Pytania z Mikrobiologii
Przykłady procesów sterylizacji w autoklawie i suszarce:
a) autoklaw - 121oC -15min; 117oC - 15min
b) suszarka - 160oC - 24h; 180oC - 1h
Wskaż drobnoustroje beztlenowe: Clostridium botulinum, Sarcina; Desulfotomaculum; Bacteroides; Fusobacterium; Leptotrichia; Fibrobacter
Pożywki różnicujące służą do: określania wybranej cechy biochemicznej wybranego szczepu co pozwala na zróżnicowanie tego szczepu na bakterie posiadające lub nie badaną cechę
Metoda MIANA - miano jest to najmniejsza ilość badanego materiału, w której znajduje się przynajmniej jeden drobnoustrój. Im wyższa wartość miana tym mniej drobnoustrojów w badanym materiale. Metodą miana oznaczyć można obecność dowolnej grupy drobnoustrojów w badanym materiale. Punktem wyjścia jest materiał lub jego rozcieńczenia dziesiętne. Posiew wykonuje się w jednym powtórzeniu, z 3 kolejnych rozcieńczeń, na podłoże płynne, wynik dodatni to zmętnienie i inne zmiany widoczne gołym okiem
Metoda NPL - najbardziej prawdopodobnej liczby - oznaczenie liczebności dowolnej gr drobnoustrojów. Pozwala na określenie jtk w jednostce badanego materiału. Przed posiewem mat może wymagać regeneracji ma to na celu przywrócenbie sprawności uszkodzonym komórkom, posiew w dwóch powtórzeniach z min 3 kolejnych rozcieńczeń, na podłoże płynne, wynik + to zmętnienie podłoża, przy odczycie określa się ilość wyników dodatnich przy posiewie danego rozcieńczenia na maksymalną ilość możliwych wyników + (zależy to od ilości powtórzeń przy 5 max ilość + to 5) Wyniki odczytywane są ze specjalnych tabeli których wybór zależy od ilości zastosowanych powtórzeń.
Metoda PŁYTKOWA - metoda posieów powierzchniowych, zalewanych, należy przygotować kolejne rozcieńczenia dziesiętne badanego materiału,
Salmonella to: pałeczka G-; względnie beztlenowa; w większości ruchliwe; o urzęsieniu perytrychalnym; nieprzetrwalnikująca; neleży do rodziny pałeczek jelitowych enterobakterii, niesporotwórcza; laktoza-; sacharoza-; indol-; mocznik-; glukoza+; H2S+, gaz+
Staphylococcus aureus to: ziarniak G+; nieruchliwy; względnie beztlenowy; występuje pojedynczo, parami, w skupiskach, gronach; nieprzetrwalnikuje; wytwarza enterotoksyny; koagulaza+; mannitol+/-; glukoza- fermentacja
Listeria monocytogenes to: pałeczka G+; niesporotwórcza; nieprzetrwalnikuje; wmikroaerofilna;przedziały pH 5-9 wrzecionowaty, wydłużony kształt; rośnie przy 10% stężeniu NaCl; w temp 1-45oC; chorobotwórcza; ramonza+, ksyloza-, mannitol-
Yersinia - pałeczki G-, psychrofilne, urzęsione,
Bacillus - laseczki G+, tlenowe, przetrwalnikujące, pH4.9-5.3
Clostridium - laseczki G+, urzęsione, przetwrawalnikujące, ścisłe beztlenowce,
Drobnoustroje chorobotwórcze wywołujące toksykoinfekcję: Salmonella, Vibrio; E.coli; B. Cereus; Clostridium perfringens, Staphylococus aureus
3 przykłady chorób odzwierzęcych u ludzi: wścieklizna; choroba wściekłych krów; ptasia grypa - zoonozy
Wirion to: pojedyncza, kompletna cząsteczka wirusowa zdolna do zakażenia komórki Składa się z rdzenia nukleoproteinowego i płaszcza białkowego (zwanego kapsydem)
Priony to: infekcyjne białka, występujące powszechnie w każdym organizmie i całkowicie niegroźne. Dopiero w sytuacji, gdy zmieniają one swoją naturalną konformację, stają się białkiem prionowym infekcyjnym.
