Metoda PCR

Metoda łacuchowej polimerazy była możliwa dzięki wyizolowaniu z bakterii, które żyją w gorących źródłach polimerazy Taq (Thermus aquaticus).

Ta polimeraza powoduje łączenie się nukleotydów. Działa w temp. 72 st. C. Istnieją

specjalne aparaty - termocyklery - w których przeprowadza się metodę PCR.

W termocyklerach syntetyzowane są startery (odcinki DNA komplementarne do początku

lub końca nici DNA) - aparaty te mają możliwość zmiany temperatury. Startery

stntetyzowane są w temp. 40-60st. C, ale polimeraza Taq działa dopiero w temperaturze 72 st. C.

Etapy metody PCR:

1. Izolacja odcinka DNA,

2. Denaturacja w temp. 95 st. C,

3. Synteza starterów w temp. 40-60 st. C w termocyklerach,

4. Zmiana w termocyklerach temp. na 72 st. C, dodanie trifosforanów nukleozydów,

5. Polimeraza Taq syntetyzuje dwie cząsteczki DNA - do starterów przy udziale

polimerazy Taq dołączają się nukleotydy.

Czynność powtarza się od początku aż do otrzymania pożądanej ilości kopii wyjściowego DNA.

Metoda PCR ma olbrzymie znaczenie w kryminalistyce.