ïż




Po wymieszaniu wszystkich prób w probówkach zmierzyć absorbcjÄ™ przy 450 nm próby 2 wzglÄ™dem 1, próby 4 wzglÄ™dem 3 itd. SporzÄ…dzić wykres zależnoÅ›ci iloÅ›ci powstajÄ…cego produktu mierzonej absorbancjÄ… próby przy 450 mn od pH mieszaniny inkubacyjnej (czyli pH, w którym dziaÅ‚aÅ‚ enzym).
2. Wpływ etanolu, chlorku sodu i fosforanu sodu na aktywność kwaśnej fosfatazy.
Schemat doświadczenia ilustrującego wpływ etanolu, chlorku sodu i fosforanu sodu na aktywność kwaśnej fosfatazy.


Numer
próby
Dodać po Iml
buforu o pH 5,0
(zawierajÄ…cego
rozpuszczony
p-nitrofenylo-
fosforan)
Dodać po Iml
Dodać po 4 ml
0,1M NaOH
Dodać po 0,2ml enzymu i wymieszać
Po 15 min. inkubacji w temperaturze pokojowej dodać po 4ml 0,1M NaOH

1
+
h2o
4*
4-
-

2
+
h2o
-
+
4-

3
4-
50% etanolu
+
4-
-

4
+
50% etanolu
-
4-
4-

5
4-
2M NaCl
4-
+
-

6
+
2M NaCl
-
4-
4-

7
4*
0,1M NaH2P04
4-
4-
-

8
+
0,lMNaH2PO4
-
4-


Po wymieszaniu prób w probówkach zmierzyć absorbcjÄ™ przy 450 nm próby 2 wzglÄ™dem 1, próby 4 wzglÄ™dem 3 itd. Zaznacz na wykresie ilość produktu powstaÅ‚ego w mieszaninach inkubacyjnych zawierajÄ…cych: 25% etanol, IM NaCl, 50mM NaH2PC>4 w stosunku do mieszaniny kontrolnej (próba nr 2). Napisz jaki wpÅ‚yw na aktywność kwaÅ›nej fosfatazy ma etanol, NaCl, NaH2P04 i dlaczego?
10