2009-10-15 Część praktyczna Barwienie Grama: Formy morfologiczne bakterii I. Odtłuszczenie szkiełek Budowa komórki prokariotycznej II. Rozmaz przy palniku i eukariotycznej I. Formy kokalne: Formy morfologiczne bakterii " ziarniaki " dwoinki (Diplococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis) " paciorkowce (Streptococcus pyogenes) " czwórniaki (tetrady) " pakietowce (Sarcina sp.) " gronkowce (Staphylococcus aureus) II. Formy cylindryczne: " pałeczki (Escherichia coli) " laseczki (Bacillus subtilis) III. Formy spiralne: " krętki " śrubowce " przecinkowce (Vibrio cholerae) IV. Formy nitkowate: " bakterie żelazowe, promieniowce Barwienia: Mureina (peptydoglikan): - proste jeden barwnik, uwidocznienie struktury kwas N - acetylomuraminowy + N - acetyloglukozoamina - złożone min. 2 barwniki kontrastowe, np. rozróżnienie grup bakterii gramdodatnich i gramujemnych gram + gram - Liczba warstw kilkadziesiąt 1-2 mureiny % mureiny w 60-90% max 10% ścianie dodatkowe kwasy tejchojowe błona zewnętrzna z elementy ściany LPS dodatkowe cechy oporność na lizozym, penicylinę wynik barwienia ciemno fioletowe różowe Grama 1 2009-10-15 Część praktyczna c.d. Komórki prokariotyczne Komórki eukariotyczne Barwienie Grama: nukleoid jądro I. Odtłuszczenie szkiełek brak organelle błonowe II. Rozmaz przy palniku koliste DNA DNA liniowe brak histony III. Utrwalenie (3x przez płomień) mezosomy mitochondrium IV. Fiolet gencjana: 1,5-2 mureina w ścianie inne składniki ściany V. Płyn Lugola: 30 plazmidy brak rybosomy 70s rybosomy 80s VI. Alkohol: 20 brak introny w genach VII. Spłukać wodą!!! VIII. Fuksyna: 30 Część praktyczna c.d. " Tytuł sprawozdania: Formy morfologiczne komórek prokariotycznych " Rysunek + podpis (gatunek, gram+/gram-, forma morfologiczna) gram + gram - " Wykorzystywane szczepy: fiolet fioletowy fioletowy Bacillus mycoides płyn Lugola fioletowy fioletowy Sarcina sp. alkohol fioletowy bezbarwny Staphylococcus aureus E. coli fuksyna fioletowy różowy Proteus vulgaris Laseczka Przygotuj na następne zajęcia: - Materiał z dzisiejszych ćwiczeń - Charakterystyka drożdży i pleśni 2