Mikrobiologia

Metody barwienia i morfologia drobnoustrojów.

Mikrobiologia drobnoustrojów:

Opis komórki - kształt

- wielkość

- ułożenie

- sposób barwienia

Struktury komórkowe- rzęski

- otoczka

- przetrwalniki

- zmiana wolutynowe

Podział drobnoustrojów ze względu na kształt i ułożenie.

Kuliste- dzwonki

- czwórki

- pakietowce

- granulowce

- paciorkowce

Cylindryczne- pałeczki

- laseczki

- formy nieregularne

Spiralne- przecinkowce

- śrubowce

- krętki

Typy ułożenia przetrwalników przetrwalników komórce.

1. terminalne (biegunowo)

2. subterminalne (podbiegunowo)

3. paracentralne (przyśrodkowo)

4. centralne (środkowo)

Typy urzęsienia komórki bakteryjnej

Monotricha - jednorzędne

Ditricha - 2rzęsne

Lofotricha - jednobiegunowe (2-6 rzęsek)

Antyfricha - jednobiegunowe

Antytricha - 2 biegunowe

Pertitricha - wielorzęsne

Nietypowe

Typy wzrostu bakterii w podłożonych płynach

(zapotrzebowanie na tlen)

1. bezwzględne - tlenowe

2. względne tlenowe

3. mikroaerofile

4. bezwzględne - beztlenowe

- ścisłe

- umiarkowane

Rodzaje preparatów

- bezpośredni - wykonany z materiału klinicznego

pobranego od pacjenta

- pośredni - wykonany z 18-24 godz.

Hodowli drobnoustrojów

Przygotowanie preparatu:

-odtłuścić szkło podstawowe

- zawiesić kolonie bakteryjną w kropli NaCl

- pozostawić preparat do wyschnięcia w temp.pok.

- ustawić preparat w płomieniu palnika

Metody barwienia drobnoustrojów

- proste ( 1 barwnik)

- złożone (min 2 barwniki)

- pozytywne ( wybarwiamy komórki)

- negatywne (wybieramy tło, kolory czarne)

Barwienie matodą Grama

Bakteria gram+ bakteria gram-

-Fiolet krystaliczny( fioletowy)2-3 min. (fiolet)

-Płyn lugula (fiolet) 1 min. (fiolet)

-odbarwiacz (fiolet) (bezbarwny)

- fuksyna (fiolet) (czerwony)

Podział bakterii w barwieniu metodą grama

- gram dodatni ( staphylococus sp. Balilus sp.)

-gram ujemny ( entyrobacteriace sp. Neisseria sp.)

-gram chwiejne ( corynebacterium sp.)

-atypowe ( chlanydia sp.)

Metody hodowli i identyfikacji bakterii

Metody chatektrystyki drobnoustrojów

- metody mikroskopowe

- metody izolacji na odpowiednich pożywkach

- metody immunologiczne i genetyczne

- biologiczne

Diagnostyka bakteriologiczna

- bakterioskopia

- pożywki bakteriologiczne

- identyfikacje biochemiczne

- identyfikacje serologiczne

- identyfikacje genetyczne

Podziały podłóż

- płynna> bulion mięsny> bulion peptonowy

> bulion drożdżowy

- półpłynna> agar(0.5%- 1%)

- stała> zestalone agarem(1,5-3%)

Zawartość substancji

- syntetyczne

- półsyntetyczne

- naturalne

Ilość jakość składników odrzwczych

- proste (podstawowe)np. woda peptydowa,

agar zwykły / gronkowce/

- złożone(wzbogacone) np. agar z krwią

/paciorkowce/

- wybiórcze(selektywne) np. pożywka z

centrymidem dla pseudonomas

pożywka z eskuliną dla enterococus

- wybiórczo-(namarzające) np. bulion z

żółcią+agar dla salmonella

- wybiórczo (różnicujące) np. pożywka

champana dla stophylococcus

- specjalne np. pożywka Lorensteina-Jansena

dla Mycobacteriumagar czekoladowy dla

Hoenphilus, Neisseria

- transportowe(umożliwiaja transport

szczepów w laboratorium

Wstępna identyfikacja bakterii>

posiew redukcyjny

Kolonia bakteryjna - zespół osobników

powstałych z 1komórki macierzystej na

podłożu stałym

Morfologia kolonii

-kształ -wyniosłość

-kolor -przejrzystość

-wielkoś -zapach

-struktura -konsystencja

-brzeg -zawieszalność

-powierzchnia typ.hemolizy(podłoża

z krwią baranią-a b i y)

Identyfikacja bakterii

*biochemiczne - badanie jednej cechy

-szeregi biochemiczne

GLU+, ARA- ,ODC+, CIT+

*serologiczna - wykrywanie antygenów

-aglutynacja

-precypitacja

-metody znakowania

*genetyczna - izolacja materiału genetycznego

-hybrydyzacja kwasów nukleinowych

-PFGE(elektrofaza w zmiennym polu elektrycznym)

-PCR(reakcja łańcuchowej polimerazy)

-LCR(reakcja łańcuchowej ligazy)