1. W reakcji Biala, pentozy ogrzewane ze stęzonym HCl ulegają cyklizacji do furfuralu, który w obecności jonów Fe2+ kondensuje z orcyną, tworząc związek barwy zielonej.
2. Hydrolizę RNA możemy przeprowadzić za pomocą kwasów lub zasad.
3. W hydrolizie kwasów nukleinowych w reakcji z molibdenianem amonu wykrywa się: resztę kwasu ortofosforowego.
4. Enzymy wykorzystywane do otrzymania sferoplastów drożdżowych to najczęściej litykaza (z Arthrobacter luteus) lub glukulaza (ze ślimaka) hydrolizujące wiązanie B-1,3-glikozydowe występujące w glukanie ściany komórkowej.
5. Wymień składniki mieszaniny reakcyjnej niezbędne do procesu amplifikacji DNA w reakcji PCR.
DNA drożdży , startery PCR , Polimeraza taq , Bufor, dNTP , MgCl2
6. Wielkość ,,oczek” sieci żelu poliakrylamidowego zależy od stężenia akrylamidu oraz bisakrylamidu
7. Fragmenty DNA w żelu agarozowym lokalizujemy przy pomocy DEAE-celulozy zaś białka w żelu piloakrylamidowym wybarwiamy błękitem brylantowym.
8. Ile prążków zaobserwujemy po wybarwieniu żelu SDS/PAGE, jeśli przeprowadzimy rozdział białka o masie 130 kDa, składającego się z 3 podjednostek (polipeptydów) z których dwie mają masę 50 kDa, a jedna 30 kDa; naszkicuj układ prążków na żelu.
9. Podłoże selekcyjne, na które należy wylać drożdże po koniugacji dwóch typów płciowych opisanych w tabelce poniżej, żeby otrzymać wyłącznie pokolenie diploidalne powinno być pozbawione: histydyny i leucyny.
10. Zjawisko absorpcji światła o określonej długości fali (np. niebieskie), po której następuje emisja światła o większej długości fali (np. zielone) nazywamy fluorescencja.
11. Przeniesienie komórek ze starego naczynia hodowlanego do nowego, zawierającego świeże podłoże hodowlane, przed osiągnięciem stanu konfluencji nazywamy pasażowaniem.
12. Komórki ssacze wymagające do wzrostu i podziałów przyczepienia się do podłoża stałego nazywamy komórki atherentne.
13. Wprowadzenie obcego DNA do komórki ssaczej za pomocą metod niewirusowych nosi nazwę: transformacja.
14. Mikroskop umożliwiający odbieranie światła tylko z jednej płaszczyzny a następnie budowanie z uzyskanych pokrojów optycznych obraz 3D to mikroskop: konfokalny
15. Pierwsze odkryte białko fluorescencyjne wyizolowane z meduzy Aequorea victoria nazwane zostało GFP
16. Do technik umożliwiających badanie dynamiki i zachowania się białek in vivo w komórkach ssaczych, wykorzystujących zjawisko fotowygaszania fluorescencji zaliczamy technikę FRED, w której po jednorazowym wygaszeniu fluorescencji w danym obszarze obserwuje się powrót intensywności fluorescencji na skutek dyfuzji białek do badanego obszaru.
17. Aktywność peptydylotransferazy podjednostki 60S hamuje cykloheksimid, anizomycyna.
18. Aktynomycyna D wiąże się do: dwuniciowego DNA uniemożliwiając wykorzystanie takiego DNA jako matrycy w syntezie RNA
19. Napisz w jakiej kolejności stosowane podane odczynniki podczas izolacji DNA wykorzystywane na ćwiczeniach: SDS, zymoliaza, B-markopropanol, 96% etanol, octan potasu. 3 2 1 5 4
20. Większość całej puli RNA w komórce stanowi rRNA. Izolację RNA przeprowadza się z wykorzystaniem ekstrakcji fenolowej o pH zasadowym/kwaśnym. Aby pozbyć się resztek tego odczynnika z preparatu stosuje się DEPC.
21. Do sporulacji drożdży dochodzi w czasie pogorszenia się warunków wzrostu w środowisku. Proces ten poprzedzony jest podziałem mejotycznym (jakim?) i służy wytwarzaniu komórek hapliodalnych a i alfa (czemu?). Poprawa warunków środowiska prowadzi do kiełkowania zarodników.
22. Mamy bufor? Próbkowy zatężony czterokrotnie i docelowo stosujemy bufor o stężeniu 4 razy mniejszym. Ile weźmiesz próbki i ile buforu, jeżeli w sumie mieszanina ma mieć objętość 60 ul.?
60 : 4 = 15
15 x 3 = 45
23. Mamy preparat enzymatyczny 0.2 U/ul. W mieszaninie reakcyjnej potrzebujemy 2U enzymu. Jaką objętość enzymu trzeba dodać do mieszaniny reakcyjnej? 10 ul.
24. Wybierz poprawne stwierdzenia dotyczące PCRu
a) Temperaturę przyłączania starterów należy dobierać doświadczalnie
b) Sekwencja produktów PCRu zawiera sekwencję starterów
c) Przy wykorzystaniu reakcji PCR można amplifikować tylko obszar kodujący
d) Przyrost ilości produktu jest liniowy.
25. Drożdże rosły w optymalnych warunkach, a następnie przeniesiono je na uboższe podłoże do 25st C. Co zajdzie, jeśli te drożdże znów znajdą się w optymalnych warunkach?
Kiełkowaniw spor
26. Wybierz poprawne stwierdzenie:
a) Do sporulacji drożdży dochodzi w warunkach nieoptymalnych
b) Sporulacja zachodzi na podłożu YPD w 30 st C
c) Komórki wegetatywne mają wyższe nawodnienie niż spory
d) Sporulacja jest procesem poprzedzonym mejozą i wymaga wysokiej zawartości węgla w pożywce.
27. W komórkach drożdży zaindukowano sporulację, a następnie inkubowano je w 50 st C i wysiano na pełną pożywkę. Równolegle wykonywano doświadczenie bez sporulacji (kontrola).
a. Im dłuższa była inkubacja w 50st C tym słabiej rosły drożdże po sporulacji w prównaniu do kontroli
b. im dłuższa była inkubacja w 50stC tym więcej umierało komórek drożdży kontrolnych
c. Powstałe po sporulacji spory w większości przezywały inkubację w 50st C
d. Inkubacja w 50st C nie zabija komórek wegetatywnych.
28. ----
29. Gęstość optyczna hodowli bakterii po 10-krotnym jej rozcieńczeniu wynosi OD = 0.4. Jaką objętość hodowli należy dodać w celu przygotowania 50 ml hodowli o OD równym 0.2?
0,4 ---- 50 ml x = 50 x 0,2 : 0,4 = 25
0,2 ---- x ml x = 25 ml
25 : 10 = 2,5 ml
30. Oblicz jak należy przygotowoć 200ml buforu o następującym składzie:
- 10 mM Tris – wyjściowy r-r 0.5 M
- 2.5 % NaCl – w postaci stałej
- 10 mM CaCo3 – wyjściowy r-r 10%, M = 100
10mM-0,01 M 0,01M-200ml a 0,5-x czyli x 4 ml
b) NaCl Cp=2.5 Cp=ms/mr *100% 2,5=ms/200*100 czyli wychodzi 5 g
c) 1M=100g 10mM=y y=0,01*100/1=1g