Bezkomórkowe czynniki infekcyjne to: wirusy, priony
Co oznaczają składowe „planu budowania żywności”: H - akceptowana wartość progowa, powyżej której wyniki są dyskwalifikujące; m - wartość równa lub poniżej której wszystkie wyniki uważane są za zadawalające
Wymień 5 patogenów jelitowych: Shigella Salmonella; Listeria monocytogenes; E.coli; Vibrio;
Mikroorganizmy wywołujące objawy chorobowe u człowieka i zwierząt: wirusy
Mikrobiologiczny wskaźnik higieny procesu produkcyjnego żywności to: E.coli; paciorkowce kałowe;
Metody pośrednie oznaczania bakterii: metoda miana, płytkowa, NPL, filtrów membranowych; inne - stopień zmętnienia, przewodność
Wymień praktycznie stosowanie metody pośredniej określania liczby drobnoustrojów w badanym środowisku: płytkowa, miana, NPL, spektrofotometryczna, filtrów membranowych
Minimalna wartość aw: halobacterium 0,75, osmofile 0,6, bakterie 0,75; drożdże 0,62; s.aureus 0,85;
Cechy typowe dla bakterii patogennych: inwazyjność, toksyczność, zjadliwość
Inwazyjność to: zdolność do przenikania niektórych organizmów przez bariery ochronne ustroju, namnażania się w nim, rozprzestrzeniania dzięki produkowanym przez siebie czynnikom.
Toksyny wytwarzane przez gronkowce koagulazo+ nazywamy: enterotoksynam - ciepłostabilne białka, A,B odp za zatrucia pokarmowe; hialuronidaza, fibrynolizyna
Egzotoksyny: toksyna wydalana do środowiska przez żywe komórki bakteryjne. Są to bardzo silne jady białkowe, wytwarzane głównie przez bakterie Gram-dodatnie. Wykazują wrażliwość na działanie wysokiej temperatury. Mogą powodować zatrucia przewodu pokarmowego lub działać na układ nerwowy.
Przykłady egzotoksyn: hemolizyna:alfa, beta, gamma; leukocydyna
Mykotosyny: produkty przemiany materii grzybów które są toksyczne dla człowieka, zwierząt ale nie dla tworzących je drobnoustrojów; Aspargillus; penicillium; Fusarium
Kolejne etapy w kierunku Salmonella to: próbka na peptonową wodę zbuforowaną 16-20h w 37oC; Posiew na RV 24h w 42oC lub na SC 24h w 37oC; Posiew na różnicujące podłoże BGA 24h w 37oC; albo Hektoen Agar 24h w 37oC; Identyfikacja wstępna; posiew na agar odżywczy; testy biochemiczne, badania serologiczne (inaczej: przednamnażanie, namnażanie selektywne; posiew na podłoże selektywno-różnicujące, identyfikacja)
Etapy na Listeria monocytogenes - posiew na pół Frasera 24h,30oC; posiew pojedynczych kolonii na LSA Listeria Selective Agar 24-48h, 30oC i posiew na Frasera 24h,30oC; Z LSA posiew na agar z krwią 24h, 37oC - wynik +hemoliza b; posiew na TSYEB - 24, 37oC, zdolnośc rozkładu cukrów ksylozai ramnoza 37oC - 5 dni
Etapy na Staphylococus aureusnamnażanie na pożywce Giolitti Cantoni z tellurynem potasowym 24-48, 37oC, wynik +zaczerwienienie; namnażanie selektywne:posiew na Baird Parkera 24-48h w 37oC egg yolk (czarne otoczone mleczną strefą) - posiew na BHI 18-24h w 37oC - test potwierdzający z osoczem króliczym wynik + - wyraźny skrzep po kilku godz.
Zdolność skrzepu do rozkładu czerwonych ciałek krwi to wynik: chemoliza typu B
Dawka toks:Ilość substancji, która po wchłonięciu do organizmu wywołuje efekt toksyczny.
