup: 9 ml i od i wtórnymi (1,3,5). 0,5 do 1,5 miliarda plemników. Odruch ejakulacji w czasie pobierania nasienia KONSERWACJA NASIENIA PSA metodÄ… masażu żoÅ‚Ä™dzi trwa od 60 s do W praktyce stosowane sÄ… dwie metody Fot. 7. 22,5 min. konserwacji nasienia psa krótkotrwaÅ‚a żoÅ‚Ä™dzi i trwa od 5 do 90 s, Å›rednio Nasienie psa oglÄ…dane przez Å›ciankÄ™ konserwacja w temperaturach dodatnich 13,5 s. Wydzielina w pierwszej frakcji probówki bezpoÅ›rednio po pobraniu w tzw. stanie pÅ‚ynnym oraz dÅ‚ugotrwaÅ‚e jest klarowna, w iloÅ›ci od 0,1 do 2 ml, ma zabarwienie od wodnistego, poprzez przetrzymywanie ejakulatu zamrożonego Å›rednio 0,35 ml. Faza ta jest wydziela- szare (44% ejakulatów), szarobiaÅ‚e (25%), w temperaturach ujemnych. na przez prostatÄ™ ma ona za zadanie biaÅ‚oszare (24% i wiÄ™cej) do biaÅ‚ego Nasienie Å›wieżo pobrane do insemi- oczyszczenie kanaÅ‚u moczopÅ‚ciowego. (4,5%). PozostaÅ‚e zabarwienie to: biaÅ‚o- nacji może być użyte jako rozrzedzone W naturalnych warunkach przebiega -szaro-zielone, szaro-żółte, żółto-biaÅ‚o- i nierozrzedzone. Nierozrzedzony eja- w momencie wspiÄ™cia oraz pierwszych -szare i różowe. Zabarwienie czerwone kulat po schÅ‚odzeniu do temperatury skurczów cewki (8). Druga faza eja- Å›wiadczy o obecnoÅ›ci krwi w ejakulacie. od 5 do 10oC może być przechowywany kulacji to oddawanie frakcji ejakulatu Obecność krwi w nasieniu wpÅ‚ywa nie- do 21 godzin. Natomiast nasienie prze- bogatej w plemniki w formie gÄ™stego korzystnie na zdolność plemników do znaczone do transportu powinno być nasienia przypominajÄ…cego wyglÄ…dem zapÅ‚odnienia komórki jajowej. uprzednio rozrzedzone i schÅ‚odzone. mleko lub Å›mietanÄ™. ObjÄ™tość tej frakcji Nasienie psa ma specyficzny zapach. Dodanie do rozrzedzalnika 10 mg strep- wynosi od 0,1 do 3 ml, Å›rednio 1,2 ml W pozostawionym w próbówce stopnio- tomycyny i 10 000 j penicyliny zapobiega i trwa od 5 s do 5 minut, Å›rednio 52 s. wo wydziela siÄ™ osad plemników, który rozwojowi bakterii. Nasienie rozrzedzone Po ejakulacji frakcji plemnikowej, której opada na dno naczynia. Przy dużym i schÅ‚odzone zachowuje odpowiedniÄ… przesuwanie odczuwa siÄ™ w formie sil- zanieczyszczeniu moczem lub wydzielinÄ… ruchliwość i integralność bÅ‚on komórko- nych skurczów cewki, dochodzi do wy- ropnÄ… ejakulat ma zmieniony zapach. wych plemników przez co najmniej 4 dni. dzielania trzeciej fazy ejakulatu. Trzecia Nasienie ma pH 5,8-6,9 w pierwszej Rozrzedzenie nasienia zapewnia lepszÄ… faza ejakulacji trwa dÅ‚ugo od 60 s do frakcji Å›rednio 6,37; w drugiej 6,10 pÅ‚odność, gdy zachodzi konieczność 20 minut, Å›rednio 6 minut i 55 s i sta- i w trzeciej 7,2. dÅ‚uższego przechowywania. Rozrzedze- WRZESIEC-PAyDZIERNIK " 5/2004 53 WETERYNARIA ANDROLOGIA W PRAKTYCE nie waha siÄ™ od 1:3 do 1:8, zależnie od spieszeniu ustawionym w zakresie od wgÅ‚Ä™bieniami. Opakowania plastikowe poczÄ…tkowej koncentracji plemników (4). 