SPRAWOZDANIE ćw. 4.

Regulacja ekspresji genów na przykładzie rozwoju bakteriofaga T4.

Tomasz Koliński, gr. 2.

Odmłodzono hodowlę nocną szczepu E. coli MG1655 w 30 ml pożywki LB.

Hodowano bakterie z wytrząsaniem w 37^oC do osiągnięcia OD₆₀₀ = 0,1. Przy takim OD jest 0,1 * 10⁹ bakterii (cfu).

Do jednej grupy hodowli dodano lizat faga T4D, a do drugiej T4rI, tak aby m.o.i. wyniosło 1 (pfu/cfu=1). Włączono stoper.

Co 10 minut pobierano 1ml hodowli i mierzono OD₆₀₀.

Uzyskane wartości zapisywano w tabelach oraz umieszczono na wykresie.

	MG1655			MG1655
OD bakterii po odmłodzeniu (1:100)	0,128		OD bakterii po odmłodzeniu (1:100)	0,091
Dodanie faga (miano)	T4D 1,2 * 10^11 (32µl)		Dodanie faga (miano)	T4rI 3,6 * 10^9 (750µl)
OD po upływie			OD po upływie
10min	0,134		10min	0,095
20min	0,192		20min	0,113
30min	0,200		30min	0,022
40min	0,170		40min	0,000
50min	0,248		50min	0,000
1h	0,164		1h	0,000

Wnioski

Bakteriofag T4D nie jest zmutowany; posiada natywne białko RI, co zapobiega lizie, jednak zauważa się chwilowe spadki OD, co świadczy o zachodzeniu co jakiś czas lizy.

Bakteirofag T4rI ma mutację w genie kodującym białko RI, więc doprowadza już po 20 minutach do lizy bakterii (spadek OD do zera- brak żywych bakterii, brak mętności).

---