enzymy 21-25, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ENZYMOLOGIA


21. mechanizm działania proteinaz aspartylowych

Proteinazy aspartylowe inaczej zwane karboksylowe to grupa związków, do których należy pepsyna. Pepsyna hydrolizuje rozkład białek w środowisku kwaśnym żołądka. Powstaje ona z pepsynogenu. Miejsce aktywne tego enzymu zawiera dwie reszty asparginianu. Aby enzym był aktywny jedna z tych reszt musi być zjonizowana a druga nie.

Cząsteczka pepsyny składa się z 2 części o podobnej strukturze. Miejscem wiązania substratu jest bruzda znajdująca się miedzy dwoma wyróżnionymi fragmentami. Każdą z tych części określa się mianem amino- i karboksyl końcową dostarczającej po jednej reszcie aspartylowej.

Rola reszt ASP.

- Aktywują znajdującą się miedzy nimi cząsteczkę wody.

- Działają jako akceptor donorowo- protonowy.

- W miejscu aktywnym proteaz aspartylowych występuje sekwencja ASP-Thr-Gly.

- Do tej grupy enzymów zaliczamy: podpuszczkę protezę HIV.

- Działanie tej grupy enzymów hamowane jest nawet przez znajdujące się w środowisku niewielkie ilości pepstatyny.

22. Mechanizm działania hydroliz glikozydowych na przykładzie  - galaktozydazy.

β -galaktozydaza hydrolizuje laktoze do galaktozy i glukozy. Jest ona enzymem indukowanym przez występowanie w środowisku laktozy.

β -D-galaktozydaza (EC 3.2.1.23) jest enzymem katalizującym reakcje hydrolizywiązañ O-glikozydowych w -D-galaktozydach. Najbardziej znanym galaktozydem jest disacharyd występujący w mleku - laktoza. Katalizowana enzymatycznie reakcja

hydrolizy wiązania -1,4-glikozydowego w laktozie prowadzi do powstania cząsteczek D-glukozy i D-galaktozy (I). Niektóre -D-galaktozydazy wykazują również zdolność syntezy wiązañ glikozydowych, która prowadzi do powstania łañcucha oligosacharydowego, gdy substratem reakcji jest laktoza (II

Obie aktywności -D-galaktozydazy - hydrolityczna i transferazowa są ze sobą

nierozerwalnie związane, a ich mechanizm jest wspólny. Obejmuje on trzy nastêpujące po sobie etapy, a ostatni z nich decyduje, czy zachodzi reakcja hydrolizy czy transglikozylacji:

0x01 graphic

W pierwszym etapie nastêpuje wiązanie cząsteczki laktozy w centrum aktywnym galaktozydazy. Drugi etap obejmuje rozszczepienie disacharydu z udziałem reszt aminokwasowych enzymu o znaczeniu katalitycznym. Cząsteczka glukozy opuszcza wnękę katalityczną, za to reszta galaktozylowa pozostaje związana z enzymem. W ostatnim etapie następuje przeniesienie reszty galaktozylowej na cząsteczkę akceptora i produkt reakcji opuszcza centrum aktywne galaktozydazy. Jeżeli akceptorem

jest woda, uwolniona zostaje cząsteczka D-galaktozy. Jeżeli za to te rolę akceptora

pełni cząsteczka cukru (laktoza lub jeden z produktów jej hydrolizy), powstaje galaktooligosacharyd

(5). Reakcją preferowaną jest reakcja hydrolizy.

23. Enzymy adaptowane do niskich temperatur - właściwości i znaczenie gospodarcze:

Obniżenie temperatury procesu biotechnologicznego prowadzi do:

- poprawa jakości produktu końcowego jeśli zwiększymy temperaturę to może on ulec modyfikacjom

- obniżenie kosztów procesu dzięki rezygnacji z drogich systemów grzejnych

- zmniejszenie ryzyka mikrobiologicznego mikroflorą mezofilną

- zmniejszenie czasu i obniżenie temperatury koniecznej do termicznej inaktywacji zmiennego enzymu

Możliwości aplikacyjne psychotrofów i ich producentów:

1) ochrona środowiska(kultury d-u)