300 do 700 G (9). Do osadu plemników zamraża siÄ™ w statycznych lub wymu- KoÅ„cowa objÄ™tość rozrzedzonej dawki dodaje siÄ™ od 2 do 5 ml rozrzedzalnika szonych parach ciekÅ‚ego azotu. Nasienie inseminacyjnej jest uzależniona od rasy o wyrównanej temperaturze, caÅ‚ość na- rozmrażane jest w Å‚azni wodnej o odpo- i nie powinna przekraczać 2 do 10 ml. leży dobrze wymieszać. WiÄ™ksze objÄ™toÅ›ci wiedniej temperaturze. Przed użyciem wymaga stopniowego dawki inseminacyjnej powodujÄ… tylko Procedura konserwacji nasienia psa powrotu do temperatury pokojowej. wypÅ‚yw nadmiaru pÅ‚ynu z plemnikami w niskich temperaturach jest czaso- Przeżywalność nasienia uzależniona z pochwy lub macicy. Po wymieszaniu i kosztochÅ‚onna, wymaga cennego jest od jakoÅ›ci rozrzedzalników i czasu rozrzedzone nasienie schÅ‚adzane jest do sprzÄ™tu, odczynników oraz wykwalifiko- przechowywania (7,9). +5oC przez 30-45 min. Powolne schÅ‚a- wanej kadry, dlatego z dobrym skutkiem dzanie nasienia uzyskiwane jest przez przeprowadzana może być w oÅ›rodkach Rozrzedzalniki do konserwacji umieszczenie go w fiolce, którÄ… nastÄ™pnie akademickich i lecznicach specjalistycz- nasienia w stanie pÅ‚ynnym ustawia siÄ™ w lodówce. Po schÅ‚odzeniu, nych. WyczerpujÄ…cy opis konserwacji Obecnie istnieje możliwość sprowa- a przed przesyÅ‚kÄ… nasienia, należy nasienia psa w niskich temperaturach dzenia gotowych preparatów sÅ‚użących sprawdzić żywotność plemników przez zamieÅ›ciÅ‚ NiżaÅ„ski (10). qð do sporzÄ…dzenia odpowiedniego roz- podgrzanie i ocenÄ™ kropli nasienia pod rzedzalnika, przy czym ich skÅ‚ad jest mikroskopem. PiÅ›miennictwo nieznany i chroniony. Do komercyjnych Nasienie może być transportowa- 1. Allen W.E.: Infertility in the dog [w:] Canine zalicza siÄ™ np. rozrzedzalnik CLONE ne na dÅ‚uższÄ… odlegÅ‚ość w termosie practice, red.: E. Boden, Bailliere Tindal (Pensylwania, ICG, USA); Triladyl (Mi- schÅ‚odzonym pakietem chÅ‚odzÄ…cym lub 1991. nitub Niemcy); Laiciphos i Biociphos kostkami lodu. Do transportu próbek 2. Andersen K.: Artificial insemination and (L Aigle, IMV, Francja), (4,8,9). W prak- nasienia schÅ‚odzonego najlepiej nadajÄ… storage of canine semen, [w:] Theriogeno- tyce terenowej powszechnie używa siÄ™ siÄ™ nietÅ‚ukÄ…ce probówki plastikowe. Aby logy I, red. Morrow D.A., W.B. Saunders ogólnodostÄ™pnych, takich jak trislak- probówki nie kontaktowaÅ‚y siÄ™ bezpo- Comp., Philadelphia 1980. tozowo-żółtkowy, o skÅ‚adzie: Tris(hydro- Å›rednio z lodem, powinny być owiniÄ™te 3. BielaÅ„ski W.: Rozród zwierzÄ…t, PWRiL, xymethyl)aminimethane 3,025 g; kwas np. watÄ… baweÅ‚nianÄ…. Przed inseminacjÄ… Warszawa 1977. cytrynowy 1,7 g; fruktoza 1,25 g; nasienie jest ogrzewane przez umieszcze- 4. BielaÅ„ski A., Tischner M.: Biotechnologia woda redestylowana do 100 ml; nie zbiorniczka w Å‚azni wodnej o temp. rozrodu zwierzÄ…t udomowionych, Drukrol, żółtko jaja kurzego 20 ml; penicylina 37oC. Niektórzy podgrzewajÄ… nasienie Kraków. benzylowa 1 mg/ml; streptomycyna do temp. pokojowej lub inseminujÄ… suki 5. Dubiel A.: Plan badania psa reproduktora 1 mg/ml. Podany skÅ‚ad może zostać nasieniem zimnym (9). w kierunku pÅ‚odnoÅ›ci, [w:] Rozród psów, zrealizowany w aptece. Tak sporzÄ…dzony red.: A. Dubiel, WrocÅ‚aw 2000. rozrzedzalnik może być przechowy- Konserwacja nasienia psa 6. England G.C.W.: Rozród i poÅ‚ożnictwo wany w lodówce, 20% żółtka dodaje w niskich temperaturach psów wedÅ‚ug Allena, SIMA WLW, War- siÄ™ bezpoÅ›rednio przed konserwacjÄ…. Konserwacja nasienia psa w niskich szawa 1998. Rozrzedzalnik w stanie zamrożonym