Znakowanie chlorkiem dansylu oraz identyfikacja N-końcowej reszty aminokwasowej białka/peptydu DNS-Cl + H N-Ala-Gly-Ala-Val-Met-His-Tyr-(...)-Glu-COO-2
0,1M NaHCO
ij
3
ck a
-
a i
NaHCO ⇄ Na+ + HCO
3
3
e n
r
-
a
HCO + H O ⇄ H CO + OH-
ć w
3
2
2
3
o
oś l
n y
j s
a n
dy da
85% HCOOH
w
pH
fluoryzująca pochodna sulfonamidowa DNS
+
10
-NH
hydroliza DNS-Cl 3
DNS-HN-Ala-Gly-Ala-Val-Met-His-Tyr-(...)-Glu-COO-przez H O i OH-2
do DNS-OH
DNS
stałowrzący ~6 N HCl próżnia, 105oC, hydroliza chemiczna 18 h
wiązań peptydowych chromatografia cienkowarstwowa DNS-Ala
Gly
Val
DNS-Tyr
UV
Glu
Ala
(...)
His
Met DNS-OH
* START
hydrolizat