Część doświadczalna:

1. Przygotowanie emulsji oleju:

60 ml 2%-owego wodnego roztworu alkoholu poliwinylowego zmieszaliśmy z 40 ml oleju słonecznikowego i homogenizowaliśmy przez 5 minut. Uzyskana emulsje stosowaliśmy jako substrat w reakcji.

1. Przygotowanie mieszaniny reakcyjnej i przeprowadzenie reakcji.

Przygotowaliśmy 3 erlenmayerki o pojemności 100 ml i wprowadziliśmy przygotowana w poprzednim punkcie substancji. Doświadczenie przeprowadzaliśmy uwzględniając podaną kolejność:

2 próby właściwe, czyli do dwóch erlenmayerek wprowadziliśmy:

• 5 ml emulsji,

• 4 ml buforu,

• 1 ml wyciągu z trzustki.

Pierwszą próbę inkubowaliśmy 30 minut a drugą 60 minut w temperaturze 37°C. Po wyjęciu z inkubatora dodaliśmy 10 ml etanolu.

1 próba kontrolna, czyli do jednaj erlenmayerki wprowadziliśmy:

• 5 ml emulsji,

• 4 ml buforu,

• 10 ml etanolu,

• 1 ml wyciągu z trzustki.

Tak przygotowane mieszaniny mieszaniny miareczkowaliśmy 0,05 M NaOH w obecności fenoloftaleiny (2-3 krople) do różowego zabarwienia. Wyniki doświadczenia zestawiliśmy w tabeli:

Tab.1 Objętości NaOH użyte do miareczkowania przygotowanych prób.

Substrat	Próba kontrolna [ml]	V30 [ml]	V60 [ml]	V30’ [ml]	V60’ [ml]
Olej kukurydziany	5,5	9,1	12,05	3,6	6,55
Olej ryżowy	5,3	10,4	10,9	5,1	5,6
Olej słonecznikowy	5,5	7,5	11	2	5,5
Olej z pestek winogron	4,6	9,9	12,5	4,8	7,9

Obliczam aktywność lipazy w 1 dm³ Kreonu (dla oleju słonecznikowego):

$$A = \ \frac{\Delta V*50*20}{1\ ml*t}$$

Dla próby inkubowanej 30 minut:

$$A = \ \frac{2*50*20}{1\ ml*30\ }$$

A = 66, 67

Dla próby inkubowanej 60 minut:

$$A = \ \frac{5,5*50*20}{1\ ml*60}$$

A = 91, 67

Tab.2 Zestawienie wyników prób olejów inkubowanych w danych temperaturach

Substrat	A30’ [U/mlroztworu kreonu]	A60’ [U/mlroztworu kreonu]
Olej kukurydziany	120	109,2
Olej ryżowy	170	93,3
Olej słonecznikowy	66,67	91,67
Olej z pestek winogron	176,7	131,7

Wykres zależności ∆V=f(t) dla oleju słonecznikowego:

Wnioski:

Z przeprowadzonego doświadczenia wynika że aktywność lipazy