temperaturach przynosi wiele korzyÅ›ci 7. Günzel-Apel A.R.: Sztuczne unasiennianie można przechowywać przez okres do i uÅ‚atwieÅ„ zarówno w zakresie pracy i zabiegi biotechnologiczne u suk, Nowa 3 miesiÄ™cy, nawet z dodatkiem żółtka. hodowlanej, jak i opieki lekarsko-we- Weterynaria 1996, vol.1, X, s. 23-28. Oprócz tego rozrzedzalnika z powodze- terynarynej. Mrożenie nasienia stwarza 8. Kosiniak-Kamysz K., Jarosz S.: Pies i lis niem można stosować do konserwacji możliwoÅ›ci transportu dawek insemina- część VI, [w:] Andrologia, red. S. Wierz- nasienia psa w stanie pÅ‚ynnym chude cyjnych, pozwalajÄ…c uniknąć transportu bowski, Kraków 1996. mleko po 10-minutowej pasteryzacji suki do krycia, kwarantanny zwierzÄ…t 9. Linde-Forsberg C.: Regulation and recom- w temperaturze 92-94oC i schÅ‚odzeniu; i chowu wsobnego. Przechowywanie da- mendations for international shipment of mleko homogenizowane zawierajÄ…ce 2% wek inseminacyjnych w ciekÅ‚ym azocie chlilled and frozen canine semen, [w:] Re- tÅ‚uszczu; rozrzedzalnik cytrynianowo- daje możliwość wykorzystania nasienia cent Advances in Small Animal Reproduc- -żółtkowy, o skÅ‚adzie: cytrynian sodu cennego reproduktora nawet po jego tion, red.: Concanon P.W., England G., (2,9%) 80% i żółtko jaja kurzego 20% Å›mierci (10). Verstegen J., Lnde-Forsberg C., Veterinary (2,4,8,9). England podaje rozrzedzalnik Mrożone nasienie psa można przecho- International Information Service, Ithaca o skÅ‚adzie: mleko chude 2,4 g; glukoza wywać praktycznie tysiÄ…ce lat w kontene- NY (www.ivis.org). 4,9 g; dwuwÄ™glan sodu 0,15 g; woda rach z ciekÅ‚ym azotem w temp. -196oC. 10. NiżaÅ„ski W.: Konserwacja nasienia psów dejonizowana do 100 ml (6). Rozrzedzalniki stosowane do gÅ‚Ä™bokiego w niskich temperaturach, [w:] Rozród zamrażania nasienia zawierajÄ… w swoim psów, red.: A. Dubiel, WrocÅ‚aw 2000. Sposób konserwacji nasienia psa skÅ‚adzie substancje krioprotekcyjne 11. Purswell B.J., Parker N.A.: Ocena predys- w stanie pÅ‚ynnym takie jak glicerol, DMSO, które chroniÄ… pozycji do rozrodu samców psów, Wete- Do konserwacji nasienia psa w stanie gamety przed skutkami szoku niskotem- rynaria po dyplomie 2001, s. 9-15. pÅ‚ynnym, czyli w temp. powyżej 0oC, peraturowego. Odpowiednio schÅ‚odzony należy używać wyÅ‚Ä…cznie drugiej frakcji i rozrzedzony ejakulat można konfekcjo- dr n. wet. WiesÅ‚aw Bielas ejakulatu. Po pobraniu i ocenie makro- nować w kulkach i opakowaniach pla- Katedra i Klinika Rozrodu skopowej nasienia oblicza siÄ™ ogólnÄ… stikowych, takich jak sÅ‚omki o objÄ™toÅ›ci Chorób Przeżuwaczy liczbÄ™ plemników, bada morfologiÄ™ 0,25 i 0,5 ml, lub w minitubach. Z reguÅ‚y i Ochrony Zdrowia ZwierzÄ…t, oraz ruchliwość (3). Niektórzy zalecajÄ… w jednej sÅ‚omce 0,5 ml znajduje siÄ™ od WydziaÅ‚ Medycyny Weterynaryjnej nawet, aby zupeÅ‚nie odrzucić plazmÄ™ 50 do 100 milionów plemników. Kulki Akademii Rolniczej we WrocÅ‚awiu: nasienia i zostawić do konserwacji tylko nasienia zamraża siÄ™ na bloku suchego 50-366 WrocÅ‚aw, osad plemników po odwirowaniu próbki lodu lub na schÅ‚odzonym ciekÅ‚ym azo- pl. Grunwaldzki 49 w wirówce przez 5-6 minut przy przy- tem aluminiowym blacie z wydrążonymi e-mail: bielas@ozi.ar.wroc.pl WRZESIEC-PAyDZIERNIK " 5/2004 54