Hodowla Drosophila melanogaster

Cel: Eksperymentalna ocena mechanizmów dziedziczenia cech szczepów użytych do krzyżówek

uwaga:

Obserwacji much dokonujemy z wykorzystaniem mikroskopu stereoskopowego

1. Odróżnianie płci

Rysunek 1. Drosophila melanogaster samiec i samica

Należy zwrócić uwagę na sposób rozmieszczenia prążków na odwłoku.

2. Zmienność cech jakościowych wybranych szczepów

Obserwacja przykładowych mutantów i porównanie ich ze szczepem dzikim

Należy zwrócić uwagę na: kolor tułowia, kształt i kolor oczu, kształt skrzydeł.

3. Krzyżówka dwukierunkowa

uwaga:

Pracować należy z zachowaniem warunków sterylnych (blaty stołów odkazić denaturatem, czas otwarcia butelek należy skrócić do niezbędnego minimum, korków nie należy kłaść na stole, opalić pincety).

Bardzo istotną rolę w eksperymencie odgrywa prawidłowe i dokładne notowanie wyników. Na butelce należy zaznaczyć: nazwiska prowadzących hodowle, datę założenia hodowli, cechy genetyczne pary rodzicielskiej much, pokolenie oraz datę jego otrzymania.

Po zakończeniu hodowli należy wykonać sprawozdanie, w którym będą przedstawione: przebieg hodowli, wyniki łącznie z analizą statystyczną oraz wnioski.

• Przygotowanie hodowli

Na podstawie znajomości cech poszczególnych mutantów należy założyć hodowlę D.melanogaster

Przygotować dwa szczepy oraz 20 buteleczek, po 10 dla każdego szczepu.

Rozgrzać pożywkę, tak aby była płynna i nie zawierała grudek.

Pożywkę nalać do buteleczek na wysokość około 1 cm, zwracając uwagę na to by nie zabrudzić ścianek pożywką. Buteleczki zakorkować i poczekać aż całość zastygnie.

Po ostygnięciu pożywki, umieścić w środku każdej buteleczki bibułkę, a następnie jedną larwę lub poczwarkę. Całość dokładnie zamknąć i opisać.

• Otrzymanie pokolenia rodzicielskiego P

Po przepoczwarzeniu larw oznaczyć płeć uzyskanych owadów, z których należy później wybrać osobniki do krzyżówki.

Do dużych butelek z pożywką nałożyć po jednym krążku bibuły, a następnie wpuścić osobniki P:

I hodowla samce A x samice B

II hodowla samice A x samce B

• F1

Po tygodniu od założenia krzyżówek należy usunąć osobniki rodzicielskie z hodowli. Całość pozostawić do czasu pojawienia się imago F1.

Wszystkie osobniki F1 przenieść na nową pożywkę - nie łączyć hodowli!

Tydzień później przenieść F1 do butelek bez pożywki, następnie uśpić eterem.

Usypianie much: watę nasączyć niewielką ilością eteru i delikatnie zakorkować nią wlot butelki. Kiedy owady przestaną się poruszać przesypać je na szalki.

Należy określić fenotyp osobników oraz określić liczbę samic i samców w każdej klasie fenotypowej.

Dokładnie zamknąć butelki z hodowlą i pozostawić do przepoczwarzenia F2

• F2

Przepoczwarzone osobniki pokolenia F2 uśpić eterem, określić fenotyp oraz liczbę samic i samców w każdej klasie fenotypowej.

---