- biodegradacja polutantów w zimnym i umiarkowanym klimacie

- rekultywacji zanieczyszczonej gleby inwitu(bioemediacja)

- produkcja biogazu w zimnym i umiarkowanym klimacie

2) przemysł spożywczy(enzymy)

- serowarstwo(podpuszczka, lipazy - zapach i aromat)

- piwowarstwo

- mleczarstwo(rozkład laktozy w ……………………………………………….  - galaktozydaza

- konserwujące żywność(rózne enzymy)

- przetwórstwo owoców(klarowanie soków - pektynowych)

3) chemia gospodarcza:

- produkcja środków piorących(proteazy, lipazy, amylazy)

4) biotransformacja w niskich temparetaurach

- modyfikacja antybiotyków(tetracyklin)

- otrzymywanie nienasyconych estrów wosków(lipazy)

- synteza nienasyconych triacylogliceroli np. asło kakaowe(lipazy)

- stereospecyficzna synteza estrów, peptydów(proteinazy, lipazy)

- synteza i modyfikacja lotnych związków

24. Enzymy hipertermofili jako przykład termostabilnych białek:

Drobnoustroje te wytwarzają ważne w przemyśle enzymy. Pierwszym takim enzymem była polimeraza Taq. Charakteryzująca się dość znaczną stabilnością, została wykorzystana w technice PCR. Obecnie stosowane w PCR są polimerazy z Pyrococcus voessei. Najbardziej hipertermofilnym drobnoustrojem jest szczep „121” oraz archeon Pyrdobus accultum.

Kinetyczne właściwości termoenzymów:

1) wrodzone tj. wynikające ze struktury termostabilności, podwyższona często przez czynniki środowiska(sole, poliamidy, glikolizujące białko); np. ferodoksyna z P. furiosus jest stabilna 24h w temperaturze 95stC, a amylopullanaza z tego organizmu w obecności jonów Ca2+ zachowuje aktywność w temperaturze 145stC

2) przesunięcie krzywej aktywności w f(T) w stronę wyższych temperatur. Temperatura optymalna powyżej 65stC a dla enzymów z hipertermofili nawet zakres 90 - 115stC

Proteinazy o najwyższej termostabilności:

1) Kaldolizyna - pozakomórkowa alkaliczna proteinaza a dokładnie metaloproteinaza z Thermus aquaticus 1/2 = 1h w 90stC w nieobecności Ca2+ szybko denaturuje > 100stC

2) akwalizyna - pozakomórkowa serynowa proteinaza z Desulfulococcus o Topt = 98stC

25. Enzymy w gospodarce:

Kierunki wykorzystania enzymów:

1) przemysł chemiczny korzysta mało z enzymów

2) przemysł skrobiowy wykorzystuje enzymy amylolityczne powodujące przekształcenie skrobi do:

- syropów maltodekstryn - właściwości emulgacyjne. Tu wykorzystuje się  - amylazy(np. z Bacillus subtilis)

- w zależności od enzymów o odpowiedniej specyficzności mamy odpowiedniej długości produkty. Enzymem znoszącym rozgałęzienia jest glukoamylaza lub pullulanaza. W przemyśle spożywczym wykorzystuje si…ę syropy glukozowo - fruktozowe. Glukoza traktowana jest izomerazą glukozową przekształcając ją do fruktozy. Syropy fruktozowe - glukozowe możemy uzyskać w różnych proporcjach:

Skrobia + (upłynniona  - amylaza + pullunalaza = maltodekstryna

Skrobia +  - amylaza + pullunalaza = maltoza

Skrobia +  - amylaza = glukoza + izomeraza glukozowa fruktoza

W przetwarzaniu skrobi może zostać wykorzystana  - amylaza która odcina od nieredukującego końca maltozę

3) w przemyśle serowarskim stosowane są lipazy pleśniowe które hydrolizują tłuszcze obecne w mleku powodują powstawanie smaku i aromatu sera. Często stosuje się jako źródło lipaz całe szczepy prowadzi do wytworzenia serów pleśniowych (pleśń przerasta ser). W przemyśle spożywczym stosuje się organizmy z grupy bezpiecznej GRAS. Tu należa tylko wybrane szczept E. coli. Drożdże winiarskie, piekarskie, pleśnie Aspergillus niger. W przemyśle mlecznym jest wykorzystywana  - galaktozydaza, w produkcji mleka bez laktozy.

