Podłoże mikrobiologiczne jest mieszanką różnych substancji odżywczych, które pozwalają na hodowlę drobnoustrojów in vitro. Pożywki powinny zawierać substancje z łatwo dostępnymi pierwiastkami biogennymi (C, O, H, N, P, S). Dla wzrostu mikroorganizmów ważne jest również zapewnienie określonego pH, wilgotności oraz odpowiedniej wartości ciśnienia ontycznego. Przejrzystość podłoża mikrobiologicznego nie zakłóca obserwacji wzrastającej kolonii. Aby można było zainicjować hodowlę bakteryjną podłoże powinno być sterylne.
Pożywki możemy podzielić ze względu na kilka kryteriów:
Ze względu na konsystencję wyróżniamy podłoża płynne oraz stałe
Ze względu na zawartość substancji odżywczych
a)pełne - bogate w składniki pokarmowe, które zapewniają maksymalny wzrost
b)minimalne - zawiera tylko związki, które są niezbędne do wzrostu
c)wzbogacone - zawiera dodatkowe związki , które umożliwiają wzrost mikroorganizmów słabo rosnących
Ze względu na skład chemiczny:
a)Podłoża naturalne - zawierające wyciągi z tkanek i hydrolizaty
b)Podłoża syntetyczne - zawierające chemiczne składniki
Diagnostykę bakteriologiczną prowadzi się wykorzystując podłoża namnażające, służące, jak sama nazwa wskazuje do namnożenia mikroorganizmów, występujących w badanym materiale. Na takiej pożywce wzrastają wszystkie gatunki bakterii obecne w analizowanej próbce.
Podłoże wybiórcze:
Dzięki zawartości dodatkowych substancji chemicznych, pozwala na wzrost tylko określonej grupy drobnoustrojów.
Podłoże namnażająco-wybiórcze
W tym wypadku otrzymuje się namnożoną, ściśle określoną grupę mikroorganizmów, hamując wzrost jednych, a wspomagając innych.
Podłoże różnicujące
Pozwala na wzrost określonej grupy drobnoustrojów różnicując w niej (dwa) gatunki.
Podłoże transportowo-wzrostowe
Pozwalające na namnażanie drobnoustrojów podczas przechowywania i transportu.
Podstawowe podłoża namnażające:
bulion odżywczy - zawierający wyciąg mięsny, pepton i NaCl
agar odżywczy - zawiera wyciąg mięsny, pepton, NaCl oraz 1,5% - 2% agaru (nie jest składnikiem odżywczym dla bakterii, służy do zestalenia pożywki
bulion cukrowy - bulion wzbogacony glukozą
Wyciąg mięsny będący składnikiem wielu podłoży mikrobiologicznych dostarcza mikroorganizmom azotu, węgla oraz witamin . W przypadku peptonu, który powstaje w wyniku enzymatycznego rozpadu białek, zapewnia on dostępność azotu oraz węgla.
Podstawowe podłoża wybiórczo-różnicujące:
podłoże SS - izolacja pałeczek Salmonella i Shigella
sole kwasów żółciowych i cytrynianu za stosowane w dużym stężeniu hamują wzrost bakterii gramdodatnich i niektórych gramujemnych
kolonie z czarnym środkiem, w wyniku wytwarzania siarkowodoru - Proteus, Salmonella
brak zaczernionego środka - Shigella
podłoże McConkeya - izolacja pałeczek Enterobacteriaceae
bakterie rozkładające laktozę, która jest składnikiem pożywki, są czerwone i otoczone strefą strąconego kwasu dezoksycholowego - Escherichia, Klebsiella,
bakterie nierozkładające laktozę są bezbarwne lub białe - Shigella, Salmonella, Pseudomonas, Proteus, Yersinia,
podłoże Wilsona-Blaira (WB) - izolacja pałeczek Salmonella
cytrynian bizmutowo-amonowy hamuje wzrost Shigella, Escherichia, Citrobacter
zieleń malachitowa hamuje wzrost bakterii gramdodatnich
kolonie czarne z metalicznym połyskiem ze strefowym zaczernieniem podłoża wokół i pod kolonią - Salmonella
kolonie szaro-zielone lub brunatne i brak zmian zabarwienia podłoża - inne gatunkiEnterobacteriaceae
podłoże Nogrady - izolacja Proteus ze środków spożywczych
rozkład mocznika powoduje alkalizację podłoża w wyniku czego błękit bromotymolowy zmienia barwę na zielono-niebieską
kolonie pomarańczowe, podłoże niebieskie (rozkład mocznika i laktozy) - Klebsiella
kolonie niebieskie, podłożę niebiesko-zielone (rozkład mocznika, brak rozkładu laktozy) -Proteus
kolonie i podłoże pomarańczowe - Escherichia
podłoże Chapmana - izolacja gronkowców z materiałów klinicznych
duże stężenie NaCl hamuje wzrost bakterii gramujemych, nie hamuje całkowicie wzrostu innych ziarenkowców dodatnich, laseczek Bacillus (zahamować można poprzez dodanie azydku sodu) i grzybów
nakropiony na podłoże z usuniętą hodowlą błękit bromotymolowy powoduje zmianę zabarwienia na żółtą (rozkład mannitolu) - Staphylococcus
podłoże Loewensteina-Jensena - izolacja prątków
zieleń malachitowa hamuje wzrost innych bakterii
Pożywka Sabourauda - jest to pożywka używana w mikrobiologii do hodowli grzybów. Składnikiem jest agar, woda destylowana, czynniki potrzebne do wzrostu (glukoza,pepton) oraz antybiotyki. Spośród ostatnich najczęściej dodawana jest penicylina, streptomycynal lub chloramfenikol - służą one do zahamowania wzrostu bakterii, podobnie jak kwaśne pH[1]. Przed posianiem drobnoustrojów podłoże musi być wyjałowione w autoklawie.