1 detektory: spektrofotometr UV-Vis - umożliwia rejestracje widma absorpcji substanjci znajdujacej się w detektorze i ustalenie dlugosci fali przy której występuje maksimum absorpcji. Stosunek wartości absorbacji pokazuje nam ilośc związków chemicnzych w detektorze.
Detektor fluorescencyjny- wykonuje pomiar intensywnosci światła o określonej długosci fali emitowanej przez wykrywany związek w wyniku jego pobudzenia. Stosuje się do zwiazkow które mają zdolnosc do fluorescencji, np. zwiazki aromatyczne.
Detektor refraktometryczny - mierzy różnicę współczynnika załamania światła eluentu i roztworu substancji wymywanej z kolumny w tym eluencie, stosuje się do wykrywania cukrów, alkoholi.; dekektor elektrochemiczny, konduktometryczny, radiometryczny, spektrometr mas.
2.typy układów:
układy faz normalnych ( faza ruchoma jest mniej polarna niż stacjonarna)
uk. faz odwróconych ( ruchoma bardziej polarna niż stacjonarna )
fazy podziałowe
rodzaje faz stacjonarnych:
- fazy nieorganiczne typu np. i RP → żel krzemionkowy, tlenek glinu, ditlenek tytanu, krzemian magnezu
fazy stacjonarne związane typu N P i RP → aminowa, nitrowa, CN.
wzrost gradientu stężeń stusujemy w eluacji gradientowej. następuje wzrost siły eluacyjnej fazy ruchomej przez zmianę jej składu w kierunku wzrostu zawartości organicznego modyfikatora eluentu. Elucja gradientowa ma szerokie zastosowanie w przypadku chromatografowania mieszaninnzłożonych, zawierających składniki różniące się znacznie polarnością, jest niezbędna przy rozdziale białek i peptydów w RP HPLC.
Sprawnosc kolumny - zdolnosc kolumny do wytwarzania waskich pików, jej miara jest ilosc półek teoretycznych. Na skutek oddziaływań międzycząsteczkowych między związkami tworzącymi mieszanię a złożem jedne z nich przechodzą przez złoże szybciej a i inne wolniej HPLC różni się od zwykłej chromatografii cieczowej ciśnieniem pod jakim podawany jest eluent na kolumny. Są to dość znaczne ciśnienia, przekraczające 100 atmosfer Dzięki takiemu ciśnieniu złoże w kolumnach HPLC może być bardziej "upakowane" niż w kolumnach do zwykłej, niskociśnieniowej chromatografii cieczowej, co powoduje znacznie lepszy rozdział analizowanych mieszanin na poszczególne związki chemiczne, w znacznie krótszym czasie, przy mniejszym zużyciu eleunta i mniejszej ilości analizowanej próbki