Dawka let.: powodująca śmierć %, określonego gatunku zwierząt po jej wchłonięciu
EPEC - enteropatogenny; EIEC - enteroinwazyjny; EHEC - enterokrwotoczna E.coli
Bakterie środowisk ekstremalnych np. holobakterie to: archebakterie
Organizmy eukariotyczne w grupie mikroorganizmów to: protista(pierwotniaki,glony); grzyby nitkowate(pleśnie,drożdże); wirusy, priony
Do zewnętrznej osłony komórki bakterii zaliczamy: błonę cytoplazmatyczną, ścianę komórkową, przestrzeń peryplazmatyczną
Aparat Kocha służy do: tyndalizacji(pasteryzacja frakcjonowana, w przemyśle spożywczym wyjaławianie środowiska (np. konserw w puszkach) poprzez kilkakrotną pasteryzację w parze (zwykle trzy razy po 30 minut w odstępach dobowych). Wynalazek J. Tyndalla.
Promieniowanie gamma znalazło zastosowanie przy wyjaławianiu: żywności.
Procesy skutecznej eliminacji form wegetatywnych bakterii to: sterylizacja frakcyjna, dezynfekcja, pasteryzacja
Roztwory cukrów, enzymy, witaminy, płyny ustrojowe wyjaławiamy przy pomocy sterylizacji na zimno
Cechami branymi pod uwagę przy opisie kolonii są: kształt, barwa, przejrzystość, wielkość, zapach, brzeg, profil w przekroju, struktura zewn, powierzchnia, zmiany podłoża, zapach
Metody fizyczne hodowli beztlenowców: gotowanie podłoża przed posiewem - regeneracja; nawarstwianie parafiny; zalewanie warstwą agaru; dodatek do podłoża ciał absorbujących tlen np. Serca, wątroby; stosowanie anaerostatu
Gęstość podłoża zależy od: ilości % agaru, stałe: 1-2%, półpłynne: 0,1-0,7%
Radiacji żywności: reduryzacja, radaplertyzacja, rodycyzacja
Czas jednej generacji to: czas jaki mija między jednym podziałem komórek a drugim we właściwej fazie wzrostu
Fazy wzrostu logarytmicznego:1- przygotowawcza - brak podziałów, jtk stała, okres przystosowania do nowych warunków; 2- młodości: intensywny metabolizm, max wielkośc kom, inicjowanie podziałów; 3 - właściwa wzrostu logarytmicznego - czas między podziałami jest stały, wielkośc i skład chem bez zmian; 4 - zwolnionego wzrostu - nagromadzenie toksycznych metabolitów, spadek syntezy białka i RNA, zwolnione podziały kom; 5 - równowagi - liczba żywych kom stała, największa biomasa; 6 - wymierania - wzrost liczby martwych, spadek biomasy, samowyjaławianie
jtk - jednostka tworząca kolonię; NPL - Najbardziej Prawdopodobna Liczba, metoda statystyczna (pośrednia), npl - niepoliczalne, LPS to liposacharyd - bakteryjna endotoksyna, jego głównym składnikiem jest błona zewnętrzna
Formy skupisk gronkowców: zairniak, dwoinka, grono,tetrada, pakietowiec, gronkowiec, paciorkowiec
Bakterie wytwarzające endospory to przedstawiciele rodziny: Bacillus, Clostridium, Sporolactobacillus, Popsarcina, Osicillospora
Typy sporulacji: bacilarny - centralny; klostridialny - wrzecionowaty, plektridialny - buławkowaty
Etapy sporulacji:replikacja DNA, asymetryczne uwypuklenie błony cytoplazmatycznej oddzelającej jej część, tworzenie drugiej warstwy błony - tworzenie paraspory, synteza peptydoglikolu w przestrzeni między ww warstwami, na zewnątrz koreksu powstaje płaszcz endospory.
