Gr. 1 OŚ sem. IV

Godz. 17.¹⁵-19.⁰⁰

Temat: Analiza mikrobiologiczna powietrza dla celów sanitarnych

Cel:

Przeprowadzenie oceny stopnia zanieczyszczenia powietrza atmosferycznego i powietrza pomieszczeń zamkniętych pod względem mikrobiologicznym z uwzględnieniem aspektu sanitarnego.

Zakres ćwiczenia:

Przeprowadzenie badań mikrobiologicznych w pomieszczeniach zamkniętych, które obejmują oznaczenie „ogólnej” liczby bakterii z uwzględnieniem bakterii pigmentowych i sporowców, liczby bakterii hemolizujących (gronkowców), paciorkowców oraz liczby promieniowców i „ogólnej” liczby grzybów z uwzględnieniem pleśni i grzybów drożdżopodobnych.

Wykonanie:

Pobieranie próbek do badań

Metoda sedymentacyjna polega ona na swobodnym opadaniu z powietrza mikroorganizmów na podłoże stałe w określonym czasie.

Płytki Petriego z odpowiednim podłożem ustawić miejscu przeznaczonym do badania. Z płytek zdjąć wieczka i pozostawić je otwarte na okres 10 min w przypadku oznaczania „ogólnej” liczby bakterii i na 30 min przy oznaczaniu pozostałych grup mikroorganizmów. Po ekspozycji płytki zakryć i odwrócone wstawić do termostatu w celu inkubacji.

Metoda zderzeniowa polega na wychwytywaniu mikroorganizmów w wyniku działania siły uderzeniowej określonej objętości powietrza, skierowanej na powierzchnię podłoża.

Aparat szczelinowy ustawić w miejscu przeznaczonym do badania. Zdjąć pokrywę aparatu zdezynfekować ja denaturatem. Na stoliczku aparatu umieścić otwartą płytkę Petriego z odpowiednim podłożem stałym, szybko założyć pokrywkę i włączyć aparat, następnie poprzez urządzenie podać 20 dm3 powietrza w ciągu około 1 min, w przypadku oznaczenia „ogólnej” liczby bakterii oraz 40 dm3 w ciągu 2 min przy oznaczeniu pozostałych grup bakterii i grzybów.

Oznaczenia baterii

Oznaczanie „ogólnej” liczby bakterii

Pobieramy próbki powietrza na podłoże agarowe przez 10 min metodą sedymentacyjną oraz 1 min metodą zderzeniową, wykonujemy po dwie próby na każdą metodę. Inkubujemy hodowle w temperaturach 20 ^o C przez 48 h i 37 ^o C przez 24 h. Po okresie inkubacji liczymy wyrosłe kolonie.

Oznaczanie liczby gronkowców

Próbki powietrza pobrać metodą sedymentacyjną przez 30 min i zderzeniową przez 2 min na podłoże Chapmana i inkubować przez 48h w temperaturze 37 ^o C. Do liczenia wybieramy tylko kolonie gronkowców chorobotwórczych (otoczonych żółtą sferą).

Oznaczanie ogólnej liczby grzybów

Próbki powietrza pobieramy i inkubujemy jak w przypadku promieniowców na podłożu Sabourauda. Po okresie inkubacji policzyć wyrosłe kolonie grzybów.

Metoda sedymentacyjna:

Lp	Rodzaj organizmów	Ilość organizmów na płytkach	Ilość organizmów organizmów m^3	Stopień zanieczyszczenia powietrza
1.	Sporowe	8	629	Wysoki
2.	pigmentowe	20	524	Wysoki
3.	Gronkowce	2	52	niskie
4.	Grzyby	Np.	Np.	B.wysoki

Metoda zderzeniowa:

Lp	Rodzaj organizmów	Ilość organizmów na płytkach	Ilość organizmów w m^3	Stopień zanieczyszczenia powietrza
1.	sporowe	Np. tzn >300	> 15000	Bardzo wysoki
2.	pigmentowe	Np. tzn >300	> 7500	Bardzo wysoki
3.	Gronkowce	8	200	Umiarkowany
4.	Grzyby	Np.	Np.	Bardzo wysoki

WNIOSKI:

Analizując powyższą tabelkę wnioskujemy ze lepsze efekty pod względem dokładności oceny stopnia zanieczyszczenia powietrza daje metoda zderzeniowa gdyż ujawnia ona wyższe stężenia bakterii i grzybów. Plusem tej metody jest zatem fakt, iż można znacznie wcześniej rozpocząć procesy oczyszczania powietrza z zanieczyszczeń. Nawiązując do metody sedymentacyjnej należy zwrócić baczną uwagę, że procesowi opadania podlegają tylko cięższe frakcje bakterii i grzybów, a pozostała - lżejsza część zanieczyszczeń nadal pozostaje w powietrzu - nie wpływając tym samym na wyniki stopnia zanieczyszczenia jakie ukazuje ta metoda. Wyniki nie są zatem miarodajne. Biorąc pod uwagę wytyczne jakości powietrza wewnętrznego zaproponowanego przez zespół ekspertów ds. najwyższych dopuszczalnych stężeń i czynników szkodliwych dal zdrowia w środowisku pracy człowieka oraz miejsce, w którym przeprowadzano powyższe procesy (toaleta) stwierdzamy, iż powietrze przekracza dopuszczalne normy i człowiek nie powinien nim przebywać.

---