Monograf Bugajewska - Wykłady cz 1, WTŻ, Wd Monograficzny Bugajewska


Wykład 4 15.01.2007

Zasady pobierania próbek Roz. 2073 art. 5

Plan pobierania próbek

- badanie produktu n=1

- badanie partii n=5

- analiza trendu n…. - im więcej tym lepiej

- metoda referencyjna do pobierania próbek z obszarów produkcyjnych oraz ze sprzętu ISO 18593

Są wyjątki odnośnie pobierania próbek z partii. Na ogół jest to 5, ale czasami należy pobrać 10, a nawet więcej.

Plan poboru próbek

Plan dwóch klas - interpretacjia

Higiena procesu kryteria:

- zadawalający - w odniesieniu do kryteriów higieny procesu

- niezadawalajacy - w odniesieniu do kryteriów higieny procesu

Bezpieczeństwo żywności kryteria:

- zadawalający - w odniesieniu do kryteriów bezpieczeństwa żywności

- niezadowalający - w odniesieniu do kryteriów bezpieczeństwa żywności

Plan trzech klas - interpretacja

Higiena procesu kryteria:

- zadawalający - w odniesieniu do kryteriów higieny procesu

- dopuszczalny - w odniesieniu do kryteriów higieny procesu

- niezadawalający - w odniesieniu do kryteriów higieny procesu

Poniżej m-zadawalający

m - M - dopuszczalny

powyżej M - niezadawalający

plan trzech klas - liczba próbek powyżej 5

Procedura planu poboru próbek

Tuszki drobiowe

Salmonella

N=50 - liczba próbek

C=7 (maximum 14% niezgodnych) - może być zanieczyszczonych

Dzień produkcji (d) 1

15 tuszek

10g skóry i szyi/Tyszka

Skomasowanie skór z szyi 3 tuszek

5x25g próbek końcowych

N=50 - sytuacja 1

d1=0; d2=2(niezgodne); d3=0; d4=1; d5=0; d6=0; d7=1; d8=0; d9=1; d10=1

n=5

c=6

Higiena procesu = zadawalający

N=50 - sytuacja 2

Odrzucam dzień 1 - dodajemy dzień 11

d2=2(niezgodne); d3=0; d4=1; d5=0; d6=0; d7=1; d8=0; d9=1; d10=1; d11=2

n=50

c=8

Higiena procesu - niezadowalająca

(Zapoznać się z rozporządzeniem 2073/2005 sugestia pani doktor przed egzaminem)

Analiza trendu

- producent żywności powinien analizować wynik trendu

- kiedy analiza trendu wskazuje powinowactwo w kierunku wyniki niezadowalającego, należy podjąć odpowiednie działania (zapobiegające wystąpieniu ryzyka mikrobiologicznego)

Udoskonalenie

- podnoszenie higieny uboju

- przegląd kontroli procesu

n=5 =>53% niepewność

n=10 =>31%

n=20 =>18%

n=60 =>6%

n=100 =>4%

Rutynowe badania mikrobiologiczne

- określanie poziomu mezofilnej mikroflory saprofitycznej

- poszukiwanie drobnoustrojów potencjalnie chorobotwórczych

- wykluczenie obecności drobnoustrojów patogennych

Metody referencyjne a metody alternatywne

- Rozporządzenie 2073, art. 5

- Dopuszcza stosowanie metod alternatywnych zamiast referencyjnych o ile zostały zwalidowane według normy PN EN ISO 16140

Metody:

- referencyjne

- alternatywne

- laboratoria akredytowane

Metody analityki mikrobiologicznej

1) Standardowe

- metoda płytkowa

- NPL - najbardziej prawidłowa liczba

- ELISA

2) Instrumentalna

- molekularna: PCR, DNA, chip, sonda

- impedymetria

- cytometria

- fluorymetria

Metody analityki mikrobiologicznej

- mikrobiologia prognostyczna - matematyczne modelowanie predyktywne z wykorzystaniem krytycznych czynników wzrostu lub przeżywalności mikroorganizmów

