Kierunek/ specjalność: BiB Nr grupy: 1	Imię i nazwisko:	Zaliczenie:
Data wykonania ćwiczenia: 23.04.2015	Tytuł ćwiczenia: Nadprodukcja kwasu cytrynowego w kulturach Aspergillus niger	Data oddania sprawozdania: 30.04.2015

1. Wykonanie ćwiczenia.

Przygotować100 cm³ pożywki syntetycznej o składzie: Sacharoza (20 g),NH ₄ NO₃ (0,3 g) ,KH ₂PO4 (0,15 g) ,MgSO₄ (0,1 g), Woda destylowana (do 100 cm3)

Ustalić pH roztworu na 2,5. Pożywkę przelać do kolby stożkowej. Kolbę zakorkować i wyjałowić.

Wystudzone podłoże zaszczepić konidiami kwasotwórczego szczepu Aspergillus Niger w ilości 2cm³ gęstej zawiesiny na100 cm³ podłoża. Hodowle powierzchniowe umieścić w cieplarce,a wgłębne w wytrząsarce w temp. 30 0C na 7 dni.

Oznaczanie kwasowości ogólnej.

W celu oznaczenia kwasowości ogólnej należy pobrać 2 cm³ płynu pofermentacyjnego i przenieść do kolby stożkowej na 200 cm³. Dodać 20 cm³ wody destylowanej i miareczkować0,1 N NaOH wobec fenoloftaleiny do pierwszej trwałej zmiany zabarwienia.

1. Obserwacje.

Po tygodniu inkubacji zaobserwowano:

pH 2,5 hodowla powierzchniowa- powstał kożuszek z dużą liczbą czarnych konidiów, powierzchnia pomarszczona

pH 7,0 hodowla powierzchniowa- powstał kożuszek z mała liczba czarnych konidiów, powierzchnia pomarszczona bardziej niż w pH 2,5.

pH 2,5 hodowla wgłębna- dużo, małych, peletek

pH 7,0 hodowla wgłębna- powstały duże peletki

1. Obliczenia( pH 2,5 hodowla powierzchniowa).

NaOH zużyte do zmiareczkowania próby kontrolnej

V_NaOH- 0,7 cm³

NaOH zużyte do zmiareczkowania płynu pofermentacyjnego

V_NaOH- 4 cm³

4cm^3-0,7cm³=3,3 cm³

x cm ³-100cm³

3,3 cm³- 2 cm³

x=165 cm³

1 cm³ 0,1M NaOH odpowiada 7mg kwasu cytrynowego

1cm³-7mg

165cm³-x mg

x=1155 mg kwasu cytrynowego.

1. Wyniki.

	Rodzaj hodowli
	Powierzchniowa
pH	2,5
cm^3 0,1 N NaOH/100 cm^3 pożywki	165
mg kwasu cytrynowego /100 cm^3 pożywki	1155

1. Wnioski.

Najlepszymi warunkami do hodowli i rozwoju grzybów z rodzaju Aspergillus Niger jest hodowla wgłębna o pH 2,5, ponieważ w tych warunkach zostało wyprodukowane najwięcej kwasu cytrynowego. Hodowla ta może być wykorzystywana do przemysłowej produkcji kwasu cytrynowego ponieważ jest najbardziej wydajna. Najgorsza okazała się hodowla wgłębna o pH 7,0 ponieważ zostało wyprodukowane zaledwie 350 mg kwasu cytrynowego. Jest to hodowla najmniej efektywna w porównaniu z innymi. W hodowli powierzchniowej gorsza okazała się hodowla w pH 7, chociaż w porównaniu z danymi z literatury to ona powinna okazać się najbardziej wydajna.