ODCZYNNIK BIURETOWY

W kolbie miarowej o pojemności 1 dm^3 rozpuścić w ok 500 cm^3 wody destylowanej

1,5g siarczanu miedziowego CuSo4*5H2O

6,9g winianu sodo-potasowego NaKC4H4O6*4H2O  i dodać winianu

300 cm^3 10%roztworu wodorotlenku sodu

2g jodku potasu

i uzupełnić do kreski wodą destylowaną

ZACHOWAĆ KOLEJNOŚĆ ODCZYNNIKÓW BO INACZEJ NIE WYJDZIE!!!

 

Następnie z wcześniej przygotowanych próbek zrobić rozcieńczenia

1:3

z tego -> 1:4

Kolejno do probówek odmierzyć:

0,5 ml wodnego r-ru próby + 2 cm^3 odczynnika biuretowego ---->> ( zostawic na 20 min) ----> zmierzyć absorbancję na spekolu przy długości fali 540nm i wg próby odczynnikowej. 

Próba ślepa odczynnikowa = ( 0,5 ml H2O+ 2cm^3 odczynnika biuretowego)

 

Zobaczymy ogólnie ile jest białka w próbce, jest to jedna z metod oznaczania białka.

 

Po otrzymaniu wyników ze spekolu należy obliczyć zawartość białka w następjący sposób:

 

Absorbancja * 16,1 * rozcieńczenie [ mg/ml ]

 

Nasze wyniki:

rozcieńcznie                        1:3                                              1:4

A                                         -                                                0,165

B                                         -                                                0,173

C                                         -                                                0,157

D                                         -                                                0,159

E                                         -                                                0,170

F                                         -                                                0,152

G                                         -                                                0,158

H                                      0,219                                             0,171

J                                       0,200                                             0,151

 

---