Ćw.4. Otrzymywanie preparatu inwertazy z drożdży i zastosowanie go do hydrolizy sacharozy, biotransformacje LAB


Otrzymanie surowego preparatu enzymatycznego (inwertazy) z drożdży i zastosowanie go do hydrolizy sacharozy

Materiały:

- drożdże piekarskie

- 0.1 M bufor octanowy o pH 4.7

- 7% roztwór sacharozy

- 1 M roztwór NaOH

- odczynnik Benedicta

  1. 2.5 g drożdży ucierać w moździerzu z piaskiem i 25 ml wody destylowanej.i odstawić na 30 minut.

  2. Do 2 probówek wirówkowych pobrać po 5 ml zawiesiny i odwirować (4000 rpm, 10 min).

  3. 1 ml otrzymanego supernatantu (zawierającego inwertazę) umieścić w probówce, a następnie dodać 2 ml 0.1 M buforu octanowego o pH 4.7 i 2 ml 7% roztworu sacharozy. Zawartość probówki wymieszać.

  4. Do kolejnej probówki odmierzyć 0.5 ml mieszaniny (przygotowanej w pkt. 3) i od razu zalkalizować wobec papierka wskaźnikowego, dodając kroplami 1 M roztwór NaOH (próba kontrolna). Oznaczyć w próbie kontrolnej poziom cukrów redukujących metodą Benedicta.

  5. Pozostałą część mieszaniny otrzymanej w punkcie 3 inkubować w temperaturze pokojowej przez 30 minut (mieszanina reakcyjna).

  6. Po upływie czasu inkubacji, pobrać do kolejnej probówki 0.5 ml mieszaniny reakcyjnej i zalkalizować (jak w pkt. 4), dodając kroplami 1 M roztwór NaOH. Oznaczyć w mieszaninie reakcyjnej poziom cukrów redukujących metodą Benedicta.

Metoda Benedicta:

  1. mieszaninę otrzymaną w punkcie 4 (próba kontrolna)

  2. mieszaninę otrzymaną w punkcie 6 (próba właściwa)

  3. 0.5 ml wody destylowanej

dodać po 5 ml roztworu Benedicta i wymieszać zawartość każdej probówki



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
ćw.33, 33 Bernady 1, ZASTOSOWANIE FOTOKOMÓRKI DO POMIARÓW FOTOMETRYCZNYCH
PERSPEKTYWY ZASTOSOWANIA NANOKRYSZTAŁÓW DO OTRZYMYWANIA MATERIAŁÓW KOMPOZYTOWYCH
zastosowanie skal do oceny sprawnosci psychoruchowej w planowaniu
Ćw 4 Otrzymywanie pianek poliuretanowych
Zastosowanie fotokomórki do pomiarów fotometrycznych, Politechnika Krakowska
ćw 1 Otrzymywanie tlenku glinowego metodą Grzymka
ćw 10 - siła pędna drożdży , Biotechnologia UKW I ST, Biotechnologia żywności UKW
ćw.4 zadania pH, Chemia ogólna i żywności, instrukcje do ćwiczen z chemii ogólnej i żywności na I se
Matematyka II (Ćw) - Lista 01. Wykresy i własności funkcji, odpowiedzi do zadania 2
BADANIE KINETYKI REAKCJI HYDROLIZY SACHAROZY KATALIZOWANEJ PRZEZ INWERTAZĘ Z DROŻDŻY
Inne zastosowanie lakieru do włosów i paznokci, ECO kosmetyki
otrzymanie żywicy fenolowo-formaldehydowej, materiały naukowe do szkół i na studia, technologia chem
Pan wezwal Go do siebie, Scenariusze
Pan wezwał go do siebie-scenariusz o JPII, Katecheza, Jan Paweł II
CW 12, sgsp, Hydromechanika, HYDROMECHANIKA 1, HYDR INSTRUKCJE DO CWICZEN
ćw 10 - siła pędna drożdży , Biotechnologia UKW I ST, Biotechnologia żywności UKW

więcej podobnych podstron