4) zamiast chemicznych polepszaczy pieczywa stosowane są ksylazy

5) z syropów glukozowo - fruktozowych tworzy się nadzienia w cukrownictwie

6) enzymy proteolityczne, proteinazy aspartylowe wykorzystywane są do częściowej hydrolizy glutenu. Hydrolizowany gluten stosowany jest jako dodatek do wędlin.

7) lipooksygenazy - enzymy wprowadzające cząsteczke tlenu i jako produkt przejściowy otrzymujemy nadtlenki cykliczne -> wodorotlenki -> ketony. Lipooksygenazy stosuje się w przemyśle zbożowym w procesie powstawania białej mąki

Enzymy reakcji syntez:

- tryptofanaza - enzym pochodzenia bakteryjnego w środowisku rozpuszczalnika organizmu z indolem i seryną wytwarza tryptofan lub z indolu + pirogronian+ NH4+.

- melimbioza - pochodzi z pleśni rozkłada wiązania   1,6 - glikozydowe. Stosowana jest w produkcji sacharozy powodując rozkład rafinazy na sacharozę i galaktozę. W ten sposób zwiększamy wydajność cukru z buraka.

- dekstranazy - w przypadku gdy stosowane buraki są przemarznięte i podczas rozmrażania może dojśc do naruszenia ich struktury przez bakterie produkujące dekstran i przechodzi on do soku surowego obniżając przy tym wydajność sacharozy.

- produkowane przez d - e aminokwasy o nie tylko tryptofan ale i cysteina wytwarzana przez enzym: desulhydrazę. A substratami na tej reakcji są Na2S i  - chloro - L - alanina a reakcja przebiega w środowisku H2O/organ.

- lipazy bakteryjne i pleśniowe wykorzystują do syntezy białka swoje własności

- lipazy prowadzą reakcje syntez enzymatycznych, w których można uzyskać cukrowe produkty, kw. Tłuszczowe o cennych właściwościach użytkowych. Pochodne tych kwasów są doskonałymi emulgatorami a estry wyższych kwasów tłuszczowych można stosowac jako smary.

- enzymy w przemysle włókienniczym:

1) celulazy, ksylazy, enzymy pektynolityczne

Manipulując składem uzyskujemy takie proporcje w/w preparatów, że nadają się one do obróbki tkanin bawełnianych. Pilingują tkaniny bawełniane usuwając chemiceluloze a zwłaszcza ksylazy sprawiające że tkanina jest delikatna. Z lnu substancje pektynowe usuwają część celulozy przez co zwiększa się gładkość materiału i jego chłonność. Taka tkanina łatwiej się barwi. W przemyśle bawełnianym stosujemy enzymy amylolityczne usuwające skrobię z klejanki bawełnianej.. w procesie tkania i przędzenia zabezpiecza ona włókna przed uszkodzeniami. Skrobię usuwa się dopiero przed barwieniem.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
enzymy moja sciaga, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ENZYMOLOGIA
enzymy moja sciaga(1), BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ENZYMOLOGIA
enzymologia 11-15, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ENZYMOLOGIA
eznymy 1-5, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ENZYMOLOGIA
Tabelka pomiarowa do 21, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
Tabelka pomiarowa do 21, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
obliczenia i wnioski, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
konsp15, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
konspekt 53, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
wykład4 Systemowe zarządanie wg. PN-18001, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ZARZĄDZANIE BEZPIECZE
wykład5 Koszty bhp, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ZARZĄDZANIE BEZPIECZEŃSTWEM
ćwiczenia 5-6 Składka na ubezpieczenie wypadkowe, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, ZARZĄDZANIE BE
sprawozdanie 45miki, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
Ch.f.44, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
hasz, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, CHEMIA FIZYCZNA
biotechnologia zagadnienia do kolokwium, BIOTECHNOLOGIA POLITECHNIKA ŁÓDZKA, BIOTECHNOLOGIA ŚRODOWIS

więcej podobnych podstron