Taksja to: reakcja ruchowa swobodnie przemieszczających się zwierząt niższych i roślin na fizyczne bodźce kierunkowe
Psychrofile0,10-15,max<20; Psychrotrofy: 0,15-30,max>25; Mezofile 10-15,30-40,max<45; Archebakterie>-85
Skuteczność działania promieni UV zależy od: formy i liczebności drobnoustrojów, długości fali, czasu naświetlania, odległości naświetlanego materiału od źródła naswietlania, stopnia zanieczyszczenia powietrza cząstkami mechanicznymi,
Hodowla czysta to: drobnoustroje wyrosłe w danym środowisku należą do jednego szczepu konkretnego gatunku
Plazmoptyzę - pękanie pod wpływem napływu rozpuszczalnika. Protoplasty(zachowana błona kom ale bez ściany)umieszczone w roztworze izotonicznym/hipotonicznym ulegają rozerwaniu
Ścisłe beztlenowce: Bacterioides, Fusobacterium, Fibrobacter; BEZTLENOWCE: Clostridium, Desulfotomaculum, Oscillospna, Saracina; WZGLĘDNE BEZTLENOWCE: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Salmonella, Shigiella, Proteus, Serratia, Erinia, Yersinnia, Vibrio, Aeromonas, Photobacterium; Tlenowce: Staphylococcus, Leuconostoc, Micrococcus, Lactobacillus, Pseudomonas, Bacillus
Uszereguj względem najmniejszej do największej wrażliwości na środowisko: wirusy, pleśnie, drożdże, G+, G-
Typy urzęsienia: czuborzęse amfitrichalne (jednorzęse - monotrichalne; wielorzęse - lofotrichalne), okołorzęse - petrichalne
Co to znaczy że miano salmonella w kiełbasie jest>25 -
Barwienie m Gramma-odtłuścić szkiełko, nanieść kroplę wody,przygotowanie rozmazu, wysuszenie na powietrzu, utrwalenie w płomieniu palnika(przytwierdzenie drobnoustroju do szkła, zabicie, odsłonięcie związków w ścianach kom z którymi łączy się barwnik), barwienie proste, złożone, pozytywowe, negatywowe
G+ fiolet, G- czerwień, Różnice: wrażliwość na antybiotyki, środki dezynfekujące, zdolność produkcji toksyn, chorobotwórczością, zdolnością do psucia produktów spożywczych G+ nie psują żywności, inna budowa ściany komórkowej, G- nie ma zewn. błony komórkowej, ściana G- jest cieńsza zawiera mnijeszą warstwę mureiny, G+ zatrzymują fiolet krystaliczny i nawet po odbarwieniu actonem pozostają zabarwione, u G+ płukanie powoduje zmniejszenie przestrzeni w ścianach kom w rezultacie kompleksy jodu i fioletu nie mogą ulec wypłukaniu, co w przypadku G- które mają mniej warstw nie jest przeszkodą.
Barwienie przetrwalników metodą Schaeffera-Fultona: utrwalone preparaty zalać zielenią malahitową, szkiełko podgrzać nad palnikiem, spłukać wodą, zanurzyć w safraninie, spłukać wysuszyć oglądać pod immersją.
Endospory barwią się na zielono, kom wegetatywne na pomarańczowo-czerwony, rzęski barwią się na czerwono w metodzie Lofflera
Drobnoustroje oportunistyczne - Drobnoustroje oportunistyczne - drobnoustroje, które w warunkach fizjologicznych tworzą prawidłową florę organizmu, natomiast w warunkach sprzyjających zakażeniu stają się patogenami. E. Coli
Patogeny - czynnik chorobotwórczy - czynnik wywołujący chorobę u danego organizmu
Intoksykacja to - zatrucie wywołane produktami przemiany materii drobnoustroju
Przykłady testów biochemicznych stosowanych w identyfikacji: Rapid ID32 - paciorkowce, API 20 Ster - gronkowce (VP, LAP, HIP, ESC, PYRA, PAL, RIB, ARA, SOR, RAF), TSI, SIMMONSA
BIOFILM - zróżnicowana zbiorowość form często wegetatywnych, chroniące je, sprzyjająca namnażaniu. Tworzą go org zdolne do przytwierdzania się do powierzchni i do siebie nawzajem. Biofilm złożony jest z org auto i heterogonicznych (bakterie, glony).Powstaje na powierzchniach abiotycznej i biotycznej, styku dwóch faz powierzchnia stała i woda, woda powietrze; Zależy od: rodzaju powierzchni, warunków środowiska, cech mikroorganizmu. Etapy: adsorbcja zanurzenie w wodzie, asocjacja,nietrwałe przytwierdzenie - proces odwracalny, adhrzja - trwałe przytwierdzenie proces nieodwaracalny, kolonizacja - tworzenie kolonii, dojrzały biofilm
AGAR -
Rodzaje osłon biologicznych - ściana kom, błona kom, błona cytoplazmatyczna, przestrzeń paryplazmatyczna, , błona zewnętrzna