1. Mechanistyczne

2. Empiryczne

Obecne metody i technologie

67% ELISA + ELFA

30,8% PCR + DNA Pr

2,1% chips, DNA, Arrays

0,1% inne

Metoda płytkowa

Wzrost jtk (CFK) na płytkach

Metoda z wykorzystaniem płytek kontaktowych

- płynna próbka zostaje zaabsorbowana przez podłoże wzrostowe

NPL - 3 probówki, używamy przy niskich poziomach zanieczyszczeń, poniżej 10 koloni na 1cm3

Metody alternatywne

- Automatyzacja w laboratorium

- zwiększona ilość prób

- wzrost efektywności pracy personelu

- standaryzacja przygotowywania prób i odczytu wyników

- zapewnienie wiarygodności

- powtarzalność wyników

- szybki zapis i transfer danych

- umożliwienie stałego monitorowania procesu produkcji

ELISA czyli test immunoenzymatyczny, immunosorbcyjny

- Test ELISA należy do grupy tzw. Testów fazy stałej

- Pierwszą metodą z tej grupy, w której stosuje się przeciwciałą znakowane radioizotopem jest test RIA za wynalezienie którego Rosalyn Yakow w 19977 roku otrzymał nagrodę Nobla

- Metoda ELISA polega na wykryciu określonych białek w badanym materiale z użyciem przeciwciał poliklonalnych lub monoklinalnych koniugowanych z odpowiednim enzymem.

Zasada testu ELISA

- zasada działania testu ELISA polega na tym, że przeciwciało związane z określonym enzymem może specyficznie rozpoznawać dane białko, które wcześniej zostało unieruchomione na podłożu. Po dodaniu przeciwciał...

Odmiany ELISA

1. Sandwich ELISA - test podwójnego wiązania

2. test ELISA bezpośredni i pośredni

3. Wykrywanie swoistych przeciwciał testem ELISA

4. Kompetencyjny test ELISA

Ad1 Określa stężenie danego białka w badanej próbce

Ad.2 Test podwójnego wiązania bezpośredni z użyciem jednego przeciwciała - antygen po związaniu przez przeciwciała umieszczone na płytce jest wykrywane przez kolejne przeciwciała, które związano ze znacznikiem pośredni - przeciwciało monoklinalne rozpoznaje swoiście antygen nie jest znakowane. Znakowane jest natomiast kolejne przeciwciało, rozpoznające dany izotop immunoglobulina. Dysponujemy dodatkowym przeciwciałem rozpoznającym klasę przeciwciała pierwotnego.

Ad. 4 Wykorzystuje się mieszankę znakowanego antygenu lub przeciwciała

PCR

Reakcja łańcuchowa plomerazy, PCR- łańcuchowa reakcja polimerazy; metoda powielania łańcuchów DNA w warunkach laboratoryjnych polegająca na sekwencji wielokrotnego podgrzewania i oziębiania próbki. Technika wynaleziona w 1983 roku przez Kary Mullisa i współpracowników z kalifornijskiej firmy Cetus

PCR

Do reakcji wprowadza się

- matrycowy DNA

- triofosforany deoksyrybonukleotydów

- startery

- termostabilną polimerazę



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Monograf Bugajewska - Wykłady cz 2, WTŻ, Wd Monograficzny Bugajewska
monogrrrr[1]... wykłady jakieś, WTŻ, Wd Monograficzny Obiedziński
Monograf M.O. - Wykłady, WTŻ, Wd Monograficzny Obiedziński
Reprodukcja ludności Polska wyklad 6 cz 1
wykład 6 cz 1
pielegniarstwo wyklad 2 cz 2
Wykład cz 5 Podstawy ergonomii
Wykłady cz I
Reprodukcja ludno ci Polska wyklad 6 cz[1][1] 2
Chirurgia wyklad 3 cz I Historia chirurgii naczyniowej
MATERIALY DO WYKLADU CZ IV id Nieznany
wykład 2 cz.1, Teoria i analiza rynku- semestr V
Podstawy edytorstwa wykład cz IIa, Edytorstwo
MATERIALY DO WYKLADU CZ VIII i Nieznany
MATERIALY DO WYKLADU CZ V id 2 Nieznany
wykłady - cz. 1, Pomoce naukowe, studia, informatyka
Podstawy edytorstwa wykład cz VI, Edytorstwo

więcej podobnych podstron