MIKROBIOLOGIA kolokwium 1
Pojęcia:
Sterylizacja – całkowite usunięcie drobnoustrojów wraz z formami przetrwalnikowymi
Dezynfekcja – polega na zniszczeniu form wegetatywnych drobnoustrojów chorobotwórczych lub tych powodujących psucie żywności.
PASTERYZACJA – działanie na drobnoustroje temperaturą do 100 C
UPPERYZACJA – Od 135 – 150 C i natychmiastowe ochłodzenie produktu
Urządzenia do hodowli drobnoustrojów, np:
Termostat (cieplarka) – urządzenie do hodowli, stała ściśle określona temperatura wewnątrz komory; są to szafki metalowe z płaszczem powietrznym lub wodnym -> zapewnia większą stabilność temp. W razie braku dopływu prądu i mniejsze wahania temp. Wewnątrz komory.
Wirówki – różnego typu i wielkości; regulowane obroty o pracy okresowej lub ciągłej; oddzielanie komórek mikroorganizmów pożywki; czasami-potrzeba odwirowania i przemycia komórek w warunkach jałowych w specjalnych naczynkach; probówki wirówkowe, okrągłodenne lub koniczne – szklane, plastikowe, nylonowe, amelinium xD. Powinna mieć 3-4k obrotów. Naczynia wirówkowe powinny być zamknięte.
Wytrząsarka – Do hodowli wgłębnej drobnoustrojów w warunkach tlenowych; lepsze napowietrzanie i mieszanie hodowli, różnego rodzaju, o regulowanych drganiach często połączone z urządzeniem termostatowym, a także z łaźnią wodną. Vortexy – do pojedynczych prób. Próby muszą być zamknięte. KURWA JEBANE KOŁO!!!!
Suszarki – normalne zastosowanie – prace analityczne; jałowienie szkła laboratoryjnego (kolby, probówki, płytki petriego, pipety itp.); czyste, suche szkło zatyka się korkami z waty lub tworzywa, owija w papier lub umieszcza w specjalnych pojemnikach metalowych. Czynnik jałowiący suche, gorące powietrze; 160-170C, 1-2h, powinien być zapewniony swobodny obieg powietrza.
Łaźnie wodne – Pozwalają na szybsze osiągnięcie wymaganej temp niż w cieplarkach. Służą do krótkotrwałych hodowli, nowoczesne są wyposażone w urządzenia do wytrząsania i regulacji temp.
Analerostaty – usuwa się z nich powietrze umożliwiając prowadzenie hodowli drobnoustrojów beztlenowych; prowadzimy je w próżni w atmosferze gazów obojętnych n2co2.
Szafy chłodnicze i zamrażarki – są w nich przetrzymywane kultury drobnoustrojów, jałowe podłoża, roztwory witamin itp.
Szafy laminarne – przeprowadzanie różnych prac mikrobiol. Bez użycia palnika (jałowość); wyposażony filtr bakteriologiczny oraz nawiew powietrza. Konstrukcja zapewnia też jałowość pomieszczenia w którym się znajduje.
Urządzenie do rozdrabniania prób – homogenizatory oraz stomacher – urządzenie umożliwiające rozdrabnianie próby w sterylnym, plastikowym woreczku, pozwala na rozdrabnianie dużej liczby prób w krótkim czasie, bez przerw na mycie i resterylizacje.
Drobny sprzęt: (wibrator analny)
Eza – oczko wykonane ze specjalnego drutu, osadzone w oprawce metalowej; wykonywanie posiewów, przesiewów i sporządzania preparatów mikroskopowych.
Igła – prosty drucik w oprawce metalowej; do posiewów wgłębnych oraz sporządzania preparatów grzybowych (często do prac mykologicznych, drucik zagięty w kształcie haczyka)
Szczypce corenta – przytrzymywanie preparatów w czasie barwienia.
Specyficzne szkła.
Płytki petriego – 2 zachodzące na siebie szalki, górna ma większą średnicę; hodowla mikroorganizmów na pożywkach zestalonych.
Próbówki bakteriologiczne – bez kołnierzyka; różne wymiary; hodowla mikroorganizmów na podłożach płynnych jak i zestalonych.
