Dorota Olszewska , Weronika Kwiecień IS2

OZNACZANIE ILOŚCI BIAŁEK W PRÓBKACH ŚRODOWISKOWYCH

Metoda: Oznaczanie białek metodą Lowry'ego

Wykonanie: Do 3 probówek pipetujemy 0.4 ml rozcieńczonego mleka Gostyń 3.2%UHT do 1:1000. Do 1 probówki dodajemy świeżo przygotowany roztwór 0,5 ml 2% K2C4H6O4 i 1% CuSO4*5 H2O rozpuszczonych w 2% alkalicznym roztworze Na2CO3 , a następnie mieszamy. Jednocześnie wykonujemy próbę kontrolna, gdzie zamiast roztworu mleka jest woda destylowana. Próbkę 1i 2i3 odstawiamy na 10 min. a następnie dodajemy 0,2 ml odczynnika E (odczynnik Folina), mieszamy 2 sekundy. Po 30 min. inkubacji w ciemnym miejscu mierzymy absorbancję przy długości fali λ=750 nm.

Wyniki:

rozcieńcznie	próbka	ekstynkcja	stężenie rozcieńczonego białka [mg/ml]	stężenie białka [mg/ml]	stężenie białka [g/l]	stężenie białka % [g/100 ml]
100	1	0,996	326,72246	32672,25	32,67225	3,267
		2	1,124	369,48214	36948,21	36,94821	3,695
		3	1,092	358,79222	35879,22	35,87922	3,588
	200	1	0,470	151,00690	30201,38	30,20138	3,020
		2	0,458	146,99818	29399,64	29,39964	2,940
		3	0,527	170,04832	34009,66	34,00966	3,401
	1	0,326	102,90226	20580,45	20,58045	2,058
250	2	0,363	115,26248	23052,50	23,05250	2,305
	3	0,346	109,58346	21916,69	21,91669	2,192
500	1	0,147	43,10552	4310,55	4,31055	0,431
		2	0,158	46,78018	4678,02	4,67802	0,468
		3	0,163	48,45048	4845,05	4,84505	0,485
	1000	1	0,011	-2,32664	-465,33	-0,46533	-0,047
		2	0,036	6,02486	1204,97	1,20497	0,120
		3	0,138	40,09898	8019,80	8,01980	0,802
	2000	1	0,032	4,68862	468,86	0,46886	0,047
		2	0,032	4,68862	468,86	0,46886	0,047
		3	0,036	6,02486	602,49	0,60249	0,060
			średnia arytm.	33185,06	33,18506033	3,319
			odchylenie stand.	3019,75	3,019753899	0,302

---