Oznaczanie stężenia żelaza metodą kolorymetryczną
Do 6 probówek dodać kolejno: 0, 1, 2, 3, 4 i 5 ml roztworu wzorcowego żelaza o stężeniu 5µg/ml. Do ostatniej 2 ml próby badanej. Zawartość wszystkich probówek uzupełnić wodą do 5 ml i dodać 0,5 ml 10% roztworu kwasu sulfosalicylowego oraz 0,5 ml 20% amoniaku. Próby wymieszać i zmierzyć absorbancję przy λ= 420 nm.
Lp. |
Wzorzec Fe (5µg/ml) |
H2O |
kwas sulfosalicylowy |
amoniak |
absorbancja próbki (A420) |
1 |
0 ml |
5 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
kontrola |
2 |
1 ml |
4 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
3 |
2 ml |
3 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
4 |
3 ml |
2 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
5 |
4 ml |
1 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
6 |
5 ml |
0 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
Próba badana |
4 ml próby badanej |
1 ml |
0,5 ml |
0,5 ml |
|
Część obliczeniowa:
• Obliczyć mnożnik w g/ml i µg/próbę
• Obliczyć współczynniki kalibracji w g/ ml i µg/próbę
• Wykreślić krzywą wzorcową g/ml i w µg/próbę
• Odczytać z krzywych stężenie żelaza w badanej próbie
• Obliczyć stężenie żelaza w badanej próbie ze średnich wartości współczynnika kalibracji
• Porównać wyniki obliczone na podstawie współczynniki kalibracji z wynikami odczytanymi z krzywej wzorcowej.
Vwz ml |
A wzorca |
mnożnik µg/ml |
mnożnik µg/próbę |
f µg/ml |
f µg/próbę |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
wartości średnie |
|
|
|
|
|
Vpb ml |
Apb |
Cpb (µg/ml) z mnożnika |
ilość µg/próbę z mnożnika |
Cpb (µg/ml) wyliczone z f |
ilość µg /próbę wyliczone z f |
|
|
Cpb (µg/ml) z krzywej |
Cpb µg/próbę z krzywej |
− |
− |