Zasada działania mikroskopu – rys. 10
Obiektyw imersyjne
Zdolność rozdzielcza
Opis:
Autoklaw:
Metalowy kocioł o podwójnych ściankach i podwójnym dnie ze szczelną pokrywą, dociskaną za pomocą specjalnych śrub; każdy posiada system grzewczy – elektryczny/gazowy; przyrządy kontrolne (manometry, termometry, wodowskazy), zawór bezpieczeństwa oraz kurek odprowadzający.
Czynnik jałowiący – przegrzana para wodna pod zwiększonym ciśnieniem.
Etapy:
Leje się sperma
Nagrzewanie
Sterylizacja właściwa – temperatura utrzymywana na stałym, określonym poziomie
Chłodzenie do temperatury otoczenia
Temperatura 110-121C czas 15-60 minut
Efektywność zależy od dokładnego jego odpowietrzenia – obecność powietrza obniża temperaturę pary.
Aparat Kocha – stosowany do wyjaławiania pożywek zawierających cukry, żelatynę, roztwory witamin i inne substancje ulegające rozkładowi pod wpływem temperatury
Metalowy kocioł, lżejszy, uproszczona budowa, przykryty luźno spoczywającą pokrywą
Czynnik jałowiący – bieżąca para wodna o temperaturze 100C uchodząca z kotła przez otwory w pokrywie
Czas: 15 – 60 minut w zależności od rodzaju i objętości
Dla pełnej sterylizacji należy powtórzyć czynność 3 razy.
Tyndalizacja – kilkukrotne (najczęściej 3) powtarzanie ogrzewania w temperaturze 100C w aparacie Kocha. Po każdym ogrzewaniu – 24 h przerwy. Po pierwszym jałowieniu giną formy wegetatywne; w czasie przerwy kiełkują przetrwalniki – które za 2 razem giną; 3 ogrzewanie – zabieg asekuracyjny podczas gwałcenia policjanta
Sposoby wyjaławiania
Pokaż cycki, ta... ta... Bo najlepsze w mieście, to są cycki Zośki !
Powiększenie mikroskopu
Pomieszczenia w laboratorium mikrobiologicznym:
Pożywkarnia – pokój, w którym przygotowywane są pożywki
Witam w pokoju zwierzeń (ruchania w kakao)
Sterylizatornia, a po drugiej stronie zmywalnia szkła
Laboratorium mikrobiologiczne, a w nim pokój szczepień
Pokoje wspomagające:
Pokój chłodnia (na trupy)
Pokoje fermentacyjne to taniego wińska
Sterylizatornia brudna (łączy pracownie mikrobiologiczną ze zmywalnią wyposażoną w autoklaw)
METODY STERYLIZACJI (całkowita eliminacja drobnoustrojów):
Termiczna:
Ogrzewanie w suchym gorącym powietrzu 160 – 170 C, 1-2h, nie można plastiku
Wypalanie w płomieniu palnika (wyżarzanie, wypalanie)
Termiczna mokra:
Wyjaławianie pod zwiększonym ciśnieniem - para wodna przegrzana (autoklawowanie -> w autoklawie; 121C, ciśnienie 1A – atmosfera)
Wyjaławianie bieżącą parą wodną, 100C, bez zwiększonego ciśnienia; Aparat Cocha (kocioł z wodą); Nazywane TYNDALIZACJĄ – proces powtarzany 3 krotnie w odstępach 24h
Na zimno lodzik z kostkami lodu w ustach, bjaaaacz.:
Przez filtry bakteriologiczne 99,99% drobnoustrojów, które nie mogą przejść; średnica porów mniejsza niż średnica bakterii; sączenie przy zmniejszonym ciśnieniu; zestaw składa się z: urządzeni filtrującego, zamocowanego w kolbie próżniowej, które poprzez płuczkę lub inne zabezpieczenie przed zakażeniem jest połączone z pompą próżniową; przed użyciem – w autoklawie; po skończonej filtracji – sączki należy dokładnie umyć.
Chemiczne wyjaławianie:
Środki dezynfekcyjne, antykoncepcyjne, dezynfekcja powierzchni, etanol
Wyjaławianie przez promieniowanie ultrafioletowe i jonizujące